高效液相色谱仪维护保养操作规程
目的:建立高效液相色谱仪维护保养规程。

范围：高效液相色谱仪的维护保养。

责任：质量部、后勤保障部负责人。

内容：
1.泵的维护
1.1流动相的更换
1.1.1将新流动相置于储液瓶中。

1.1.2打开放空阀，启动泵使新的流动相从放空阀出口流出20ml.左右。

1.1.3关闭放空阀，然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开，用小容器放置于进样阀的出口处。

1.1.4启动恒流泵，让流动相从进样阀出口流出10ml左右。

1.1.5重新连接色谱柱，设定适当流速，当流动相流出约30倍于色谱柱体积，而且检测器基线平恒后，流动相更换完毕。

1.2换非互溶性流动相（如甲醇系统更换为正己烷系统）
1.2.1准备50ml能与新旧流动相互溶的中介溶剂（如异丙醇）。

1.2.2用中介溶剂更换泵中的旧流动相，步骤同‘更换互溶流
动相’中的1－5过程（不要接色谱柱）。

1.2.3如果色谱柱中流动相也需要更换，用该溶剂冲洗色谱性。

1.2.4准备新流动相并置于储液瓶中。

1.2.5用新流动相更换中介溶剂步骤同‘更换互溶流动相’中的1－5过流动相更换完毕。

1.3换缓冲液流动相（如磷酸盐缓冲液更换为甲醇系统）
1.3.1取超纯水或去离子水500ml。

1.3.2用水更换色谱系统中缓冲液（不包括色谱柱），具体步骤与‘更换互
溶流动相’中的1－5过程相同。

1.3.3用水含量10%－60%范围的溶剂冲洗色谱柱中的盐。

1.3.4用新流动相更换水或冲洗色谱柱溶剂，具体步骤与‘更换互溶流动相’中的1－5过程相同。

1.3.5【注意】由于一般缓冲液遇到甲醇、异丙醇等高含量有机溶剂混合液时容易将缓冲液中盐结晶出来，而结晶盐对密封圈、柱塞杆以及进样阀内部转子和定子都有很大的损坏，也容易阻塞输液管路，因此要特别仔细操作。

1.3.6用缓冲液作流动相或一段时间不使用泵，在关机前，首选用含量较高的超纯水或去离子水混合溶剂冲洗色谱柱和系统中的盐，然后用纯甲醇或乙腈冲洗。

2.恒流泵中气泡的排除
在初次使用、长时间没有使用、流动相脱气效果不好等情况下系统内会出现气体，导致压力不稳、流速不稳甚至不能输液等问题。

一般按如下顺序排除系统内气泡：
2.1打开放空阀，按仪器前面板的“冲洗”功能键，用大流量冲洗系统直到流出的液体连续，证明气泡已经排除；
2.2如果用“冲洗”状态仍不能吸液，能够用吸耳球或注射器在排液口抽吸，直至液体流出；
2.3如果依然无液体流出，可能是球阀座粘连，取出单向阀（取出方法见零件更换部分），向单向阀两端分别吹气，一通一堵为正常，两端均堵说明阀球阀座粘连，需清洗阀球阀座（见‘单向阀的拆装与清洗’）。

3.在线溶剂过滤器的清洗
为了防止由于流动项杂质微粒进入色谱系统，P203高压恒流泵在放空阀内安装了在线过滤器，经泵出口流出的液体经过在线过滤器，经排空管流出的溶液不经过在线过滤器。

仪器使用一定时间后，建议用户清洗在线过滤器的烧结不锈钢过滤片。

用扳手卸下压帽，将密封环和烧结不锈钢过滤片一同取出清洗，清洗后按原位装上。

清洗具体过程如下：
3.1取下过滤片放在（1：4，V/V）硝酸溶液的烧杯中超声清洗15
分钟。

3.2取出后用蒸馏水超声清洗10分钟。

3.3用吸球吹出过滤头中的液体。

3.4再用蒸馏水超声清洗10分钟（正相系统注意将过过滤片烘干）。

4.溶剂过滤头的清洗
由于溶剂不干净，杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙；或长时间使用缓冲液，过滤头表面容易产生一层膜，阻碍流动相正常经过。

严重时，即使是已超声过的溶剂，泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生，因此应经常对过滤头进行清洗。

具体方法是：
4.1取下过滤头放在（1：4，V/V）硝酸溶液烧杯中超声清洗15分钟。

4.2取出后用蒸馏水超声清洗10分钟。

4.3用吸球吹出过滤头中的液体。

4.4再用蒸馏水超声清洗10分钟。

4.5用吸球吹净过滤头中的水份。

4.6将过滤头重新插入溶剂瓶中（正相系统注意将过滤头烘干）。

5.柱塞杆后部的清洗
5.1当使用含盐的流动相时，由于脱水或蒸发，有可能在宝石柱塞杆密封圈的后面形成晶体。

泵运动时这些盐晶体会损坏密封。