非发酵菌群的分类鉴定
产碱杆菌属
莫拉氏菌属
无色杆菌属
土壤杆菌属
黄色素
.
+
13
—
黄杆菌属
莫拉氏菌属
假单胞菌属 产碱杆菌属
无色杆菌属 土壤杆菌属
鞭毛染色
端毛菌
周毛菌
假单胞菌属
产碱杆菌属,无色杆菌属,土壤杆菌属
O型
O/F —
无色杆菌属,土壤杆菌属
还原硝酸盐后产气
+
—
产碱杆菌属
土壤杆菌属
无色杆菌属
.
14
第四节、非发酵菌群的属内鉴别
支气管败血鲍特氏菌,金氏杆菌属,无色杆菌属,
莫拉氏菌属,艾肯氏菌属,土壤杆菌属。
触酶
+
—
假单胞菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属,
金氏杆菌属,
支气管败血鲍特氏菌,无色杆菌属,
艾肯氏菌属
莫拉氏菌属,土壤杆菌属
O/F
动力
弱F
—
37℃
18—24 ℃
金氏杆菌属
艾肯氏菌属
—
+
—
+
+
—
支气管败血 假单胞菌属
黄杆菌属
鲍特氏菌
.
20
铜绿假单胞菌鉴别要点:
(1)、铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上能 产生水溶性绿色素,使整个培养基变为绿色。
(2)、在血平板上经35—37℃,18—24h培 养可表现为:菌落灰绿色、半透明、大而扁 平、表面湿润、边缘不齐;有金属光泽;有 生姜样芳香气味;菌落周围有宽大的兰绿色 透明溶血环。
.
5
因此在临床上真正能分离出来且 有临床意义的非发酵菌群有:
假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、 鲍特氏菌属(百日咳鲍特氏菌除外)、金氏杆菌属、不 动杆菌属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土 壤杆菌属。
.
6
第二节 非发酵菌群的初步识别
特性 形态染色 鞭毛及位置 氧化酶 O/F 试验
氧化酶阴性菌群
不动杆菌属,寡氧单胞菌属,付百日咳鲍特氏菌
动力
+
—
寡氧单胞菌属 (嗜麦芽寡氧单胞菌)
+ —
不动杆菌属,付百日咳鲍特氏菌 在鲍—金二氏培养基上产 棕色素 麦康凯上生长 —
+
付百日咳鲍特氏菌
不动杆菌属
.
12
(二)、氧化酶阳性菌群的 属间鉴别
氧化酶阳性菌群
假单胞菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属,
肠杆菌科 杆状
周毛或无 — F
弧菌科 弧形或逗点状
端毛 + F
非发酵菌 球杆状 周毛、端毛或无
+/— O/—
巴斯德氏菌科 球杆状 无鞭毛 + F
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7
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8
第三节、 非发酵菌群的属间鉴别
菌属
假单胞菌属 寡氧单胞菌属 产碱杆菌属 黄杆菌属 鲍特氏菌属 金氏杆菌属 不动杆菌属 无色杆菌属 莫拉氏菌属 艾肯氏菌属 土壤杆菌属
.
3
但在临床上用一般方法不能够分 离出来的细菌有:
鲍特氏菌属(百日咳鲍特氏菌):初次分离对营养 要求较高,在血琼脂平板和巧克力琼脂平板上均不 能生长,必须在含有血液、甘油、马铃薯以及活性 炭的包-金(Bordet-Gengou,B-G)二氏培养基上才能 生长。故用一般的培养基不可能将其分离出来。
麦康凯培 养基上生 长 生长 生长 生长 不易或— — 不定 生长 生长 抑制或— — 生长
.
9
.
10
非发酵菌群 氧化酶
+
假单胞菌属,产碱杆菌属,黄杆菌属, 支气管败血鲍特氏菌,金氏杆菌属, 无色杆菌属,莫拉氏菌属,艾肯氏菌属, 土壤杆菌属。
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11
—
不动杆菌属 寡氧单胞菌属 付百日咳鲍特氏菌
(一)、氧化酶阴性菌群的 属间鉴别
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15
一、假单胞菌属和 寡氧单胞菌属
假单胞菌属属假单胞菌科,该属为严格的专性需氧 的革兰氏阴性杆菌,具有一端鞭毛,无荚膜、无芽 孢。该菌属在自然界中分布广泛,营养要求不高, 氧化酶试验均为阳性,是假单胞菌科的代表菌属。
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16
假单胞菌科由假单胞菌属及其亲缘关系密切的菌属(以 前大部分属于假单胞菌属)组成。用于假单胞菌科分类 的方案有两个:
其一:根据细菌的表型特征分为七个主要的组,即:产 荧光组、斯氏族、产碱组、食酸组、类鼻疽组、敏捷— 德氏组、缺陷组。
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17
其二:根据rRNA—DNA同源性将假单胞菌科分为 5个rRNA同源群,即:
rRNA同源群Ⅰ—包括铜绿假单胞菌等12个种; rRNA同源群Ⅱ—包括伯克霍尔德菌属等7个种; rRNA同源群Ⅲ—包括食酸丛毛单胞菌等7个种; rRNA同源群Ⅳ—微小假单胞菌等8个种; rRNA同源群Ⅴ—寡氧单胞菌等64个种。
此外,还有4个种属于rRNA同源群未知的假单胞 菌。
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18
上述分类中,不管采用哪种分类,临床上常见的只 有两个种,即假单胞菌属的铜绿假单胞菌和寡氧单 胞菌属的嗜麦芽寡氧单胞菌。
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19
1、假单胞菌属
该菌属的代表种为铜绿假单胞菌。该菌早在1872年 由施罗顿(Schroeten)首先命名,因其在代谢过程 中能产生水溶性兰绿色色素,在感染部位能形成兰 绿色脓液,故称绿脓杆菌。该菌除分布在水源、土 壤、空气中外,亦存在于正常人的皮肤、呼吸道、 肠道中,是非发酵菌群中最常见的条件致病菌。
非发酵菌大多是条件致病菌,可引起各种感染, 尤其是医源性感染,近年来各国发病率逐年上升, 已成为当前医院管理中的一个重要问题。
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2
非发酵菌的种类很多,包括十几个菌属、几十个种,有 些还有生物型、亚型等。但与医学关系密切的、具有临 床意义的有:假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌属、 黄杆菌属、鲍特氏菌属、金氏杆菌属、不动杆菌属、无 色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土壤杆菌属、军 团菌属。
非发酵一节 非发酵菌概述
非发酵菌(Nonfermenters)是指一大类不能以 发酵方式(或不能以明显发酵方式)分解葡萄糖 的革兰氏阴性无芽孢的需氧或兼性厌氧杆菌。它 们在分类学上分别隶属于不同的科、属,但生理 生化特性又很相似,故在临床微生物学检验中, 常把它们当作同一类菌群来对待。
氧化酶
+ — + + +/— + — + + + +
触酶
+ + + + + — + + + — +
动 力 O/F 试验 色 素
+(端毛) O 型/—
+(端毛) O 型/—
+(周毛) —
—
O 型/弱 F
—/+(周毛 —
—
弱/F
—
O 型/—
+(周毛) O 型
—
—
—
—
+(周毛) O 型
绿棕红无 部分黄色 — 黄 —/棕 — — — — — —
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4
军团菌属营养要求苛刻,普通培养基、血平板和巧克力平板均 不生长;生长过程中需要多种微量元素如:铁、钙、镁、锰、 锌、钼等作为酶的协同因子;同时需要甲硫氨酸、半胱氨酸等 特殊氨基酸才能生长。目前公认的最适宜培养基是缓冲活性炭 酵母浸出液,加上铁、L-半胱氨酸和α-酮戊二酸组成的BCYEa (buffered charcoal – yeast extract agar)培养基。