当前位置:
文档之家› 常见病原微生物的检测 优秀课件
常见病原微生物的检测 优秀课件
2.在活体或未经解剖的尸体内,则不能形成芽胞。芽胞呈椭 圆形,位于菌体中央,其宽度小于菌体的宽度。 3.形成荚膜是毒性特征。 4.炭疽杆菌受低浓度青霉素作用,菌体可肿大形成园珠,称 为“串珠反应”。这也是炭疽杆菌特有的反应。
(二)培养特性
1.本菌专性需氧或兼性厌氧,在普通培养基中易繁殖。 2.最适温度为37℃,最适pH为7.2~7.4 3.在琼脂平板培养24小时,粗糙菌落。菌落呈毛玻璃状,边缘
2.将标本直接涂片,沙黄荚膜染色镜检,观察形态及荚膜特 征,可以初步帮助诊断。
3.确诊应进行血平板分离培养,37℃孵育12~15小时, 钩取可疑菌落,进行青霉素串珠试验,噬菌体裂解试 验,碳酸氢钠平板二氧化碳培养。荚膜肿胀试验和小 白鼠致病力试验等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
四、特异防治
第一节 布鲁氏杆菌(二)
一、生物学性状
1.形态染色 本菌属初次分离培养时多呈小球杆状,毒力菌株有荚膜,经
传代培养渐呈杆状,革兰氏染色阴性。 我国流行的是羊、牛、猪布氏杆菌
2.培养特性
本菌为严格需氧菌; 牛布氏杆菌在初次分离时,需在5~10%CO2环境中才能生
长,最适温度37℃,最适的pH6.6~7.1,营养要求高,生 长时需硫胺素,烟草酸和生物素,泛酸钙等,实验室常用 肝浸液培养基或改良厚氏培养基。 此菌生缓慢,培养48小时后才出现透明的小菌落,鸡胚培 养也能生长。
触污染物品可发生下列疾病: 1.皮肤炭疽,最常见,多发生于屠宰或毛刷工人及饲养
员。 2.纵隔障炭疽, 少见。由吸入病菌芽胞所致,多发生于
皮毛工人,病死率高。病初似感冒,进而出现严重的支气 管肺炎,可在2~3天内死于中毒性休克。
3.肠炭疽, 由食入病兽肉制品所致,以全身中毒症 状为主,并有胃肠道溃疡、出血及毒血症,发病后2~ 3日内死亡。
(三)抵抗力
繁殖体抵抗力不强,易被一般消毒剂杀灭,而芽胞抵抗力 强,在干燥的室温环境中可存活数十年,在皮毛中可存活 数年。牧场一旦被污染,芽胞可存活数年至数十年。煮沸 10分钟或干热140℃3小时可将芽胞杀死。炭疽芽胞对碘特 别敏感,对青霉素、链霉素、卡那霉素等高度敏感。
二、致病性与免疫性
一)致病性 人类主要通过工农业生产而感染。机体抵抗力降低时,接
不整齐,呈卷发状,有一个或数个小尾突起,这是本菌向外伸 延繁殖所致。
4.在5~10%绵羊血液琼脂平板上,菌落周围无明显的 溶血环,但培养较久后可出现轻度溶血。菌落有粘性, 用接种针钩取可拉成丝,称为“拉丝”现象。
5.在普通肉汤培养18~24小时,管底有絮状沉淀生菌落(有荚膜),而无 毒株则为粗糙状。
第一节 炭疽杆菌(一)
炭疽杆菌(Bacillus anthraci)属于需氧芽胞杆菌属,
能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。
(一)生物学性状 1.菌体粗大,排列似竹节状,无鞭毛,无动力,革兰氏染色阳性,
本菌在氧气充足,温度适宜(25~30℃)的条件下易形成芽胞。
(二)血清学检查 通常作凝集试验,判定凝集效价1:50可疑,1:100 以上为阳性。效价增高4倍以上时,更有诊断价值。
(三)酶联免疫吸附检测
(四)PCR检测 此法敏感、特异、快速,实时荧光定量PCR已用于布 氏杆菌特异性基因的检测,即在PCR反应体系中加荧 光基团,利用荧光信号积累,实时监测整个过程。通 过标准曲线可进行定量。
三、主要症状
人感染布氏杆菌表现乏力,全身软弱,食欲不振,失眠,咳 嗽,有白色痰,可听到肺部干鸣,多呈波浪热,也有稽留热、 不规则热或不发热。
盗汗或大汗,一个或多个关节发生无红肿热的疼痛,肌肉酸 痛,由于关节和肌肉疼痛难忍,即使不发烧也不能劳动,成为 能吃不能活懒汉,故该病又被称作"懒汉病"。
病灶发生在生殖器官,影响生育,严重者可引起死亡。
上述疾病若引起败血症时,可继发“炭疽性脑膜炎”。 炭疽杆菌的致病性取决于荚膜和毒素的协同作用。
(二)免疫性
注射炭疽外毒素中保护性抗原于机体,能形成抗毒素免疫, 对受染炭疽有保护作用。但单纯的荚膜抗体对机体没有保护 作用。病后可获较强的免疫力。
三、微生物学检查
1.采集皮肤炭疽的脓液、渗出物,肠炭疽的粪便以及病人的 的血液等送检,兽尸禁止解剖,可割取耳朵或舌尖一片送检。
常见病原微生物的检测
遗留问题
兔血浆制备:无菌采取兔心脏血,以1份灭菌的3.8%枸橼 酸钠液抗凝剂加4份兔血的比例充分混匀,离心,吸取上 清液即为原兔血浆,分装成1ml/支或0.5ml/支;
另用灭菌生理盐水稀释兔血浆,制成4倍稀释血浆(以下 简称为稀释兔血浆),分装同上,于-18℃以下冰冻保存,供 试验
3.抵抗力
在自然界中抵抗力较强,在病畜的脏器和分泌物中,一 般能存活4个月左右,在食品中约能生存2个月。对低温 的抵抗力也强,对热和消毒剂抵抗力弱。对链霉素、氯 霉素和四环素等均敏感。
二、致病性和免疫性
本菌侵入人体后,被吞噬细胞吞噬,由于本菌具有荚膜,能抵 抗吞噬细胞的吞噬消毁,并能在该细胞内增殖。反复出现菌血 症。由于内毒素的作用,病人出现发热、无力等中毒症状,血 流中细菌逐步消失,体温也逐渐消退。细菌在细胞内繁殖至一 定程度时,再次进入血流又出现菌血症,体温再次上升,反复 呈波浪热型。
1.预防人类炭疽首先应防止家畜炭疽的发生。家畜炭疽 感染消灭后,人类的传染源也随之消灭。
2.目前我国使用的炭疽活疫菌,作皮上划痕接种,免疫 力可维护半年至一年。青霉素是治疗炭疽的首选药物, 对肠道及吸入性炭疽治疗困难,有条件的可用抗血清。
五、检测方法
1.环状沉淀反应 2.噬菌体裂解实验 3.荚膜荧光抗体检测 4.质谱分析法
四、微生物学检验
本菌传染性大,要注意防止实验室污染。 (一)分离培养 急性期采集血液,慢性期采取骨髓,接种于双相肝浸液培养基
(一半斜面,一半液体)置37℃10%CO2环境中培养,每隔2 天检查一次,如无细菌生长则摇荡培养基,使液体浸过斜面 上,有细菌生长,可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一 月培养无细菌生长,可报告阴性。