2.5.2
抑制硝化作用 水中有机物的生物氧化过程可分为两 个阶段，第一阶段主要是碳氢化合物被氧化， 称为碳化阶段，在20℃下约需20d才能完成， BOD测定的一般是该阶段的耗氧量。第二 阶段是含氮化合物及部分氨氧化为亚硝酸盐 及硝酸盐，称为硝化阶段，在20℃约需 100d 。对一般水样，测定BOD5时的硝化作 用并不显著。但对于生化处理的出水，因其 含有大量的硝化细菌，在测定BOD5时也包 括了部分含氮化合物的需氧量，因此需要加 入硝化抑制剂，抑制硝化作用对BOD5测定 的影响。可在每升稀释水样中加入2ml浓度 为500mg /L的丙烯基硫脲。
由高锰酸盐指数与一定的系数的乘积 求得的稀释倍数
高锰酸盐指数（mg/L）
＜5 5-10
系数
0.2 0.3
高锰酸盐指数（mg/L）
10-20 ＞20
系数
0.4、0.6 0.5、0.7、1.0
对地表水稀释倍数的确定，也同样如此。比如， 高锰酸盐指数的浓度为5-10mg/L之间时，我们可 以在系数0.2-0.3之间，再增加0.22，0.25，0.28等 几个系数。
2. 稀释接种法测定BOD5时需注意的问题
2.1 样品的采集及保存 采集样品时应充满并密封于瓶中，在0-4℃ 条件下进行保存，一般应在6h内进行分析。 若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时 间不应超过24h。 2.2 时间的影响 样品中的BOD5浓度易随时间的变化而变化， 样品储存时间、测定过程时间和培养时间均 会对测定结果产生影响。这就要求我们在进 行BOD5的测定时需要严格控制培养时间和 样品储存时间。
上清液的接种量，按水样的性质确定。 啤酒厂： 接种量一般以7-8ml/L水为宜。 印染废水：上清液2ml/L,再加入7ml/L驯化接种液。 葡萄糖谷氨酸标准溶液：接种量一般以2-3ml/L水 为宜。
当废水中存在着难于被一般生活污水中 的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧 毒物质时，在其排污口的下游3-8km处取水 样做为废水的驯化接种液，同时加入适量表 层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微 生物大量繁殖。 当水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、 氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接 种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以 减少毒物的浓度。
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溶解氧消耗量小于 2mg/L，有两种可能， 一是稀释倍数过大；另一种可能是微生物菌 种不适应，活性差，或含毒物质浓度过大。 对工业废水稀释倍数的确定，书上列出 了三个系数：0.075，0.15，0.225。根据本 站以往的经验，在选择系数的时候，可以在 0.075-0.15 之间， 0.15-0.225 之间多选择几 个系数。比如某水样CODcr浓度为100mg/L, 我们可 以选择 系数为 0.11 ， 0.13 ， 0.14 ， 0.15。
3． 样品分析过程中应注意的细节： 3.1 固定溶解氧的时候，应将吸管插入溶解氧瓶的 液面下。 3.2 加入硫酸后混合摇匀，一定要确保沉淀物全部 溶解。 3.3 在稀释水样时，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀 释水（或接种稀释水）于 1000ml 量筒中，加入需 要量的均匀水样，再加入稀释水（或接种稀释水） 至定量 , 用带胶板的玻棒小心上下混匀，混匀时勿 使搅拌棒的胶板露出水面，防止产生气泡。
2.3. 温度的影响 温度与微生物的增长速率相关，直接影响 微生物的生长繁殖，进而影响BOD5的测定 结果。另外，温度的变化还会引起溶解氧的 变化。因此，应严格控制采样温度、样品储 存温度、实验室温度及培养箱温度。
2.4
pH值的影响 水样的pH若超出6.5-7.5范围时，应加酸或 碱调节至此范围；稀释水和接种稀释水的 pH值应为7.2。
2.5. 2.5.1
生物因素的影响 接种液的质量 对于一般的地表水、生活污水或者不含 或少含微生物的工业废水的测定，在测定时 应进行接种，以引入能分解废水中有机物的 微生物。接种液一般采用城市污水或表层土 壤浸出液。 城市污水，一般采用生活污水，在室温 下放置一昼夜，取上清液供用。 表层土壤浸出液，取100g花园土壤，加 入1L水，混合并静置10min，取上清液供用。
五日生化需氧量的测定 稀释接种法
1.方法原理： 生化需氧量是指在规定条件下，微生 物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有 机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
对某些地表水及大多数工业废水，因 含较多的有机物，需要稀释后再培养测定， 以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。为了 保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通 常要通入空气或氧气进行曝气，使稀释水中 溶解氧接近饱和。稀释水中还应加入一定量 的无机营养盐和缓冲物质 , 以保证微生物生 长的需要。
4. 验证试验
为了检查接种稀释水，接种水和分析人 员的技术，需进行验证试验。将每升含葡萄 糖和谷氨酸各150mg的标准溶液以1：50稀 释比稀释后（用接种稀释水），与水样同步 测定BOD5，测得值应在180-230 mg/L之间。
5.CODcr和BOD5的关系
测定CODcr采用的是强氧化剂，水中有 机物可被氧化到 85%-95% ，所以，同一种 水质的 CODcr 浓度一般应高于 BOD5 ，其间 的差值能够粗略地表示不能为微生物所降解 的有机物，一般来说，CODcr＞BOD5。
2.6 稀释倍数的确定
确定合理的稀释倍数是成功测定 BOD5 的关键之一，稀释的倍数一般以五日培养后 消耗的溶解氧占原有溶解氧的 40%-70% 为 宜，也就是恰当的稀释比应使培养后的剩余 溶解氧≥1mg/L，消耗的溶解氧大于≥2mg/L。 先测定水样的 CODcr 值，然后根据水样的 CODcr浓度选用合适的稀释倍数，一般一个 样品应做 3-4 个不同的稀释比，如果经 5d培 养后，测其溶解氧时，当向水样中加 1mlMnSO4 及 2ml 碱性碘化钾溶液后，瓶内 出现白色絮状沉淀，说明此培养液剩余溶解 氧为零，应加大稀释比。