2 动物细胞核移植技术
将动物的一个细胞的细胞核，移入到一个已
经 去掉细胞核的卵母细胞 中，使其重组并发
育成一个新的胚胎，该胚胎最终发育成完整的
动物个体。
原理：细胞核全能性
克隆动物
分 胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易 类 体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性不容易
第一只 克隆宠 物猫CC
单个细胞
动
加培养液
物 细
细胞悬浮液
胞
培 养
10代细胞
离体的植物器官、
组织或细胞
脱分化
接种至培 养基
愈伤组织
植 物
再分化
组 织
培
根、芽 养
50代细胞 无限传代
植物体
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 原理
植物组织培养 动物细胞培养 细胞的全能性 细胞增殖
培养基性质 常用固体培养基 常用液体培养基
细胞贴壁过程
培养器皿
原代培养：从机体取出后立即培养的细 胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与 传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养：将原代细胞（10代以后）从培 养瓶中取出，配制成细胞悬液，分装到两 个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为 传代培养。
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细 胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞 生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物 质的改变，使其在培养条件下可以无限制 传代，这种传代细胞为细胞系。
1.通过观察图像、师生交流，能够简述动 物细胞培养的过程、条件及应用。 2.通过阅读文本、查阅资料，能够简述通 过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 和应用前景。
新知探究
1 动物细胞培养
动物细胞培养就是从动物体内取 出相关的组织，将它分散成单个细 胞，然后，放在适宜的培养基中， 让这些细胞生长和增殖。
2.2.1 动物细胞培养 和核移植技术
新课导入
美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢 辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛 产奶量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的 奶牛，平均每年产量为十几吨，而我国平均水平 仅有3－4吨。
你能想办法繁殖卢辛达的后代，使年产 奶量为30.8t吗？
学习目标
血清：
维生素及一些无机离子。
体外培养细胞既需要上述基本营养物质，
还需要促细胞生长因子等物质才能正常生
长、繁殖。血清中含有多种这类物质，有
利于多数细胞的存活和生长。
较植物组培培养基有何独特之处？ 1、液体培养基 2、成分中有动物血清等
植物组织培养和动物细胞培养的比较
动物胚胎或幼龄动
物的组织、器官
胰蛋白酶
动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等）
3、温度和pH
温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
维持培养 液的pH值
营养 需要
动物细胞培养液的主要成分
基本营养物质：包括水、葡萄糖、氨基酸、
此处细胞在该生活环境中能
无限生长和增殖吗？
细胞培养
胚胎或幼龄动物的组织器官
剪碎
胰蛋白酶
单个细胞
贴壁生长
加培养液制成
接触抑制
细胞悬浮液
原代培养
细随胞着洗 释在细涤、贴胞、分壁分稀离10生裂代长，以过 数内分程 量，瓶中 不保继， 断持续正培常养二倍体核型
增细加胞，增最殖后缓形成一个1单0代层细，胞
传代培养
克隆马及其“ 母亲兼姐姐”
克隆的荧光小 猪(左)和正常 小猪(右)
Ａ母绵羊
B母绵羊
卵细胞
细胞拆合技术
乳腺细胞
多
莉
细胞质
细胞核
羊
的 培
细胞核移植
育
融合后的卵细胞 卵裂
过 程
早期胚胎
胚胎移植
C母绵羊子宫 妊娠 分娩
多莉羊
体 细 胞 核 移 植 过 程 流 程 图
利用体细胞核移植方法生产的克隆动物， 是对体细胞供体动物进行了100%的复制 吗？为什么？
我们能否利用类似植物组织培养获得完 整植物体的方法培养动物细胞，使其发 育成一个完整的个体？
能不能用高产奶牛的一个体细胞，培育出一头 高产奶牛呢？
不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性， 而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高 逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。
全能性高低：植物细胞＞动物细胞
根据动物细胞核仍具有全能性的特点， 怎样将动物细胞的全能性表达？ 利用动物体细胞核移植技术
此慢时，细核胞型间可相互接触，细
胞能分变裂化和生长停止，5数0代量细胞
不再增加。
无限传代
动物细胞生长特性
失去接 触抑制
5部0代分以细后胞突变，获 得 胞不 方死 向性 发， 展向，接癌糖触细蛋抑制 白减少。
动物细胞生长特性
细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶 壁上，称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、 易于贴附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现 象称为细胞的接触抑制。
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
遗传物质未改变 遗传物质改变
细胞株
细胞系
细胞悬 浮液
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
洗涤、稀释、分离
原代培养
传代培养
多数组织细胞固定在表面生长和分裂。
合作学习（结合问题思考流程）
1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？ 2、如何将动物组织分散成单个的细胞？ 3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物 质主要是什么成分？ 4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？ 5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？
原理： 细胞增殖
动物细胞培养的过程
胰蛋白酶或胶原 蛋白酶，使之分 散成单个细胞
取组织块
剪碎组织
用酶，处 理组织
传代培养
原代培养
细胞悬浮 液
用培养液稀释制 成细胞悬浮液
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
取动物组织块 剪碎组织
动物组织细胞间隙 中含有一定量的弹 性纤维等蛋白质。
分散成单个细胞
胰蛋白酶处理
培养基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清
培养结果 培养目的
植物体
细胞株、细胞系
快速繁殖、培育 获得细胞或细胞
无病毒植株
分泌蛋白
动物细胞培养技术的应用
1.生产蛋白生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆 抗体等 2.健康细胞培养：如获得大量自身的皮肤细胞，用 于植皮。 3.用于检测有毒物质 4.用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和 预防疾病提供理论依据