四、操作步骤
（一）紫外线对微生物的影响
将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作 制成平板，用无菌移液管吸取0.1 mL大肠菌 液涂布于平板上（用无菌三角玻棒）。
在无菌室中，将无菌圆形牛皮纸片放置 于平板，在距离紫外灯的30 cm处照射20 min， 去牛皮纸加皿盖（如图）。于37 ℃温
箱中倒置培养24 h后记录结果。
• 氧对微生物的影响
（二）思考题
1. 含化学消毒剂的滤纸片周围形成的抑 （杀）菌圈表明该区域培养基中的原有细 菌被杀死或被抑制而不能进行生长，你如 何用实验证明抑（杀）菌圈的形成是由于 化学消毒剂的抑菌作用还是杀菌作用？
2. 某公司推出一种新型饮料，被声称是 100%纯天然产品，不含防腐剂，利用你所 掌握的微生物学知识，试设计一个简单实 验来初步判断此饮料是否含防腐剂。
4. 加药剂：用无菌镊子将浸过药液滤 纸片分别平铺于含菌平板上，注意纸片放 好后不要移动，并在平皿背面做好标记。
5. 培养：将平皿置于37 ℃下培养24 h 观察结果。
化学药剂对微生物的影响试验示意图
五、实验报告
（一）实验结果 1. 将紫外线对微生物的影响试验结果绘 图表示。 2. 氧对微生物的影响的测定结果记录 于表中。 3. 比较化学药剂对微生物的影响试验 结果透明圈的大小。
六. 注意事项
1. 制备平板培养基厚度要均匀，指示 菌涂布要均匀，使细菌分散、均匀；
2. 纸片形状、大小要一致，不能在培 养基表面拖动；
3. 药剂标记要准确，避免混乱。
1. 制平板：取无菌平皿，将已 溶化并冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白 胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿 中， 使之冷凝成平板。
2. 制备菌悬液：取无菌水，用 接种环取菌种1～2环接入无菌水中，充 分摇的菌 悬液0.1 ml接种于平板上，用无菌玻璃刮铲 涂匀。
理化因素对微 生物的影响
一.实验目的
掌握物理、化学因素抑制或杀死微生 物的作用及其试验方法。
二、实验原理
采用强烈的理化因素使任何物体内外 所有的微生物永远丧失其生长繁殖能力的 措施称为灭菌。用较温和的物理或化学方 法杀死物体上绝大多数微生物的方法称为 消毒。
微生物广泛存在于周围环境中，消毒 灭菌主要是通过理化因素使微生物的主要 代谢发生障碍，或菌体蛋白质变性凝固， 或破坏其遗传物质，导致微生物死亡。
（二）氧对微生物的影响
1. 取4支牛肉膏蛋白胨培养基试管于水 浴中加热融化。
2. 待培养基冷至45℃左右，按无菌操作
分别接种大肠杆菌、枯草杆菌、丙酮丁醇 梭菌各一环，对照管不接种，搓动混匀。
3. 将试管直立于28℃培养， 48 h后开始
连续观察几天，直至结果清晰，记录结果。
（三）化学药剂对微生物的影响
三、主要器材
1. 活材料：培养24 h的大肠杆菌或葡萄球 菌、沙门氏菌及枯草杆菌、丙酮丁醇梭菌斜面菌 种。
2. 培养基和试剂：牛肉膏蛋白胨琼脂培养 基、无菌水、药敏片（1g/L HgCl2，0.2mg/L链 霉素， 0.2mg/L青霉素，50g/L石炭酸，或其它 种类消毒剂、抗生素）。
3. 器材：无菌培养皿、无菌三角玻棒、无 菌圆形黑纸片、无菌吸管、镊子、恒温培养箱、 玻璃刮铲、高压灭菌器。