副肿瘤抗体与疾病
抗体名称 Hu Yo PCA-2 Tr Ri amphiphysin CRMP 肿瘤类型 小细胞肺癌 妇科肿瘤 小细胞肺癌 Hodgkin‘s 淋巴瘤 乳腺癌 乳腺癌及小细胞肺癌 周围神经 靶组织或细胞 神经元核 Purkinje 细胞 Purkinje 细胞 Purkinje 细胞 神经元核 疾病 感觉性神经病、脑脊髓神经病 小脑性共济失调、感觉或运动 神经病 边缘叶脑炎、LEMS、 自主神 经病、运动神经病 亚急性小脑共济失调 眼阵挛 脑脊髓神经根神经病 周围神经病
OB
• 克隆(clone)指一个无性细胞株。 • 寡克隆(oligoclone):两个或多个细胞克隆活化造成 不连续IgG带群。 • 寡克隆区带(al bands, OB)是一电泳用语，是检测 鞘内Ig合成的又一重要方法。 • 测定方法及要点：IEF＋银染；CSF与血同时电泳， 蛋白量标化。 • 意义：OB是MS诊断的重要参考指标，但是OB的 存在并非MS病人所特有，在其它神经系统疾病中 也可出现。
细菌性脑膜炎
• 指标：细菌抗原 • 检测方法：对流免疫电泳、乳胶凝集试验、 放射免疫法及ELISA等 • 临床不常用
结核性脑膜炎
• 指标：结核抗体 • 检测方法：ELISA法检测 • 检测的敏感性、特异性与所用的方法以及所用 的抗原特异性有关。 • 常用的抗原：PPD
新型隐球菌脑膜炎
• CSF隐球菌荚膜多糖抗原检测
• 特异性：TPHA、FTA-ABS
VDRL(Venereal Disease Research Laboratory)
• 抗原与抗体（反应素）反应，加入卵磷脂加强心磷脂的 抗原性，加入胆固醇增强抗原的敏感性 • 优点特异性较高，用于诊断神经梅毒的特异性为100%， 美国CDC诊断标准提到若CSF－VDRL实验(+)，即可诊 断神经梅毒 • 缺点敏感性仅为27%，特别是在无症状神经梅毒中仅 10%。抗原需要灭活，试剂需临时配制，需要显微镜， 目前多用改良RPR实验代替。
USR (unheated serum reagin)
– 应用改良的VDRL抗原 – 优点抗原不需灭活，操作时间短 – 缺点借助显微镜观察
RPR(rapR原理相似 – 抗原结合在活性炭上，出现肉眼可见的凝聚颗 粒 – 优点抗原不需灭活，不需临时配制，不需显微 镜 – 缺点较VDRL易出现假阳性
24hIgG合成率
• 比浊法测定血、CSF中的IgG、Alb • Tourtellotte(1975)计算公式：IgGsyn=[(IgGcsf-IgGs/369)-(AlbcsfAlbs/230)×(IgGs/Albs)×0.43]×5 • 注释：IgGcsf、IgGs、Albcsf、Albs单位均为mg%。369是正常情况 下血中IgG通过完整血脑屏障进入CSF中的比例，由正常血中IgG除以 正常脑脊液中IgG而得。所以IgGs/369是依据病人血中IgG和正常脑脊 液/血比例而得到的可能由血中进入脑脊液中的比例。230由正常血中 Alb除以脑脊液中Alb而得，所以Albcsf-(Albs/230)是通过损害血脑屏 障进入脑脊液中的量，此数再乘以(IgGs/Albs)×0.43就转化为一对一 分子量状态下跨过破坏血脑屏障的过多的Alb与IgG之比。由此得到的 是100ml内产生的IgG量(mg)，每天产生和吸收500ml脑脊液，再乘以 5转化为每500ml(即每天)合成的IgG量。 • 正常值：-9.9－3.3 mg/dl。高于此值提示鞘内IgG合成率增加。
补体结合试验
• 用于检测特异性抗原或抗体。 • 原理：利用抗原-抗体结合后能够吸附和激活 补体的特性。第一步用已知的抗原（抗体） 加入待测的抗体（抗原），加入补体。第二 步羊红细胞及相应抗体的指示系统，如存在 未知的抗体（或抗原）则吸附补体，后加入 的指示系统缺乏补体而不溶血，否则，产生 溶血。
凝集试验
副肿瘤综合征
抗Yo:抗Purkinje 细胞抗体 (APCA) 抗Hu：抗神经元核抗体 (ANNA) 正常情况下血和脑脊液中一般无抗神经元抗体，在无神经系统表 现的肿瘤患者抗体滴度较低，而在伴有副肿瘤综合征的肿瘤患者 抗体滴度较高。 80%以上的抗Hu抗体阳性患者有小细胞肺癌。 90%的抗Yo抗体阳性患者有妇科肿瘤，通常为卵巢癌或乳腺癌。 P/Q-型VGCC抗体阳性率在重症肌无力病人≤5％，而LambertEaton肌无力样综合征则高达95%，这有助于二者的鉴别。
MS
• MBP (myelin basic protein) • 24hIgG合成率 • OB
MBP
– 是中枢神经系统髓鞘蛋白的主要成分之一， 约占髓鞘蛋白量的1/3，是中枢神经系统发生 自身免疫病的重要靶抗原 – 检测脑脊液中MBP及抗MBP抗体是中枢神经 系统自身免疫性疾病有用的辅助指标 – 一般采用ELISA法
神经系统疾病的免疫学检测 指标及临床意义
首都医科大学附属天坛医院神经内科 张星虎
内容
• 免疫学诊断方法介绍 • 各种神经系统疾病的免疫学检测指标
– 神经系统感染性疾病 – 神经系统免疫性疾病 – 副肿瘤综合症 – 系统性免疫性疾病
免疫学诊断的相关概念
• 结果表示：定性、半定量、定量 • 效价或滴度（titer） • 敏感性：某种检测方法显示的阳性例数/所检测的 确定诊断的病例数 • 特异性：某种检测方法显示的阴性例数/所检测的 无关病例数 • 假阳性：1-特异性 • 假阴性：1-敏感性
单纯疱疹病毒性脑炎
• CSF HSV抗体阳性判定标准
– 滴度达1：80以上 – 血与CSF抗体比小于40 – CSF抗体有4倍以上升高
TORCH
• • • • 弓形虫（Toxoplasma） 风疹病毒（Rubella Virus） 巨细胞病毒（Cytomegalovirus） 单纯疱疹病毒（Herpes simpiex Virus）
• 大颗粒抗原与相应抗体相结合，形成可见的凝集 复合物。 • 分类：细菌凝集反应、直接血细胞凝集反应、间 接血细胞凝集反应、反相血凝、协同凝集、乳胶 凝集反应 • 间接血凝：先将特异性抗原吸附于绵羊红细胞上， 加入待测样本，如果样本中含有特异性抗体，就 会与羊红细胞上的抗原结合，使羊红细胞产生凝 集反应。
各种梅毒检测方法的比较
特异性螺旋体抗体检测（CSF FTA-ABS /TPHA）主要用于确定诊断，特别是若 结果阴性可排除神经梅毒。 非 特 异 性 螺 旋 体 抗 体 检 测 （ CSF － VDRL）可用于神经梅毒筛查及疗效监 测。 联合应用CSF及血FTA－ABS、TPHA， 诊断神经梅毒的特异性和平均敏感性可 达到94%和87%。
GBS
• 神经节苷脂（GM1）抗体 • P2蛋白及抗体
GM1抗体
• 神经节苷酯(gangliosides)是一组酸性糖脂，由脂 类和糖基组成，人类主要有四类神经节苷酯，分 别是GM1、GD1a、GD1b和GT1b，每一种神经 节苷酯都含有相同的4个糖链，但唾液酸数目不同， GM1含有1个唾液酸，GD1a和GD1b含有2个唾液 酸，GT1b含有3个唾液酸。 • GM1是在神经元膜上分布最为丰富的神经节苷酯。 • 高滴度抗GM1抗体对下运动神经元综合征和MMN 具有极高的特异性，低滴度抗体无特异性。
P2蛋白及抗体
• 周围神经的髓鞘中含有P0、P1、P2 、X、 Y等蛋白成分。 • P1为中枢和周围神经系统所共有。 • P2分子量较小为周围神经所特有。 • 在AIDP和CIDP患者的脑脊液中检测到P2蛋 白抗体，并发现其水平与其病情相关，可 用于临床诊断、病情和疗效观察。
MG
• 乙酰胆碱受体抗体（AChRAb） • 检出率为85-95% • 约10-15%全身型MG患者测不出
免疫荧光试验
• 用荧光色素标记已知的抗体或抗原，在 特定条件下用标记物浸染标本，使标记 的抗体或抗原与待测的抗原或抗体结合， 用荧光显微镜观察形成的抗原抗体复合 物。
酶联免疫吸附试验（ELISA）
• 原理：将已知的抗原或抗体吸附于固相载体 上（包被），加入待测样本使抗原抗体特异 性结合，加入酶标抗体，通过酶促反应作用 于特定的底物，产生成色反应，通过酶标仪 测定结果。 • 分类：间接法、双抗体夹心法、竞争法 • 特点：操作简便快速、敏感性及特异性高
检查方法：免疫组化、免疫印迹、ELISA
系统性免疫性疾病
• • • • • • • • • 抗核抗体(ANA) 抗ds-DNA 抗可提取性核抗原抗体(抗ENA) 抗心磷脂抗体(ACA) 抗线粒体抗体(AMA) 抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab) 抗甲状腺微粒体抗体（抗TM） 抗中性粒细胞胞桨抗体（ANCA） M－蛋白
脑囊虫病
• 囊虫抗体检测：
– – – – 方法：ELISA、IHA、IF、LA等 阳性率80％以上，特异性90％以上 两种方法联合可提高阳性率 CSF抗体检测更有意义，血清抗体只能说明体内 有过感染或正在感染
• 囊虫抗原检测
– ELISA – 可用于诊断及疗效评价
神经梅毒
• 非特异性：VDRL、RPR、USR
AIDS
–抗HIV抗体阳性经确诊试验证实者 –P24抗原阳性（有条件单位可查） –CD4淋巴细胞总数小于200／mm3或200－500／mm3 –CD4／CD8比值小于1 –外周血WBC及T细胞绝对计数下降
血清HIV抗体快速测定试剂盒
阳性
阴性
神经系统免疫性疾病
• GBS • 重症肌无力 • 多发性硬化
TPHA (treponema pallidum haemagglutination assay)
可溶性螺旋体抗原与绵羊红细胞结合
血清抗体与致敏红细胞结合显示凝聚反应
敏感性及特异性高
FTA-ABS (fluorescent treponemal antibody absorbance test) – 抗原吸附于玻片 – 再加血清（抗体） – 加入荧光素标记的抗人IgG – 显微镜观察 – 诊断准确性高，假阳性低