当前位置:文档之家› 葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度

葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度


甲状腺功能亢进、内服
或注射大量葡萄糖等。
尿糖
增高率 =
A肾 - A正 A正
× 100%
尿糖测定
1.葡萄糖氧化酶试纸法(干化学法):特异 性强,临床常用。检测原理是葡萄糖氧化酶 法。
2.班氏定性试验:价廉,操作简单,比较常 用,但易受尿中还原性物质干扰。
班氏定性试验原理

CHO
COOH
(CHOH)n + 2Cu2+ + 4OH-
CH2OH
葡萄糖
37oC 氧化缩合
H2O + 醌亚胺 红色
+O2
比色测定 505nm
具体操作
(1)空腹称重(已称好)
(2)耳缘静脉取血
①取血部位去毛,接着擦拭酒精,涂二甲苯、 凡士林。
②用三棱针刺破耳缘静脉放血,离心管收集血 液2-3ml(干棉球压迫止血),离心,1500rpm ,10min,取出放试管架上备用。
碱性 煮沸
(CHOH)n
+
CH2OH
葡萄糖酸
2CuOH 黄色
+ H2O
2CuOH
分解
H2O + Cu2O
红色
根据沉淀显色的深浅,对尿糖作半定量检 测。
操作步骤
班氏A剂尿220滴
班B尿氏2剂滴20滴再煮煮沸沸5m5minin
待完全沉淀到管 底后(10min) ,对比判断标准 判定结果。
尿糖结果判断标准
检测
尿糖 病病1用.理理临药性性床以医及胰胰糖 颅生判岛 高尿 内:断β血病 压细作升糖、 增胞为糖素内 高增疾药分分 、生病或泌泌 严、诊降不腺 重胰断糖足功脱岛依药、能水β据的严障细、疗重碍胞指效肝、瘤导病、 2.糖尿病患患者者:监控自身血糖及尿糖变
化,调节饮食、运动、就医等生活规律
血糖测定方法
(3)注射肾上腺素
腹侧皮下注射肾上腺素(0.4mL/kg体重),记录 在注射时间,操作如图:
正确抓兔 错误抓兔
耳缘静脉
皮下注射
1.注射时,把兔子皮肤 提起来,在褶皱处,竖 着进针1.5-2cm。 2.注射完后等一会再把 针头拔出。轻按注射部 位。30 min后再采血。
Байду номын сангаас
(4)注射后取血: 2-3ml,离心,取出备用。
实验课安排
一、注射前取血 二、注射肾上腺素 三、30min(尿糖检测) 四、注射后取血 五、血糖检测
实验内容:
①测定血糖浓度,观察肾上腺素对血糖浓 度的影响 ②半定量测量尿糖
实验要求:
①掌握葡萄糖氧化酶测定血糖的方法、原 理、测定操作、正常参考值、临床意义 ②熟悉尿糖测定及意义
血糖的来源和去路
食物
化学感降受糖器激素
肾上腺素
血三糖)调还节有相一关些神器经官系:统肝:、下肌丘肉脑以+及自肾主脏神等经
肾上腺素
肾上腺素是肾上腺髓质分泌的一种儿茶酚 胺类激素,主要在应激状态下发挥升高血 糖的作用。 机制 受刺激 促进 血中的肾上腺素 结合
cAMP 肝、肌细胞的膜受体
级联激活
磷酸化酶
肝糖原 分解 葡萄糖
肌糖原 糖酵解 乳酸
乳酸循环
糖代谢紊乱 单位:mmol/L
临>床6上.9重要的糖代3谢.8紊9-乱6.1也1主要是血糖<浓3度.0过 高血高糖(高病生血理理糖性性症)正和常过血低糖(低病 生血理 理糖性性症)低。血糖
>肾糖阈生生理理性性 8.96-10.08
餐后、情绪紧张时,肾上腺素 长分期泌饥增饿加、、剧注烈射运葡动萄后糖
(5)取4支试管,按下表加入试剂:
(ml)
(6)混匀后,37OC水浴15min;取出冷却, 空白管调零,505nm处比色测定。
血糖检测结果记录
计算
1.注:射前、后的血糖浓度 (mmol/L)
C测 =
A测 A标
× C标
家兔血糖正常参考值(5.34-6.62 mmol/L)
2. 注射后血糖浓度增高率
H2O+CO2+ATP
分解 糖原
血糖
糖原
其它糖、
非糖血提况物糖供的质指能重血量要液的生注血中主理射糖所要指葡含 物 标的萄的 质 。调糖葡 ,节萄 也糖 是尿, 体糖它内是糖给代机谢非体情糖物质
血一二糖 高))过神体经液胰系调岛统节素调,血节 也糖: 叫平下 激衡丘 素脑 调胰 糖节+高 皮自,血 质主有糖激神升素素经糖血激糖素不和足
尿糖检测结果记录
【注意事项】
1.微量加样枪的使用 2.先加0.02ml,完全冲到 管底。 3.0.02ml加样要精确
下一次实验 牛血清白蛋白的分离、纯化及鉴定
尿糖:指尿中的葡萄糖。
血液
肾糖阈:尿中开始出现
葡萄糖时最低血糖浓度
(8.96-10.08mmol/L)
原尿
葡萄糖
重 吸

。 尿糖阳性见于: 高糖饮食、精神激动、 糖尿病、肾性糖尿病、
➢葡萄糖氧化酶法
广泛使用,特异性强、价廉、操作简单
➢福林-吴宪法 ➢邻甲苯胺法 ➢己糖激酶法 ➢超微量还原铁氰化钾法
葡萄糖氧化酶法原理
第一步 葡萄糖氧化酶(GOD)
: 葡萄糖+O2+H2O
37oC 氧化
葡萄糖酸+H2O2
第二步:Trinder反应 辣根过氧化物酶(POD)
H2O2 +苯酚+4-氨基安 替比林
相关主题