的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
2. 材料与试剂
① 尿素。
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② 10%氢氧化钠溶液。 ③ 1%硫酸铜溶液。 ④ 2%卵清蛋白溶液。 3. 操作方法 ① 取少量尿素结晶，放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化。当熔化的 尿素开始硬化时，停止加热，这时尿素放出氨，形成双缩脲。将得到的物质放置 冷却后，加 10%氢氧化钠溶液约 1mL，振荡混匀，再加 1%硫酸铜溶液 1 滴，边振 荡边观察出现的粉红颜色。实验中避免添加过量硫酸铜，否则生成的蓝色氢氧化 铜溶液会掩盖粉红色的出现。 ② 向另一试管加卵清蛋白溶液约 1mL 和 10%氢氧化钠溶液约 2mL，摇匀后 加入 1%硫酸铜溶液 2 滴，边加边振荡并观察紫玫瑰色的出现。
1．使用方法
（1）将温度计插入插孔内（一般在箱顶放气调节器中部）。 （2）通电，打开电源开关，红色指示灯亮，开始加热。开启鼓风开关，促 使热空气对流。 （3）注意观察温度计。当温度计温度将要达到需要温度时，调节自动控温 旋钮，使绿色指示灯正好亮。10min 后再观察温度计和指示灯，如果温度计上所 指温度超过所需温度，而红色指示灯仍亮，则将自动控温旋钮略向反时针方向旋 转，直调到要需要的温度上，并且指示灯轮番显示红色和绿色为止。自动恒温器 旋钮在箱体正面左上方或右下方。它的刻度板不能作让温度标准指示，只能作为 调节的标记。
具体反应如下：
双缩脲反应不仅在含有两个以上肽键的物质出现，在含有一个肽键和一个 -CS-NH2，-CH2-NH2-，-CRH-NH2-，-CH2-NH2-CHNH2-CH2OH 或-CHOHCH2NH2 等基团及含
有乙二酰二氨（
）等物质也有此反应。另外，NH3 能干扰此反应，
因为 NH3 与 Cu2+可生成暗蓝色的络离子 Cu(NH3)42+，因此，一切蛋白质或二肽以上
6. 讨论部分是对整个实验过程、实验结果的总结、分析。对得到的正常结果和 出现的异常现象以及教师提出的思考题的探讨、研究。
二、容量玻璃器皿的使用方法
吸管是生物化学实验中常用的卸量容器。移取溶液时，如吸管不干燥，应预 先用所吸取的溶液将吸管润洗 2-3 次，以确保所吸取的操作溶液浓度不变。吸取 溶液时，一般用右手的大拇指和中指拿住管颈刻度线上方，把管尖插入溶液中， 左手拿吸耳球先把球内空气压出，然后把吸耳球尖端接在吸管口，慢慢松开左手 指，使溶液吸入管内。当液面升高至刻度以上时，移开吸耳球，立即用右手的食 指按住管口，大拇指和中指拿住吸管刻度线上方再使吸管离液的弯月面与刻度标 线相切时，立即用食指压紧管口，取出吸管，插入接受器中，管尖仍靠在接受器 内壁，此时吸管应垂直，接受器约呈现 15°夹角。松开食指让管内溶液自然地
一、 目的
① 了解蛋白质的基本组成成分及氨基酸间相互连接的主要方式。 ② 了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。 ③ 学习集中常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
二、 呈色反应
（一） 双缩脲反应
1. 原理 尿素加热至 180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中
能与 Cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键， 其结构与双缩脲相似，也能发生此反应，因此可用此反应定性或定量测定蛋白质。
4. 操作方法
在 3 支试管中各加入杜氏试剂 1mL，再分别加入 1 滴 1%葡萄糖溶液，1%半乳
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糖或 1%阿拉伯糖溶液，混匀。将各试管同时放入沸水浴中，观察颜色的变化， 并记录颜色变化的时间。
5. 作业
1. 用什么方法鉴定糖？ 2. 用什么方法鉴定酮糖？
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实验二 蛋白质性质——蛋白质及氨基酸的呈色反应
(2)吹出式：标有“吹”字的为吹出式，使用时最后应吹出管尖内遗留的液
(3)不完全流出式：有零刻度也有总量刻度的为不完全流出式。使用时全速 流出至相应的容量标刻线处。
（一）干燥箱和恒温箱使用说明
干燥箱用于物品的干燥和干热灭菌，恒温箱用于生物材料的培养。这两种仪 器的结构和使用方法相似，干燥箱的使用温度范围为 50－250℃，常用鼓风式电 热箱以加速升温。恒温箱的最高工作温度为 60℃。
一 生物化学实验记录及报告
由于生物化学实验的对象是生命体或是生物活性物质，在实验中很容易受外 界环境条件的影响，而引起实验结果的差异。因此，在实验记录和写实验报告时， 需要实验者做到仔细、认真、实事求是，只有这样才能获得真实可靠的实验结果。
在实验课前应认真预习，初步了解验目的、实验原理，对操作方法及步骤要 做到心中有数，最好写一个预习提纲，将实验步骤简要的写出来。
在同样工作条件下测定未知样品，用所得的数据从标准工作曲线中查出未知样品
的浓度。作图时，首先要在坐标纸上标出坐标轴，标明轴的名称和单位，然后在
横轴和纵轴上一一找出实验交叉点，用“×”或“·”标注上，再用直线或平滑
线将各点连接起来。图线不一定经过所有实验数据点，但要求线必须尽量通过或
靠近大多数数据点。个别偏离过大的点应舍弃，或重复试验进行校正。此外在图
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（4）工作一定时间后，可开启顶部中央的放气调节器将潮气排除，也可以 开启鼓风机。
（5） 使用完毕，关闭开关。将电源插头拔下。
2. 注意事项
（1）检查电源，要有良好的地线。 （2）切勿将易燃易爆物品及挥发性物品放入箱内加热。箱体附近不可置易燃 物品。 （3）箱内应保持清洁，放物网不得有锈，否则影响玻璃皿洁净度。 （4）烘烤洗刷完的器具时，应尽量将水珠甩干再放入烘箱内。干燥后，应等 到温度降至 60℃以下方可取出物品。塑料、有机玻璃制品的加热能超过 60℃， 玻璃器皿的加热温度不能超过 180℃。 （5）鼓风机的电动机轴承应每半年加油一次。 （6）放物品时要避免碰撞感温器，否则温度不稳定。 （7）检修时应切断电源，防止带电操作。
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5. 将实验中的现象、数据进行整理、分析，得出相应的结论。在生物化学实验 中最常用的多以图表法来表示实验结果，这样列分析测定，制作图表或绘制标准曲线等，为以 后待测样品的分析提供方便的条件。如通过实验值在图表中直接查出结果。现将
(1)列表法：通常将实验所得的出表格。通常在表格的第一行和第一列标出
2. 实验器材
① 棉花。 ② 滤纸。 ③ 吸管：1mL、2mL。 ④ 试管。
3. 材料与试剂
① 莫氏试剂：称取α -萘酚 5g，溶于 95%酒精中。此实际需新鲜配制，并 储存于棕色瓶中。
② 1%蔗糖：称取蔗糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水。 ③ 1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水。 ④ 1%淀粉溶液：将 1g 可溶性淀粉与少量蒸馏水混合成浆状物，然后缓缓 倾入沸蒸馏水中，边加边搅，最后以沸蒸馏水稀释至 100mL。
① 杜氏试剂：2%间苯三酚乙醇（95%）溶液 3mL，缓缓加入浓盐酸 15mL 及蒸 馏水 9mL。临用时配制。
② 1%阿拉伯糖溶液：称取阿拉伯糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水。 ③ 1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水。 ④ 1%半乳糖溶液：称取 1g 半乳糖溶于 100mL 蒸馏水。
② 1%果糖溶液：称取果糖 1g，溶于蒸馏水定容至 100mL。 ③ 1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水 ④ 1%蔗糖溶液：称取蔗糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水。
4. 操作方法
在 3 支试管中分别加入 1%葡萄糖溶液，1%蔗糖溶液或 1%果糖溶液 0.5mL， 各加塞氏试剂 2.5mL，摇匀，同时置沸水浴内。比较各管颜色变化及红色出现的 先后次序。记录试验现象。
（2）将调温旋钮沿顺时针旋转到适当温度位置。 （3）打开电源开关，接通电源，红灯亮表示电炉丝通电开始加热。 （4）在加热过程中，当读数达到所需温度时，红灯熄灭，绿灯亮，表示恒 温控制发生作用。水浴锅将保持恒温。 （5）调温旋钮度盘的数字并不表示恒温水浴内的实际温度。随时记录调温 旋钮在度盘上的位置与恒温水浴内指示湿度的关系，记录两者差值，标定刻度盘 的温度。 （6）使用完毕，关闭电源开关，拔下插头。 （7）若较长时间不使用，应将调温旋钮退回原位，并打开放水阀门，放尽 水浴槽内的全部存水。
二、实验报告
实验结束后，应及时整理和总结实验数据，写出实验报告。一份好的实验报 告包括以下内容。
1. 标题应包括实验时间、实验地点、实验组号、实验者姓名、实验室条件(如 温度、湿度) 2. 3. 应简明扼要地阐述实验的理论指导，使未做过实验的人看后对该实验有一个
4. 要描述自己的操作过程及方法，不能完全照抄实验指导书，可简明扼要地把 实验步骤一步步写出，也可用工艺流程图或表格形式按照先后顺序表示。实验步
（二）电热恒温水浴使用说明
电热恒温水浴（槽）用于加热及蒸发等。常用的有 2 孔、4 孔、6 孔和 8 孔， 单列式或双列式。工作温度从室温上以至 100℃，恒温波动±1℃－±5℃。
1．使用方法
（1）关闭水浴底部外侧放水阀门，将水浴内注入蒸馏水至适当的深度。加 蒸馏水是为了防止水浴槽体（铝板或铜板）被侵蚀。
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沿器壁流下。遗留在吸管尖端的溶液及停留的时间要根据吸管的种类进行不同处
1.无分度吸管(单刻度吸管，移液管) 使用普通无分度吸管卸量时，管尖所遗留的少量溶液不要吹出，停留等待 3s 2.分度吸管(多刻度吸管、直管吸管)
(1)完全流出式：上有零刻度，下方无总量刻度的，或上有总量刻度，下无 零刻度的为完全流出式。这种吸管又分为慢流速、快流速两种。按其容量和精密 度不同，慢流速吸管又分为 A 级与 B 级，快流速吸管只有 B 级。使用时 A 级最 后 停留 15s，B 级停留 3s，同时转动吸管，尖端遗留液体不要吹出。但由于产品 质量不同，如按上述操作，每次停留 15s 或 3s 会造成卸量不同。出现误差(甚至 是很大的误差)。因此，因根据实验条件，采取全部吹出的方式。这样会减小平
三、 杜氏（Tollen）试验