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浅析铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化
于铁皮石斛原球茎的增殖。
关键词 : 铁皮 ;石斛原球 茎增殖配方;优化 中图分类号 :5 6 7 . 2 文献标识码 :A
铁皮 石斛 ( H e r b a D e n d r o d i i O f i c i n a l i s ),兰科 多年生 附 生草本 植物 。生于海拔 达 1 6 0 0 m的 山地 半阴湿 的岩石 上 ,喜 温 暖湿润气候 和半 阴半 阳的环境 ,不耐寒 。一 般均能 耐 一 5 ℃ 的低 温。石斛可分 为黄草 、金钗 、马鞭等数 1 0种 ,铁 皮石斛 为石斛之极 品,由于其具有药用价值和保健 功能。是历代宫廷 贡 品,其价值就是药用植物界的 “ 大熊猫” , 名列 中华九大仙 草之首野生 “ 铁皮”石斛是 国家重点二 级保护 的珍稀濒危植物 , 它 因表皮呈铁绿 色而得名 _ I J 。铁皮石斛具有独特 的药用价值 , 以其茎入药 ,中药名 :石斛 ,属补益药 中的补 阴药 】 。 自古以来 ,人们用药都是依靠上 山采挖收集野生植株 ,而 野生石斛 的繁殖率又极低 ,人们如此只采挖野生的石斛却 不人 工种植 ,导致石斛 中的上 品—_ _ - 铁皮石斛逐渐枯竭并引发其价 格 一涨再涨 !目前 ,国际市场 l k g 铁 皮石斛 干品高达 1 0 0 0— 3 0 0 0 美元 ,鲜 品收购 价 l k g 仍在 2 0 0 0 元 以上。铁皮石斛 的逐 渐枯竭 , 再加上 开发 生产其药用 、保健 、美容产 品开发商家的 逐 年增 加 ,导致铁皮石斛 的成 品几乎 已无处收购 、有价无货 , 人 工种植 迫在眉睫。随着科技 的发展 和社会 的进步 ,人们也认 识 到这个严 峻的问题 ,也有人员专 门从事人工种植铁皮石斛 , 但 是碍于石斛的生长周期 长 ,生长环境要求高 ,人工种植产业 发展前景不是很 乐观。同时 ,许 多国内外学者也利用铁皮石斛 种子和茎尖来进行组织培养的研究 , 成果可观 , 但还是存在试 管苗污染严重 、增殖系数低 、试管苗茎 细弱、移栽成 活率不高 等诸多原因 ,影响了铁皮石斛试 管苗快 繁和大规模 的工厂化种 植 。在石斛组织培养过程 中,石斛原球 茎增殖 又十分关键 。通 过诱导石斛产生大量原球茎 ,将所 得的原球茎切分进行分化形 成大量丛生芽 ,再将丛生芽分苗 ,培养 成小 苗 , 小苗生长成一 定高度 的植株就可 以炼苗种植 ,而达到快速繁殖 的 目的。用铁 皮石斛茎段诱导 出的原球茎通过在不 同的基本培养基 、碳 源 、 激 素水平 、添加物 及培 养方式 进行增殖 培养 ,观察其 生长情 况 。光照 时间 、强度 恒定 ,上午 8 : 0 0~ 1 1 : 3 0 ,下 午 1 4 : 3 0 1 7 : 3 0 ,光 照强 度 1 0 0 0~ 1 6 0 0 l x ,温 度 ( 2 5 ±1 )℃。 以找 出 最适合铁皮石斛原球茎增殖 的培养基以及培养方 式 ,为人工种 植铁皮石斛提供技术支持和种源 口 1 。
基 ,每种 培养基接种 1 3瓶 ,每瓶 接种 5—6A A 0 . 5 mg / L ,6 - B A分 别为 0 、
0 . 5 mg / L 、1 . 0 m g / L 、1 . 5 m g / L 、2 . 0 mg / L 、2 . 5 mg / L 、3 . 0 m g / L的 情
况下培养 ,4 5 d 后观察 。 1 . 2 - 3 不 同浓度的 N A A筛选 ’ 选取切割 的原球茎 团块接种在 M S 、1 / 2 M S为基本培养基 , 每种 培养基接种 1 3瓶 ,每瓶 接种 5 6个原球茎 团 ,附加 蔗 糖Z S g / L,活性炭 l g / L ,B A 0 . 5 m g / L ,N A A分别取 0 、0 . 5 mg / L 、 1 . 0 m g / L ,1 . 5 m e t e 、2 . 0 m e t E 、2 . 5 m  ̄ C L 、3 . 0 mg / L的情况下培养 。 1 . 2 . 4 不 同天然添加物质的筛选 选取切割的原 球茎 团块接种在 MS 、1 / 2 MS 为基本培养基 , 每种 培 养基 接 种 1 3瓶 ,每瓶 接 种 5~6个 原 球茎 团 ,附 加 2 8 g / L 蔗糖 ,活性炭 l g / L 。香蕉提 取液、马铃薯 提取液 和铃 薯 汁均为 2 0 0 g / L 。4 5 d后观察。 1 - 5培养基 选取切割的原球茎团块接种在 MS 、1 / 2 MS为基本培养基 , 每种培养 基接种 1 3瓶 ,每瓶接种 4 —5 个原 球茎 团 ,有光照 和无光照做比较。 2结果与分析 2 . 1 培 养基对原球茎增值的影响 培养基作为原球茎的直接营养来源 ,培养基成分和浓度 的 大小直接影响到原球茎的增值、增长情况 , 最适宜 的培养基浓 度可随外植体的形态和发育阶段的不同而不同。由表 1可知 , 铁皮石斛原球茎在 1 / 2 MS 培养基 中增殖效果较在 MS 培养基 中 好 ,起在 1 / 2 MS培养基上长势好 ,苗较绿 、较状 。 表1 1 / 2 MS和 MS培养基原球茎长势比较
农 业与技 术
第3 3 卷
第 4期
2 0 1 3年 4月
浅析铁 皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化
谢 纯
( 云南热带作物职业 学院热带作物生产与技 术系,云南 普 洱 6 6 5 0 0 0 )
摘 要: 铁 皮石 斛为兰科 多年 生附生草本植物 , 但是由于人 类的大规模采集 , 在其需求量急剧 增长的情 况下, 人工的培育 变得尤为重要 , 通过研 究铁 皮石斛的原球 茎增殖的培养基 配方 ,发现 1 / 2 MS + 2 8 g 葡糖糖 + l g 活性炭 + 7 g 琼脂 + 1 . 5 m g / L 6 - B A + 0 . 5 m g / L N A A 最适合