Ｈ
图３左氧氟沙星降解产物的结构 Ｆｉｇ．３
Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ ｏｆｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ
万方数据
左氧氟沙星的有关物质研究进展王维剑等
．８２３
国药典中氧氟沙星杂质Ｆ的左旋异构体（见图１）。另 外，美国药典对照品目录中收载了左氧氟沙星的两 个已知杂质左氧氟沙星相关物质Ａ和左氧氟沙星相关 物质Ｂ的结构，分别为欧洲药典、英国药典中氧氟沙 星杂质Ｅ、Ａ的左旋异构体（见图１）。 ３左氧氟沙星的有关物质检测方法 近ｌ ５年关于左氧氟沙星的有关物质的研究报道 多以检测方法的研究为主，而中国药典、美国药 典、欧洲药典、英国药典、日本药典中均未收载左 氧氟沙星的质量标准。目前左氧氟沙星的质量标准 收载于国家标准以及进口标准中，均未对已知杂质 进行控制，见表ｌ。左氧氟沙星质量标准中有关物质 均采用的是反相高效液相法，色谱条件基本一致，
１．１
工艺杂质 左氧氟沙星与氧氟沙星的生产工艺均已比较成
美的合成抗菌荮ｓ】。氟喹诺酮类抗生素是在喹诺酮结
构的６位引入氟、７位引入哌嗪环而得到的一类衍生 物【４】。有文献报道，氟原子的引入使氟喹诺酮类抗 生素对革兰阴性菌和阳性菌的抗菌谱变宽，抗菌效 力增强【５】。氧氟沙星（ｏｆｌｏｘａｃｉｎ）是日本第一制药株式 会社研发合成的第三代广谱氟喹诺酮类抗菌药，对 大多数革兰阳性菌和革兰阴性菌均有明显的抑制作 用。临床上主要用于敏感菌所致的呼吸系统感染、 泌尿生殖系统感染。左氧氟沙星（１ｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ）为氧 氟沙星的左旋异构体，其抗菌作用约为氧氟沙星的２ 倍，具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点。而氧氟沙 星的右旋异构体几乎没有抗菌作用，并且其毒性大 于左旋异构体。因此，左氧氟沙星在临床上得到了 广泛应用。目前，左氧氟沙星是唯一的一种是被美 国ＦＤＡ批准用于治疗医院获得性肺炎的氟喹诺酮类 抗生素【６】。本文重点对近１５年来国内外左氧氟沙星的 有关物质研究进行综述。 ｌ左氧氟沙星的已知杂质 杂质的来源主要分为２个途径，一是工艺杂质， 即生产中可能带入的起始原料、试剂、中间体、副
Ｒｅｃｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｓ ｏｆ ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ
Ｗａｎｇ Ｗｅｉ－ｊｉａｎ，Ｘｉｅ
（Ｓｈａｎｄｏｎｇ
Ｙｕａｎ－ｃｈａｏ，Ｌｉｕ ｑｉ ａｎｄ Ｌｉ Ｊｕｎ
Ｐｒｏｖｉｎｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｊｉｎａｎ
不同标准中左氧氟沙星药物的有关物质测定方法［３６－４６１
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｌｌｏｄｓ ｏｆｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ
品名
标准
有关物质检查方法
纛嚣
光学异构体检查方法鬻嚣
万方数据
８２４．
中国抗生素杂志２０１０年１１月第３５卷第１１期 成工艺研究［Ｊ】．中国医药工业杂志，１９９１，２２（９）：３８５．３８９． 【９】９ 王训道，谭翎燕，王斌．氧氟沙星的合成改进【Ｊ】．中国抗生 素杂志．２００３，２８（６）：３４１．３４３． 【１０】 杨玉社，嵇汝运，胡增建，等．左氧氟沙星不对称合成新方 法研究［Ｊ】－药学学报，１９９８，３３（１ １）：８２８—８３０．
８２１．
ａｃｉｄ）进入临床；１９７９年第１４＂合成的氟喹诺酮类抗菌 剂诺氟沙星（ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ）出现；现今众多的广谱氟喹 诺酮类药物得到了广泛应用。在抗生素领域，氟喹 诺酮类抗生素是唯一可以与Ｄ．内酰胺类抗生素相媲
产物和异构体等；二是降解产物，即药品在贮藏、 运输、使用过程中由于自身性质不稳定而产生的各 种杂质。
熟，国内外文献报道较多【，。，】。其中氧氟沙星的合成 路线主要以２，３，４一三氟硝基苯为起始原料，经碱水 解，与一氯丙酮缩合得醚酮，再经还原反应，与乙 氧亚甲基丙二酸二乙酯（ＥＭＭＥ）缩合；再以多聚磷酸 乙酯（ＰＰＥ）或多聚磷酸为环合剂进行环合，以盐酸、 冰乙酸进行水解，得羧酸物，羧酸物与Ｎ．甲基哌嗪 缩合，精制，得氧氟沙星。而氧氟沙星的工艺杂质 主要为最后一步反应的中间体以及副反应产物。英 国药典以及欧洲药典共收载了氧氟沙星的６个已知杂 质，见图ｌ。其中杂质Ａ为氧氟沙星合成工艺中最后 一步反应的中间体；杂质Ｄ为氟取代位置不同的一个 反应副产物。因此，杂质Ａ、Ｄ均为氧氟沙星的工艺 杂质。 左氧氟沙星的合成工艺有所不同，国内多以２，３， ４，５．四氟苯甲酸（化合物１）或２，３，４，５．四氟苯甲酸乙 酸乙酯（化合物２）为起始原料，经多步反应，并通过 手性合成的手段，最终得到终产品，见图２，左氧氟 沙星和氧氟沙星的合成路线图中最后３步反应完全一 致，不同的是，氧氟沙星所有中间体以及终产物均
２５０１０１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｉｓ
ａｎ
ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓｂｌｉｓｈ ａｎｄ ｉｓ ｔｈｅ ｉｅｖｏ ｉｓｏｍｅｒ
ｏｆ ｏｆｌｏｘａｃｉｎ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｉｓ ｂｒｏａｄｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ｓｏ ｉｔ ｉｓ ｗｉｄｅｌｙ ｕｓｅｄ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃｓ．Ｔｈｅ ｒｅｃｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｓ ｏｆ ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ ｗａｓ ｒｅｖｉｅｗｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ， ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ；Ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ；Ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ；Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
Ｄｅｖｉ等２４】采用反相高效
目前国内外文献中关于左氧氟沙星有关物质的 研究报道多以检测方法为主，国内未见左氧氟沙星 有关物质结构研究的报道，国外有关文献报道【２４】， 以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以醋酸铵缓冲 液（１０ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ６．０）为流动相，将左氧氟沙星样品经 氧化破坏后进行ＨＰＬＣ ＭＳ／ＭＳ分析，最终推断出该 氧化降解产物的结构（见图３），由该降解产物的结构 可见，左氧氟沙星的氧化降解产物为欧洲药典、英
表ｌ
Ｔｍｂ．１
均采用离子对试剂与有机相的混合溶液作为流动 相，检测波长为２９３ｎｍ，另有个别标准采用了２３０ｎｍ 的检测波长。国内外文献报道的左氧氟沙星的有关
物质研究中，亦多采用反相高效液相法掘，，】，另有文
献报道采用ＴＬＣ法也能够检测到部分杂质［２５１，可以 作为ＨＰＬＣ法的有效补充。 由于左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋异构体，且 二者合成工艺相近，在进行左氧氟沙星的有关物质 研究时，可以考虑参考氧氟沙星的有关物质检测方 法。氧氟沙星的质量标准分别收载于中国药典、美 国药典、欧洲药典、英国药典、日本药典【４７巧ｔ】，其 中欧洲药典和英国药典收载了氧氟沙星杂质Ａ、Ｂ、 Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ共６个已知杂质，见图ｌ。欧洲药典以及
△
（１）２，３，４，５一四氟苯甲酸
Ｋ２Ｃ０３
ＤＭＦ
（２）２，３，４，５－四氟苯甲酰乙酸乙酯
Ｈ
Ｈ
ＤＭＳｏ
Ｈ３ｃ一”／－－ｘ
（４）
（５）
左氧氟沙星
图２左氧氟沙星合成路线
Ｆｉｇ．２ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｒｏｕｔｅ ｏｆ ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ
为左旋与右旋的混旋体，而左氧氟沙星由于采用了 手性合成的手段，后３步反应的中间体以及终产物均 为左旋异构体。目前国内外较多文献报道了氧氟沙 星的己知杂质，而关于左氧氟沙星已知杂质的研究 报道较少，但通过氧氟沙星的已知杂质以及合成路 线可以推断，左氧氟沙星很可能含有同氧氟沙星结 构式相同而立体构型不同的工艺杂质，其立体构型 均应为左旋异构体，这对左氧氟沙星的杂质研究具 有较高的参考价值。 １．２降解产物 根据文献报道，Ｌａｌｉｔｈａ
查，在国际上已早为“人用药品注册技术规范协调 会（ＩＣＨ）”所关注【：】，国内在新药的有关文件中也提 出了供参阅的一些具体要求【－１，并逐渐引起研制新药 者的重视。由于一个新药从合成原料药到制备有关 的制剂，再经贮藏、运输、使用，要经历一段长期 复杂的过程，在此期间，每一过程都有可能产生有 关物质，如生产中可能带入起始原料、试剂、中间 体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可 能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。 为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际 情况，药物允许存在一些有关物质，但是必须严格 控制它们的限量。 从１９６２年第１个喹诺酮类抗菌剂萘啶酸（ｎａｌｉｄｉｘｉｃ
有关物质指药物中所含规定成分之外的任何其 它物质。有关物质可能无效、危害人体健康或影响 药物的稳定性。有关物质的研究是药品研发的一项 重要内容，它包括选择合适的分析方法，准确地分 辨与测定杂质的含量并综合药学、毒理及临床研究 的结果确定杂质的合理限度。这一研究贯穿于药品 研发的整个过程。由于药品的临床使用中产生的不 良反应除了与药品本身的药理活性有关外，有时与 药品中存在的杂质也有很大关系。例如，青霉素等 抗生素中的多聚物等高分子杂质是引起过敏反应的 主要原因。所以规范地进行杂质的研究，并将其控 制在一个安全、合理的限度范围之内，将直接关系 到上市药品的质量及安全性【－】。关于有关物质的检
收稿日期：２０１０－０１．１ｌ
基金项目：国家科技重大专项课题一重大新药创制（２００９ＺＸ０９３ １ ３－０２３）
作者简介；王维剑，男，生于１９７９年，硕士研究生，研究方向为抗生素药物分析。Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｉｃｈａｅｌｌ９７９０６２３＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
万方数据
左氧氟沙星的有关物质研究进展王维剑等
旋混合物，左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋异构体， 在其合成过程中必然会产生光学异构体副产物。氧 氟沙星的右旋异构体几乎无抑菌作用，且毒性大于 左旋异构体，因此多数左氧氟沙星质量标准中均对 光学杂质进行了严格控制，有关左氧氟沙星光学杂 质检测的文献报道也较多【，。．３５】，基本上均采用ＨＰＬＣ 法，使用硫酸铜．Ｌ．异亮氨酸溶液等手性试剂与有机 相的混合溶液为流动相，十八烷基硅烷键合硅胶为 固定相，光学杂质的含量基本控制在１．０％以内。 ２左氧氟沙星有关物质的结构鉴定