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五、结果计算
❖ 甘氨酸氨基氮回收率（%）=实际测得量/加入理论量×100%
❖
=（V标准-V空白）/2×100%
❖ 氨基氮（mg/mL）=（V未-V空白）×0.1×14.008/2
注意
❖ 1、标准NaOH溶液应在使用前标定，并保存于密闭 瓶中。不可使用隔日贮存在微量滴定管中的剩余 NaOH。
❖ 2、本实验为定量实验，甘氨酸和NaOH的浓度要严 格标定，加量要准确。
确指示终点。
常温下，甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合，生成羟甲基化合物，
使上述平衡右移，促进H+释放使溶液酸度增加，滴定终点移至 酚酞的变色域内（pH9.0左右）。因此ห้องสมุดไป่ตู้用酚酞做指示剂，用标 准NaOH溶液滴定。
❖ 如果样品为一种已知的氨基酸，从甲醛滴定 的结果可算出氨基氮的含量；如样品是多种 氨基酸的混合物，如蛋白质水解液，则滴定 结果不能作为氨基酸的定量依据。但此法简 便快速，常用来测定蛋白质的水解程度。随 水解程度的增加滴定值也增加；滴定值不再 增加时，表示水解作用已完全。
实验八 甲醛滴定法测定氨基氮
一、 目的
❖ 初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理 和操作要点
二、 原理
❖ 氨基酸是两性电解质，在水溶液中存在如下
平衡：
R H3N+ CH
R0
-
COO
K'2
H2N
R CH R-
-
COO
+
H+
-NH3+是弱酸，完全解离时pH为11-12或更高，若用碱滴定-NH3+ 所释放的H+来测量氨基酸，一般指示剂变色域小于10，很难准
三、器材与试剂
❖ 25mL锥形瓶 微量滴定管 ❖ 0.1mol/L甘氨酸标准溶液 ❖ 0.1mol/L 标准NaOH溶液 ❖ 酚酞指示剂：
四、操作步骤
❖ 1、中性甲醛溶液的配制：
❖ 量取50mL 36-37%甲醛溶液于锥形瓶中，加入1mL 的0.1%酚酞乙醇水溶液，用0.1mol/L的NaOH溶液 滴定到微红，储存于密闭的玻璃瓶中。此试剂临用 前配制。
2、甘氨酸的滴定
取6个锥形瓶，编号，按下表加入试剂：
瓶号
1 23 45 6
0.1mol/L标准甘氨酸 2
溶液(mL)
未知浓度甘氨酸溶液 0
（mL）
水（mL）
5
20 00 0 00 02 2 57 75 5
酚酞（滴） 5 5 5 5 5 5
甲醛（mL） 2 2 2 2 2 2
❖ 分别用0.1mol /L 的NaOH标准溶液滴定至微 红，并记录NaOH消耗体积。