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抗生素类药物的质量分析方法
离子交换色谱法（IEC）
l 采用高效阴离子交换色谱分离硫酸庆大霉素、 硫酸新霉素和硫酸奈替米星及其杂质，然后采 用积分脉冲安培检测进行直接测定，不需衍生， 简便快速。
l 缺点：检测器的灵敏度对药物中的微量杂质仍 显不足，体系对有些组分的分离不尽理想，重 现性较差
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抗生素类药物的质量分析方法
一、色谱分析法
➢ 气相色谱法(GC) ➢ 高效液相色谱法(HPLC) ➢ 离子交换色谱法（IEC） ➢ 薄层色谱法(TLC) ➢ 高效毛细管电泳法(HPCE)
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抗生素类药物的质量分析方法
气相色谱法(GC)
氨基糖苷类抗生素为非挥发性化合物，且在紫外可见光 区无吸收，须先进行衍生化，使其适于分析。HoebusL 等用六甲基二硅烷柱前衍生测定大观霉素，用填充柱气 相色谱法，氢火焰离子化检测器检测，在75％一125％的 浓度范围内，呈良好的线性，杂质的定量限为0.1％。 PreuL等选择适当的衍生化试剂，采用毛细管气相色谱。 气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析氨基糖苷类抗生素 也是应用比较广泛的一种联用技术。
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抗生素类药物的质量分析方法
薄层色谱法(TLC)
l TLC作为一种定性的方法鉴别氨基糖苷类抗生素 已被各国药典广泛采用。扫描密度计与TLC技术 相结合产生的高效薄层色谱法(HPTLC)因其灵敏 度、分离度和准确度都有很大提高，已用于药 物定量分析。 TLC具有使用范围广，样品预处 理简单，优化展开剂的组成方便等优点，随着 吸附剂高效化，定量分析仪器化、自动化，TLC 仍然是不可替代的一种分析方法。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
抗生素类药物的质量分析方法
高效液相色谱法(HPLC)
HPLC测定此类药物含量大多采用反相色谱或离子对色谱 系统，根据检测手段的不同可分为紫外检测、荧光检测、 电化学检测及质谱检测等。柱前衍生反相HPLC是此类药 物最为常用的一种测定方法。中国药典采用邻苯二甲醛 (0PA)柱前衍生化，紫外检测硫酸庆大霉素C组份。同时， 有报道用柱后衍生，荧光检测食品中的链霉素残留量。 为了避免使用衍生化试剂，可以采用灵敏度较高的电化 学检测器及采用LC-MS联用技术。LC-MS将HPLC的高分离 效能和质谱的高选择性、高灵敏度及丰富的结构信息相 结合，已成为重要的分离分析方法之一。
l 来源：仪器分析网
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抗生素类药物的质量分析方法
HPLC—蒸发光散射检测法(HPLC— ELSD)
l 近年来出现的蒸发光散射检测器(ELSD)由于其响应值不 依赖被测物质的光学性质，任何挥发性低于流动相的样 品均能被检测，并且物理性质相似的物质其响应因子基 本一致，灵敏度是示差折光检测器的2-10倍，现已逐渐 成为目前常用的通用型检测器。在用HPLC-ELSD法测定 硫酸小诺霉素(C2b)注射液时发现有些样品含有庆大霉素 C1a杂质；在分析庆大霉素C组分时发现有的样品在C2与 C2a峰之间有小诺霉素(C2b)杂质峰。由此看出，蒸发光 散射检测器的应用已为全面分析无紫外吸收的氨基糖苷 类抗生素的质量提供了一种新的手段。但本法也有一些 不足之处，例如灵敏度比紫外检测的低(2—3个数量 级)．数据处理相对繁琐。
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抗生素类药物的质量分析方法
高效毛细管电泳法(HPCE)
HPCE是一类以毛细管为分离通道，以高压直流 电场为驱动力的新型液相色谱分离技术。根据 分离模式的不同，又可分为毛细管区带电泳 (CZE)、毛细管等电聚焦(CIEF)、毛细管凝胶电 泳(CEC)，胶束电动毛细管色谱(MEKC)等。氨基 糖苷类抗生素的HPCE检测方法，最为常用的是 柱前及柱内衍生的CZE技术，然后进行紫外检测。
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抗生素类药物的质量分析方法
结构——庆大霉素
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抗生素类药物的质量分析方法
结构——链霉素
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抗生素类药物的质量分析方法
一、药典方法
中国药典(2000年版)，美国药典(25版)、英国药典 (2000年版)对氨基糖苷类抗生素的含量测定大多采用微 生物法，有关物质的检查大多采用薄层色谱法或反相高 效液相色谱法。微生物法作为一种经典的方法，仍被各 国药典所采用。本法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩 散作用，采用量反应平行线原理设计，比较标准品与供 试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供 试品效价。微生物法所需设备简单，价格低廉，但影响 因素复杂，操作费时 。以下介绍本组同学查阅的其他 方法：
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抗生素类药物的质量分析方法
二、免疫法(IA)
l IA是近年发展起来的一种用于体内药物监测的 分析方法，将分析方法与免疫原理相结合，进 行超微量分析，具有灵敏度高、特异性强、用 样少等优点。
l 根据对抗原标记方法不同，IA可分为放射免疫 法 (RIA) ， 酶 免 疫 法 (EIA) ， 荧 光 免 疫 法 (FIA) ， 化学发光免疫法(CLIA)，毛细管电泳免疫分析 法（CEIA)和浊度免疫分析法。
抗生素类药物的质量分 析方法
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2020/11/20
抗生素类药物的质量分析方法
概况
l 抗生素是指在低浓度下即能杀灭或抑制其他病 原微生物的药物，按其结构可以分为β-内酰胺 类、四环素类、氨基糖苷类及其他抗生素。氨 基糖苷类抗生素是由氨基环醇与氨基糖缩合而 成的一类多羟基抗生素，是临床上常用的一类 广谱抗生素。可通过微生物发酵或半合成而制 得。目前药典收载的品种主要有：链霉素、卡 那霉素、阿米卡星、妥布霉素、奈替米星、依 替米星、庆大霉素、新霉素等
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抗生素类药物的质量分析方法
三、流动注射法(FIA)
流动注射法(FIA)是一种自动分析法，适用于医院制剂的 快速检验及中间体质量控制。 用恒流量泵使硫酸铁铵试剂和载液(水)流过内径为0.5l mm的四氟乙烯泵管，与进样口注量的一定浓度硫酸链霉 素水溶液在反应圈中混合，反应呈包，于520nm处用721 分光光计测A，通过对数转换器，在记录仪上获得相应 的峰高。 硫酸链霉素呈色原理：硫酸链霉素在NaOH中水解成麦芽 酚，与Fe3+呈色，在520nm处有最大吸收峰。