知识支撑
香豆素类与异羟 肟酸铁的反应原 理
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薄层色谱
学生
教师
（1）将样品与对照品分别用毛细 血管吸取适量点于硅胶GF254板的适 当位置，将板置于色谱缸中。 （2）准确量取三氯甲烷-甲醇-甲酸 （6:1:0.5)并置于干燥洁净的具塞量 筒中混合后，加入色谱缸中进行展 开。 （3）展开结束时，取出色谱板， 标记溶剂前沿，挥干溶剂后，置于 紫外灯下观察，记录荧光斑点，得 出结论。
《天然药物提取技术》之三
秦皮中香豆素的提取分离与鉴定
医学院 闫金红
单元位置
2
香豆素（Coumarin）
《天然药物提取技术》 64 学时 第3单元
苦杏仁中苦 杏仁苷提取 与分离
秦皮中香 豆素的提 取分离与 鉴定
(4 学时)
大黄中游 离蒽醌的 提取分离 与鉴定
单元目标 能力目标
知识目标
素质目标
1.能够运用蒸馏法、萃 取法和结晶法的操作技 术对秦皮中的七叶内酯 和七叶苷进行提取分离 2.运用薄层色谱法和化 学法鉴定七叶内酯和七 叶苷
性状
溶解性
香豆素母核本身无荧光，但羟基 香豆素类化合物在紫外光下大多 显蓝色或蓝绿色荧光，在碱液中 更加显著。香豆素的荧光性质可 用于香豆素成分的检识鉴别。
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显色2.纸色谱法
游离香豆素能溶于沸水， 易溶于甲（乙）醇、氯 仿、乙醚等，可溶于石 油醚。 香豆素苷类能溶 于水、甲醇、乙醇，而 难溶于乙醚、苯等极性 小的有机溶剂。
学生易犯错误
电子天平使用 不规范，甲醇 量取时视线与 刻度线不保持 水平
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回流
学生
教师
涉及知识
（1）正确安装回流装置：铁架台、 观察发现
固定夹子的安装，冷凝水的调节 问题，指
（2）加热1h与计时正确
导。提问
（3）回流结束的操作顺序正确 溶剂的选
择原因。
香豆素的溶解 性
学生易犯错误
（1）进水管与 出水管接反（2） 先停水再停止 加热
3
1.掌握香豆素与木质素的 结构特点与理化性质 2.掌握蒸馏法、萃取法和 结晶法的操作方法及注意 事项 3.熟悉荧光实验与异羟肟 酸铁实验鉴别七叶苷与七 叶内酯的原理 4.熟悉薄层色谱的操作流 程
1. 培养学生严谨、认真 的工作态度和强烈的责 任心
2. 培养学生的合作能力
单元设计
课程导入 检查预习情况 （10分钟)
黄色针晶
用甲醇反复结晶
七叶内酯
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水液 七叶苷
任务二 秦皮中香豆素类成分的提取分离——90分钟 操作准备
学生
（1）个人着装等，实验室台面符合要 求 （2）准备回流装置并检验仪器是否干 燥、洁净，若不符合要求，清洗后干 燥。 （3）称取药材粉末150g （4）量取乙醇200ml
教师
观察发现 问题，指 导。
95%EtOH200ml,回流1小时，药渣再重复两次
乙醇提取液
减压蒸馏浓缩至无醇味
浓缩物
加蒸馏水40ml,加热溶解，滤过
水溶液
加等体积CHCl3萃取
CHCl3
水层
（树脂等脂溶性杂质） 挥去CHCl3，用等体积EtOAc萃取三次
EtOAc萃取液
加适量无水硫酸钠
残留物
温热甲醇，浓缩至适 量，放置析晶，滤过
理化性质
溶解性 与碱反应 荧光性
游离香豆素可溶于醇和亲脂性溶剂，香豆素苷可溶于 醇与水
香豆素具有内酯环，在稀碱溶液中水解开环溶于水， 加酸环合难溶于水
香豆素具有蓝色或紫色荧光，可用于鉴别。7-羟基香 豆素蓝色荧光最强，加碱后荧光更强。
提取分离
异羟肟酸铁反应用于鉴别内酯环；三氯化铁鉴别酚羟基，
显色反应 Emerson试剂、重氮化反应用于鉴别酚羟基及对位
主治：清热燥湿、 清肝明目、平喘 止咳。用于热毒 泻痢、目赤肿痛、 目生翳障
5
预习任务二：秦皮中主要有效成分香豆素的结构、性质、提取分离鉴定方法
香 豆 素
6
含义 结构类型
具有苯并α-吡喃酮基本母核的天然药物的总称
简单香豆素，呋喃香豆素、吡喃香豆素、异香豆素、双香豆素
性状
游离香豆素具有香味，无色或浅黄色结晶，有挥发 性，香豆素苷无香味，无挥发性和升华性。
成果 展示
60%
过程性 考核
Thank you for your attention !
任务一
制定秦皮中七叶内 酯和七叶苷的提取 分离操作流程 （25分钟)
单元总结 知识梳理 （5分钟)
4
任务三
七叶苷与七叶内 酯的鉴定 （50分钟)
任务二
秦皮中香豆素类 成分的提取分离 （90分钟)
单元导入——10 分钟 回顾上单元内容
检查预习任务的完成情况
预习任务一：分组查阅并讨论秦皮的来 源，性质，有效成分；
提取：溶剂提取法、碱溶酸沉法。 分离与鉴定：色谱法
布置单元任务
某制药厂中药提取车间实习，其所在的生产小组接到一个任务，要在 一个月内，从秦皮中提取中提取七叶内酯1吨。
生产车间——班级 工艺指导——授课教师 生产小组——课堂分组 (每组5人，共8组，五名同学担任组长）
表一 生产任务通知单
任务下发部门：质量部
学生
各小组参照任务单，教材，实验 指导及预习资料，制定秦皮中香 豆素提取分离简单工艺流程。 分小组展示工艺流程。 修改并掌握秦皮中香豆素提取分 离制备工艺流程
教师
指导老师结合学生展示 进行工艺流程，提问选 择提取方法的原因。
涉及理论知识
溶剂提取法、碱溶 酸沉法，碱溶酸沉 法的原理。
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最佳工艺流程
秦皮粗粉150g
知识支撑
香豆素类与碱的 反应
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异羟肟酸铁实验
学生
（1）取七叶内酯与七叶苷分别置 于试管中，加入盐酸羟胺甲醇溶液 2~3滴，再加1%的氢氧化钠溶液 2~3滴，在水浴中加热数分钟，至 反应完全，冷却。 （2）再用盐酸调pH 3~4,加 1%FeCl3试剂1~2滴，溶液变红~紫 红色。
教师
观察发现 问题，提 问学生发 生变化的 原因
产品名称：七叶苷、七叶内酯 生产数量：1000kg 开始时间：2019-05-15
任务接收部门：生产部 结束时间：2019-06-15
7
单元任务
任务一：制定秦皮中七叶内酯和七叶苷的提取分离操作流程 任务二：秦皮中香豆素类成分的提取分离 任务三：七叶苷与七叶内酯的鉴定
8
任务一 制定提取分离工艺流程——25分钟
教师
监督，强 调安全
学生易犯错误
重结晶时加入的 甲醇量过多或过 少
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任务三 七叶苷与七叶内酯的鉴定——50分钟 荧光实验
学生
（1）取七叶内酯与七叶苷的甲醇 溶液分别低于滤纸上，在紫外灯下 观察荧光的颜色。 （2）在原斑点上滴加一滴氢氧化 钠观察荧光的变化。
教师
观察发现 问题，提 问学生发 生变化的 原因
秦皮粗粉
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滤过-浓缩
学生
（1）将滤纸叠成4折后，置于漏斗 中，滤纸边缘应低于漏斗边缘 （2）将圆底烧瓶中溶液倾倒入漏 斗中，进行过滤至小锥形瓶中 （3）减压蒸馏，浓缩
教师
学生易犯错误
观察发 过滤时做不到三 现问题， 低；使用减压蒸 指导。 馏装置时水泵与
加热的顺序颠倒
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氯仿萃取
学生
教师
（1）将浓缩物加入40ml蒸馏水，并加热。 观察发现问
观察发现 问题，提 问学生发 生此现象 的原因。
知识支撑
七叶苷与七叶内 酯的分子结构， 极性。
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单元总结——
知识梳理
α、β-不饱和内酯 环在稀碱液的条件 下，可被水解开环， 生成顺邻羟基桂皮 酸盐，该盐经酸化 即闭环恢复成原来 的内酯结构，该性 质可用于提取分离。
内酯环 的水解
游离香豆素多为结晶性物质，有一定 熔点，多有芳香气味。分子量小的有 挥发性，能随水蒸气蒸出，并能升华。 香豆素苷多数无香味和挥发性，也不 能升华。
（2）加入40ml氯仿，进行萃取，去除树 题，指导。
脂等脂溶性杂质。
提问萃取注
意事项。
注意事项
萃剂原液互不溶，质 溶程度不相同。充分 振荡再静置，下放上 倒切分明。
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重结晶
学生
（1）将挥去氯仿的水层加入乙酸 乙酯进行萃取。 （2）乙酸乙酯萃取液蒸干，加入 甲醇重结晶，得黄色针状晶体七叶 内酯。 （3）水液加入甲醇重结晶，得微 黄色针晶七叶苷。
1.内酯的颜色反应（异羟 肟酸铁反应 ） 2.酚羟基的颜色反应 3.Gibb’s反应 4.Emerson反应
单元总结 技能提升
2 1
回流 减压蒸馏
萃取 重结晶
3
薄层色谱
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单元总结——5分钟 考核与评价
？？
1.小组合作时 每个同学的考 核标准
2.每个小组的 考核标准
3.课堂提问的 考核？
21
40%