实验十四亚硝酸钠滴定法测定
复方乙酰水杨酸片中非那西丁的含量
一实验目的
1.掌握亚硝酸钠标准溶液配制及标定的原理及方法；
2.了解重氮化滴定的特点，掌握重氮化终点的判断；
3.熟悉复方制剂含量测定的特点；
3.掌握复方乙酰水杨酸片中非那西丁含量测定的原理及方法。
二实验原理
对氨基苯磺酸是具有芳伯胺基的化合物，在酸性条件下，可与NaNO2发生重氮化反应而定量地生成重氮盐。
滴定终点，过量的NaNO2与碘化钾反应，生成碘，使淀粉碘化钾试纸变蓝，指示标定终点。
复方乙酰水杨酸片处方（77年版）
乙酰水杨酸220g
非那西丁150g
咖啡因35g
制成1000片
本品每片中含乙酰水杨酸（C
9H
8
O
4
）应为0.209－0.231g，含非那西丁（C
10
H
13
O
2
N）
应为0.143－0.158g，含咖啡因（C
8H
10
O
2
N
4
·H
2
O）应为31.5－38.5mg。
复方乙酰
水杨酸片为白色片。
本品每片中含乙酰水杨酸(C9H8O4)与非那西丁(C10H13NO2)均应为标示量的95.0～ 105.0％；含咖啡因(C8H10N4O2·H2O)应为标示量的90.0～110.0％。
解热镇痛药。
用于发热、头痛、神经痛、牙痛、月经痛、肌肉痛、关节痛等。
复方乙酰水杨酸片中含有乙酰水杨酸（简称A）、非那西丁（简称P）和咖啡因（简称C）三种主要成分。
各成分之间性质差异大。
乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，，可用酸量法测定；非那西丁为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。
含量测定反应
1 乙酰水杨酸的测定：将残渣溶于中性纯，直接用0.1M氢氧化钠液滴定游离羧酸。
+
+
C O O H
O C O C H 3
N a O H
C O O N a
O C O C H 3
H 2O
2 非那西丁的测定：
第一步，水解，得到芳香伯胺：
+
+
H 2O
NH
O C 2H 5
CO CH 3
NH 2
O C 2H 5
CH 3CO O H
H 2S O 4
第二步，重氮化定量反应：
N H 2
O C 2H 5N a N O 2
H C l
N
+
O C 2H 5
N C l
-
N a C l
H 2O
2
2+
+
++
3 咖啡因的含量测定： 以[B]代表咖啡因的结构
C H 3
N C C N
C
C H 3
C N
N O
H
C H 3O H 2O
定量反应原理：
2[B]+ 4I 2 + 2KI + H 2SO 4 2[[B]·HI ·I4] + K 2SO 4 （定量过量）
过量的碘用硫代硫酸钠滴定：
I 2 + 2Na 2S 2O 3 2NaI + Na 2S 4O 6
三 仪器及试剂
1.仪器：分析天平、干燥箱、回流装置、水浴锅、烧杯、量筒、酸式滴定管、玻璃棒等。
稀
2.试剂及试液亚硝酸钠、无水碳酸钠、蒸馏水、基准对氨基苯磺酸、浓氨试液、盐酸（1+2）、溴化钾、复方乙酰水杨酸、稀硫酸、含锌淀粉碘化钾试纸。
四实验步骤
1.（0.1mol/L）亚硝酸钠溶液配制
称取亚硝酸钠7.2 g，加无水碳酸钠（Na2CO3）0.10g，加水适量使溶解成1000 ml，摇匀。
2. （0.1mol/L）亚硝酸钠溶液标定
用分析天平称取在120℃干燥至恒重的基准对氨基苯磺酸（0.26-0.35 g）三份，分别置于三个250ml烧杯中，加水30 ml 及浓氨试液3 ml，溶解后，加盐酸（1+2）20 ml，搅拌，在30 ℃以下用亚硝酸钠溶液迅速滴定，滴定时将滴定管尖端插入液面2/3处迅速定，近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至玻璃棒蘸取少量的溶液，在含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上划过，立即显蓝色的条痕，停止滴定，3分钟后，再蘸取少许溶液，再划一次，如仍立即显蓝色条痕，即为已至终点（每1ml的亚硝酸钠滴定液（0.1 mol/L）相当于17.32mg的对氨基苯磺酸。
根据本液的消耗量与对氨基苯磺酸的取用量）算出亚硝酸钠溶液的浓度，即
C=m/(MV)
3. 非那西丁的含量测定：取本品20片，精密称定，研细备用。
精密称取上述细粉适量（约相当于非那西丁0.3g），置回流装置中，加稀硫酸25ml，缓缓加热回流40分钟，放冷至室温。
将析出的水杨酸，滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸溶液（1+ 2）40ml，分数次洗涤，每次5ml，合并虑液与洗涤液于250ml烧杯中，加溴化钾3g，溶解后，将滴定管尖端插入液面下约2/3处，在不低于20℃的温度下，用0.1M亚硝酸钠溶液迅速滴定。
随滴随搅拌。
至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将滴定管尖端洗净，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至玻璃棒蘸取少量的溶液，在含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上划过，立即显蓝色的条痕，停止滴定，3分钟后，再蘸取少许溶液，再划一次，
如仍立即显蓝色条痕，即为已至终点，即得（每1ml的0.1M亚硝酸钠溶液相当于17.92mg的C10H13O2N）。
C10H13O2N含量=17.92CV/m(乙酰水杨酸)
四数据记录与处理
五注意问题
1 药片应尽量研细。
2 测定乙酰水杨酸时，锥形瓶应干燥，滴定应迅速。
3 非那西丁的水解，要保持微沸状态，否则水解不完全影响结果。
4 碘量法测定咖啡因的主要影响因素是溶液的酸度和碘液的浓度。
碘和咖啡因作用后，碘的剩余浓度应在0.025－0.035N之间，低于此数值结果则偏高。
沉淀咖啡因时，加5ml稀硫酸较为适宜，酸度过高则结果偏高。
5 过滤咖啡因与碘形成的沉淀时，需用干燥的滤纸，最初的虑液应弃去10－15ml，过少可能影响碘的浓度。
过滤时，要注意放置碘液挥散。
六思考题
1 乙酰水杨酸的测定中可否直接按中和法测定？中心醇应如何配制？
2 用重氮化法测定非那西丁为什么要加KBr？重氮化反应，在什么情况下可不加KBr？
3 测定咖啡因为什么要做空白试验？如何做？
七参考资料
1 药学通报336－338（1958）。
2 D·C Garratt：The Quantitative Analysis of Drugs P12(Third edition 1964).
3 T·Higuchi:pharmaceutical Analysis 1961 P563.。