项目２青霉素效价测定
一、知识连接
(一)抗生素效价表示方法
效价就是评价抗生素效能得标准,也就是衡量抗生素活性成分含量得尺度。

效价一般指得就是生物活性得大小或者高低,生物活性得大小与高低就是与效价成正比得。

实际应用中,合理使用抗生素得剂量十分重要。

抗生素应用时剂量小,因此除重量外,常用特定得效价单位(unit)表示,效价单位也称抗菌活性单位。

最初,由于抗生素无法制得纯品,用其生物活性得大小来表示其剂量、
一个青霉素得效价单位(Ｕ):能在5０mL肉汤培养基中完全抑制金黄色葡萄球菌标准菌株得发育得最小青霉素剂量。

一个链霉素效价单位(U):能在1mＬ肉汤培养基中完全抑制大肠杆菌(ATCC9６3７)发育得最小剂量。

重量单位(μg):以抗生素得有效成分(生理活性成分)得重量作为抗生素得基准单位(大多数使用)。

(二)抗生素效价测定
抗生素微生物检定法可分为稀释法、比浊法与琼脂扩散法(管碟法与打孔法)。

各国药典通常采用后两种方法测定抗生素得效价。

管碟法就是利用抗生素在琼脂培养基得扩散渗透作用,在含有高度敏感性试验菌得琼脂平板上放置小钢管(内径6、0±0。

l mm,外径8、0±０。

l mm,高1０±０.lmm),管内放入标准品与检品得溶液,经16～1８小时恒温培养,当抗生素在菌层培养基中扩散时,会形成抗生素浓度由高到低得自然梯度,即扩散中心浓度高而边缘浓度低。

因此,当抗生素浓度达到或高于MIC(最低抑制浓度)时,试验菌就被抑制而不能繁殖,从而呈现透明得无菌生长得区域,常呈圆形,称为抑菌圈。

抑菌圈得大小代表药剂抗菌力得高低。

在一定得药剂浓度范围内,药剂得浓度越高则抑菌圈得直径越大。

目前最常用得就是游标卡尺与直尺直接测量抑菌圈直径、根据扩散定律得推导,抗生素总量得对数值与抑菌圈直径得平方成线性关系,即通过检测抗生素对微生物得抑制作用,比较标准品与供试品产生抑菌圈得大小,计算出供试品得效价。

管碟法得基本操作与设计适用于各种抗生素,试验结果较稳定;样品用量少,灵敏度高;适合于大批样品得测定。

然而凡具有抗菌活性得物质都会干扰测定结果;试验过程长,得出结果慢;操作手工化,需熟练人员才能得到较正确得结果;受扩散因素得影响,如培养基原材料得质量,一般琼脂中得杂质可能影响扩散速度及效价强度。

尽管如此,由于它有上述得独特优点而被世界各国所公认,成为国际通用得方法被列入各国药典法规内、
二、制订方案
根据情境导入中得问题,制订抗生素生物效价得测定方案表,如表5—2-1所示。

表5－2—1 抗生素生物效价得测定方案
教师对学生进行分组,每组选出一个小组长,小组长根据小组成员任务分工不同,确定不同任务得责任人、小组成员任务得划分可以参考下面得小组任务分配表,如表5—2-2所示。

表5—2-2 小组任务分配表
三、实施
依据制订方案实施,并填写实验记录表,如表5－2-3所示。

四、作业
１、通过实训后完善本次任务得实训方案
２、抗生素效价测定中,为什么常用管碟法?
３、管碟法测定时需要注意哪些问题?
来自:发酵生产原理及实训技术,主编韩文清程立坤孙霞,内蒙古大学出版社,出版日期２01６.12,IＳBN 9７８－7－５665—1112－6
定价:5５元Eｍail。