目录目录 (1)摘要 (2)Abstract (3)第一章绪论 (4)1.1 苯酚降解菌的定义及分类 (4)1.2苯酚降解菌的性质及其用途 (4)1.3苯酚降解的研究现状 (5)1.4苯酚降解菌生产菌的筛选 (6)1.5本课题的研究思路及意义 (6)第二章材料与方法 (7)2.1试验材料 (7)2.2试验方法 (8)2.2.2苯酚降解菌的驯化 (8)2.2.3菌种在不同条件下的降解能力 (9)2.2.4最优菌种的鉴定 (9)3.1苯酚降解菌筛选结果及性状初步研究 (11)3.11筛选结果 (11)3.1.1.1初步筛选的结果 (11)3.1.1.2 菌种驯化中的结果 (11)3.1.2 H-1菌株的性状初步结果 (13)3.2 H-1菌株分类鉴定结果 (13)第四章结论 (14)4.1菌种的筛选结果 (14)4.2菌种的鉴定 (14)参考文献 (15)致谢.......................................................................................... 错误!未定义书签。
一株苯酚降解菌的分离和鉴定摘要为了寻找能高效降解苯酚的微生物, 从土壤中筛选得到了一株苯酚降解菌,通过逐渐增加苯酚的浓度,然后驯化出一株高效降解苯酚的细菌H-1. 当在30 ℃培养48h 时其降解率高达92.11%. 经理化特征测定及外观鉴定,将其初步鉴定为假单胞菌属.再经过对比实验测各种因素(碳源、温度、pH、通气) 对该菌生长及降解苯酚能力的影响,得知该菌能以苯酚作为唯一碳源,最适生长温度为32 ℃,最适pH 为7.0. 该菌为好氧菌,在空气充足的条件下可提高降解能力.该菌菌落较小，菌落呈微黄色。
菌体呈直或微弯的杆装，没有菌柄也没有鞘。
不产芽孢。
对该菌做生化鉴定，可知该菌革兰氏染色为阴性，可水解苯酚，生长温度为32℃，生长pH为pH 6.5～7.5。
参照东秀珠,蔡妙英的《常见细菌系统鉴定手册》等文献方法，以形态和培养特征为主，生理生化特性及生态特性为辅，经初步鉴定为假单胞菌属，命名为H-1，具体确定到种则需要进一步的研究。
【关键词】：筛选苯酚降解鉴定Isolation and Identification of a Phenol-degradingBacteriaAbstractIn order to find efficient microbial degradation of phenol, screened from the soil has been a phenol-degrading bacteria, through a gradual increase in the concentration of phenol, and then domesticated from a phenol-degrading bacteria in H-1. When at 30 ℃48h culture, when the maximum degradation of rate was as high as 92.11%. Manager of the characteristics of measurement and the appearance of identification, be identified as Pseudomonas. After comparing the experimental test a variety of factors (carbon source, temperature, pH, ventilation) on the bacteria growth and phenol degradation ability, that the bacteria to phenol as the sole carbon source, the optimal growth temperature of 32 ℃, the optimum pH was 7.0. bacteria for aerobic bacteria in t air under the conditions of sufficient capacity to enhance the degradation.Bacteria colony small micro-colonies were yellow. Cell was under the direct or Micro bend installed, there is no there is no sheath stripe. Did not produce spores. To do biochemical identification of bacteria, bacteria known as Gram stain negative, can be hydrolyzed phenol, the growth temperature of 32 ℃, the growth of pH for the pH 6.5 ~ 7.5.Reference to "bacteria Berger Identification Manual (Eighth Edition)" and other literature methods, in order to shape and cultivate the characteristics of the main physiological and biochemical characteristics and ecological characteristics of supplement, preliminary identified as Pseudomonas, named for the H-1 specific to the species to determine the need for further research.【Key words】: Screening identify degradation phenol第一章绪论1.1 苯酚降解菌的定义及分类苯酚降解菌(Phenol-degrading bacteria)是能够降解苯酚成为其他物质的菌的总称，它广泛存在于土壤，水体中。
苯酚俗名石炭酸，分子式C6H5OH，比重1.071，熔点42～43℃，沸点182℃，燃点79℃。
无色结晶或结晶熔块，具有特殊气味（与浆糊的味道相似）。
置露空气中或日光下被氧化逐渐变成粉红色至红色，在潮湿空气中，吸湿后，由结晶变成液体。
酸性极弱（弱于H２CO３），有特臭，有毒，有强腐蚀性。
室温微溶于水，能溶于苯及碱性溶液，易溶于乙醇、乙醚、氯仿、甘油等有机溶剂中，难溶于石油醚。
常用于测定硝酸盐、亚硝酸盐及作有机合成原料等．实验室可用溴（生成白色沉淀2,4,6－三溴苯酚，十分灵敏）及FeCl3（生成［Fe(C6H5O)6]3-络离子呈紫色）检验．[11]苯酚主要用于生产酚醛树脂、己内酰胺、双酚A、己二酸、苯胺、烷基酚、水杨酸等，此外还可用作溶剂、试剂和消毒剂等，在合成纤维、合成橡胶、塑料、医药、农药、香料、染料以及涂料等方面具有广泛的应用。
苯酚的毒理低浓度酚能使蛋白变性,高浓度能使蛋白沉淀。
对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用,也可抑制中枢神经系统或损害肝、肾功。
水溶液比纯酚易经皮肤吸收,而乳剂更易吸收。
吸入的酚大部分滞留在肺内,停止接触很快排出体外。
吸收的酚大部分以原形或与硫酸、葡萄糖醛酸或其他酸结合随尿排出,一部分经氧化变为邻苯二酚和对苯二酚随尿排出,使尿呈棕黑色(酚尿)。
[11]人口服致死量报道不一,LD为2～15g,或MLD为140mg/kg,14g/kg。
国外报道酚液污染皮肤面积为25%,10分钟死亡,血酚为0.74mmol/L。
苯酚是重要的化工原料,被广泛应用于酚醛树脂、杀虫剂、染料、农药和医药的生产中. 但苯酚本身是有毒的有机化合物,具有使蛋白质变性的作用,对皮肤粘膜有腐蚀性;此外,它还可以作用于中枢神经而引起痉挛. 美国环保局和我国相继把苯酚列入有毒污染物名单.处理含酚废水的方法很多,其中生物降解法是一种经济有效且无二次污染的方法,许多学者在这方面进行了大量研究.[11]1.2苯酚降解菌的性质及其用途苯酚降解菌一般多为不动杆菌、假单胞菌、好氧产碱菌等。
有的可以以苯酚为单一碳源，有的是混合碳源。
目前,治理含酚废水的途径主要有化学试剂法(如萃取、吸附、离子交换、化学沉淀、化学氧化、反渗透、生化处理等) 和生物降解两种。
国内外许多学者在生物降解苯酚方面进行了广泛的研究,已鉴定存在苯酚降解能力的微生物有乙酸钙不动杆菌( Acinetobactercal coaceticus) 、假单胞菌( Pseudomonas sp. ) 、富养产碱菌( Alcaligenes eutrophus) 等。
苯酚降解菌可用于，降解广泛存在于化工、造纸、钢铁等工业废水中。
含酚的污水，防止由于酚污染而导致的江河湖泊中的鱼虾的死亡,含酚的污水会使庄稼死亡或减产,严重危害人类的健康。
[10]1.3苯酚降解的研究现状苯酚降解技术主要有:1、催化湿式氧化技术：催化湿式氧化技术是80年代国际上发展起来的一种治理高浓度有机废水的新技术，是在一定温度、压力下，在催化剂作用下，经空气氧化使污水中的苯酚氧化分解成CO2、H2O等无害物质，达到净化目的。
其特点是净化效率高，流程简单，占地面积少。
2、生物强化技术生物强化技术是指在生物处理体系中投加具有特定功能的微生物来改善原有处理体系的处理效果。
投加的微生物可以来源于原有的处理体系，经过驯化、富集、筛选、培养达到一定数量后投加，也可以是原来不存在的外源微生物。
实际应用中这两种方法都有采用，主要取决于原有处理体系中的微生物组成及所处的环境。
这一技术可以充分发挥微生物的潜力，改善难降解有机物生物处理效果。
Selvaratnam等通过在活性污泥中投加苯酚降解菌Psendomonas Pvotida ATCC11172，提高了苯酚的去除率，系统在40d内一直保持在95％－100％的苯酚去除率，而没有进行生物强化的对照组中苯酚去除率开始很高，但很快降到40％左右。
3、芬顿试剂技术芬顿试剂对有机分子的破坏是非常有效的，其实质是二价铁离子和过氧化氢之间的链反应催化生成·OH自由基，三价铁离子催化剂（称芬顿类试剂）也能激发这个反应，这两个反应生成的·OH自由基能有效地氧化各种有毒的和难处理的有机化合物如苯酚；或者采用紫外灯作为辐射能源放射紫外线进入废水，当过氧化氢被紫外光激活后，反应产物是一个高反应性的·OH自由基，这个·OH基团迅速引发氧化链反应，最终有机化合物被分解为CO2和H2O。