蛋黄卵磷脂的提取方法研究
根 测 定 结 果 绘 制 磷 标 准 曲 线 , 其 磷 标 准 曲 线 为 w (p)=0.0812x+ 0.0072,式中 x 为吸光度,w 为含磷量(ug)。
2.2 蛋黄卵磷脂粗提试验结果 蛋黄卵磷脂粗提试验结果见表 1。
表 1 蛋黄卵磷脂粗提试验结果
有机溶剂提取法
酶解法
原 料 (g)
加样回 收率(%) 卵磷脂 含磷 量(%) 加样回 收率(%) 卵磷脂 含磷 量(%)
3.3 高校宽松的管理体制,缺乏必要的网络文明教育 目前,关于规范文明使用网络的法律法规并不完善。 网络法律法 规并不健全,即使现有的法律法规也比较陈旧,不能适应迅速发展的 网络环境,这给高校网络文明环境带来了极大的挑战。 高校还未形成 网络教育和辅导队伍,缺乏实效性的管理机制。 思政教育不能与网络 文明教育很好的结合起来, 高校网络文明教育缺乏实效性和正对性。 在此次调查发现,各系(院)在学生思政教育比较少涉及到大学生的网 络文明建设,学校开展诸多活动也很少涉及到有关学生网络文明。 高 校作为大学生网络文明建设主要场所,并未占领网络文明系统建设的 主阵地,基本没有形成良好的校园网络文化氛围。 学生群体中的学生 权益保障委员会也没有专门针对网络文明成立相对的“网络文明督导 小组”。 大学社团里也没有形成相应的“网络文明”协会。 4.提 升 大 学 生 文 明 使 用 互 联 网 的 对 策 4.1 加强对互联网的监控,净化网络环境 网络作为现代信息传播的媒介,具有方便、快捷、信息量大等诸多 优点,对当代大学生的学习生活起了良好的辅助作用。 但是,受市场经 济过分追逐利益的不良社会风气的影响, 网络经营者以及软件开发 者,利用大学生的猎奇心理以及对互联网的过分依赖,肆意传播与文 明相悖的信息。 首先政府及其相关部门要认真贯彻《中共中央关于加 强和改进思想政治工作的若干意见》,加强对互联网的监控,加大打击 力度。 做好网络文明宣传工作,督促厂商自觉遵守行业道德与职业道 德,从源头上净化网络环境。 其次作为网络游戏的开发商、网站及网吧 的经营商身上要流有道德的血液,自觉遵守相应的法律法规,净化大 学生使用网络的环境。 再次,学校有关部门要规范网络使用的管理办 法。 采取多种手段来加强对网络的监控和管理,对大学生进行网络道 德 教 育 , 制 定 大 学 生 网 络 网 络 行 为 准 则 [2]。 4.2 拉近心灵距离,建立和谐的亲子关系 首先,要建立良好的家庭环境。 大学生的行为方式可以从其家庭 环境、家庭氛围中找到依据[3]。 在与部分同学访谈后 ,基本可以得出这 样一个结论,那些在缺乏关爱和理解的家庭中长大的孩子相对比较孤 僻,性格比较怪异。 容易出现无聊、空虚等情况,相应的也就比较容易 沉迷于网络,他们认为网络可以使自己得到认可和尊重;因此,作为家 长要认真关注的孩子的心理成长历程, 父母亲应主动加强与子女沟 通,尽量不要给孩子心理负担,营造良好的家庭气氛,为在校大学生提 供一个和谐的家庭环境。 其次,运用人性化的关怀来对待孩子的网络行为。 许多家长发现 自己的孩子沉迷于网络之后,采取粗暴的方式来解决问题,而没有从 学生的角度出发。 大学生处于世界观人生观和价值观形成的重要时 期,还未形成理性思维,容易受到不良思想和行为的影响。 当大学生不
脂的总得率为 8.66%,卵 磷 脂 的 含 磷 量 为 13.77%;经 酶 解 法 粗 提 和 柱
硅 胶 层 析 法 纯 化 后 卵 磷 脂 的 总 得 率 为 10.95%, 卵 磷 脂 的 含 磷 量 为
14.57%;经 酶 解 法 粗 提 后 再 经 金 属 离 子 复 合 沉 淀 法 纯 化 卵 磷 脂 总 得 率
化法
13.77
酶解法粗提+柱硅 胶层析纯化法
12.73
10.59
14.57
酶解法粗提+金属 离子复合沉淀纯化
法
12.73
10.95
13.09
由表 3 可以看出:各用 300g 蛋黄进行提取和纯化试验,经有机溶
剂粗提和柱硅胶层析法纯化后卵磷脂的总得率为 8.38%,卵磷脂的 含
磷量为 15.33%; 经有机溶剂粗提和金属离子复合沉淀法纯化 后 卵 磷
2.3 蛋黄卵磷脂纯化试验结果 蛋黄卵磷脂纯化试验结果见表 2。
表 2 蛋黄卵磷脂纯化试验结果
原
柱硅胶层析法
金属离子复合沉淀法
料
(g) 卵磷脂 回收 率(%) 卵磷脂含磷量(%) 卵磷脂回收率(%) 卵磷脂含磷量(%)
300
83.21
15.33
85.98
13.77
由表 2 可以看出:通过有机溶剂粗提后经柱硅胶层析法纯化卵磷 脂的加样回收率为 83.21%,其中卵磷脂的含磷量为 15.33%;经金属离 子复合沉淀法纯化卵磷脂的加样回收率为 85.98%, 其中卵磷 脂 含 磷 量为 13.77%。 说明经柱硅胶层析法提纯卵磷脂粗品比金属离子 复 合 沉淀法所获得的纯度高。
2.4 交叉组合试验结果比较 蛋黄卵磷脂提取与纯化交叉组合试验结果比较见表 3。
表 3 蛋黄卵磷脂提取与纯化交叉组合试验结果比较
项目
粗提得率(%) 纯化回 收总 得率(%) 卵磷脂含磷量(%)
有机溶剂粗提+柱 硅胶层析纯化法
10.07
8.38
15.33
有机溶剂粗提+金
属离子复合沉淀纯
10.07
8.66
2011 年第 23 期
◇高教论述◇
蛋黄卵磷脂的提取方法研究
曲怀坤 (临沂市技术学院 山东 临沂 276000)
【摘 要】为探讨从蛋黄中提取蛋黄卵磷脂的方法。试验以蛋黄为原料,采用有机溶剂和酶解法从蛋黄中提取卵磷脂粗品,然后分别经柱硅 胶层析和金属离子沉淀法纯化获得卵磷脂精品 ,通过测定卵磷脂的含磷量 ,判断其纯度高低。 结果显示:采用有机溶剂法获得蛋黄卵磷脂粗品 , 然后经柱硅胶层析纯化可获得高纯度蛋黄卵磷脂精品,总得率为 8.38%,卵磷脂的含磷量为 15.33%。 是一种高效、经济的蛋黄卵磷脂提取方法。
1.1.2 试验仪器 三角瓶、容量瓶、微量移液器、真空干燥箱、旋转蒸发器、玻璃棒、 分光光度计、电子分析天平、真空干燥器、冷冻干燥器、循环式真空泵、 电动搅拌器、离心机、微量进样器、电炉、坩埚。 1.2 试验方法 1.2.1 蛋黄卵磷脂的粗提 (1) 有 机 溶 剂 提 取 法 首先将鸡蛋打破,分离蛋黄,将蛋黄放入洁净的带塞的三角瓶中, 加入 92%乙醇(用量 12ml/g)浸取 ,搅 拌 60min 后 ,静 置 15min,然 后 加 入 乙 醚 (用 量 为 乙 醇 用 量 的 1/3),搅 拌 15min 后 静 置 15min,过 滤 ,将 滤液收集放入旋转蒸发器中低温、减压浓缩,加入一定量的丙酮除杂, 卵磷脂即沉淀出来,过滤,用丙酮冲洗几次,至冲洗液无色,即得蛋黄 卵磷脂粗品。 在真空干燥箱中干燥后,充入氮气低温保存。 (2) 酶 解 法 首先将鸡蛋清洗、杀菌、打蛋去壳,分离蛋黄,将蛋黄放入洁净的 带塞的三角瓶中,加入 0.06%的蛋白酶,在温度 25℃的环境下实验,加 90%的乙醇搅拌,然后用离心机离心、提取(反复 3 次),合并上清液、蒸 发回收、冷冻干燥,最后得到卵磷脂粗品。 1.2.2 蛋黄卵磷脂的纯化 (1) 柱 硅 胶 层 析 法 将适量的柱硅胶(60~100 目)用氯仿打成浆状、湿法装柱。 用不同 浓度的氯仿/甲醇混合液连续冲洗(氯仿:甲醇的体积比分别为 40:1、35: 1、30:1、25:1、20:1、15:1、10:1、5:1、1:1、2:3、1:2),每个浓度以 100ml 总量 加入,当 加 入 氯 仿/甲 醇 浓 度 为 1:1 时 ,以 后 的 溶 液 加 入 量 根 据 需 要 变 大。 收集氯仿/甲醇比例为 1:2 洗脱液,然后放入旋转蒸发器浓缩成膏 状,再在冷冻干燥器中干燥,即得卵磷脂精品,放入密封瓶内充入氮气 低温保存。 (2) 金 属 离 子 复 合 沉 淀 法 把卵磷脂粗品溶于无水乙醇中,加入 金 属 沉 淀 剂 40%的 ZnCl2 水 溶液,待生成沉淀后,分离出沉淀物,而后加入丙醇洗涤,然后放于真 空中干燥,最终得到精制的卵磷脂。 1.2.3 蛋黄卵磷脂含磷量的测定 分 光 光 度 法(GB/T 5009.87-2003)测 定 蛋 黄 卵 磷 脂 中 的 含 磷 量[2], 以含磷量的高低,判别其纯度的高低。 2.结 果 与 分 析 2.1 蛋黄卵磷脂含磷量的测定标准曲线
近年来,由于卵磷脂的用量不断增长,对它的提取研究得到很大 发展,以形成了许多方便、有效的提取方法。 本试验采用不同的方法提 取,并纯化蛋黄卵磷脂,以探讨不同方法提取和纯化蛋黄卵磷脂的效 果。
1.材 料 与 方 法 1.1 试验材料 1.1.1 材料与试剂
新鲜鸡蛋、无水乙醇、乙醚、丙酮、甲醇、氯仿、蛋白酶、氯化镉、抗坏血 酸 、金 属 沉 淀 剂 (ZnCl2) 、丙 醇 、钒 钼 酸 铵 。
为 10.95%,卵磷脂的含磷量为 13.09%。 四种组合方法对比可知,以有
机溶剂粗提+柱硅胶层析纯化法进行蛋黄卵磷的提取和纯化效果最
好,获得的蛋黄卵磷脂的纯度较高。
3.讨 论
(下转第 34 页)
100
2011 年第 23 期
◇高教论述◇
强的学生对网络产生强烈的神秘感。 二是家长与学生缺乏必要的沟 通,如孩子上网与学习时间的合理搭配,以及必要的网络知识等。 这些 缺乏人性化的教育方式容易造成不解、使学生与家长产生代沟甚至升 级为争执。 并最终导致子女觉得无法在家长身上找寻到家的温暖,体 会不到人性的关怀和伟大。 从而更多地把注意力转投向可以给他们带 来慰藉的网络上面。
【关键词】蛋黄卵磷脂;提取;纯化
卵磷脂是由甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷 脂类物质,它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份。 研究 发现卵磷脂具有延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆 力 ,促 进 脂 肪 代 谢 、防 止 出 现 脂 肪 肝 、降 低 血 清 胆 固 醇 等 方 面 的 作 用 [1]。 被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。 在西方国家卵磷脂被 誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。 卵磷脂在动植物体内分 布广泛,其中以蛋黄中含量最为丰富。