将预烘过的样品按前述（标准法）步骤进行第二次烘干
计算第二次烘干水分％(S2) 按下式计算样品种子总含水量 种子含水量（％）＝ S1 + S2 注：称重要用感量0.001g天平 S1×S2 100
！！！
五、人工种子
随着体细胞杂交、基因工程、组织培养等现 代生物 科学技术的飞速发展，世界范围内都在致 力于“人工种子(artificial seed）”的研究。
第十一章
种子质量的常规检验
即我国规定的品种纯度、种子净度、 发芽力、水分四大质量指标的检验
一、种子净度分析
1、种子净度分析及其标准 种子净度(purity)——指种子清洁干净的程度，具体讲是
指样品中除去杂质和其它植物种子后留 下本作物（种）净种子重量占分析样品 总重量的百分率
分析目的——通过对样品的分析，推断种子批的组成情
2、发芽试验的方法步骤——标准法
准备发芽床
从净种子中数取一定数量种子（小粒100×4，大粒50×4）
制床 置于适宜条件下发芽 每天检查并在初期（3－5天）进行鉴定计数 末期（7－10天）鉴定并记载正常幼苗、不正常幼苗、
硬实、新 鲜不发芽、腐烂霉变等死种子数
发芽势= 计算 发芽率=
初次计数的正常幼苗数 供试种子数 末次计数的正常幼苗数 供试种子数
×100％ ×100％
3、幼苗鉴定
完整幼苗——主要构造如根、中轴、苗端子叶或芽 正 常 幼 苗 鞘生长良好、完全、匀称、健 带有轻微缺陷的幼苗——主要构造有某种缺陷但能 均衡生长，与完整幼苗相当 次生感染的幼苗——被霉菌感染使主要构造发病或 腐烂，但有证据表明病源不来自种子本 受损伤的幼苗——由外因引起幼苗构造残缺不全或 严重损伤以致不能均衡生长 畸形或不匀称幼苗——有内因导致生理紊乱，幼苗 细弱或主要构造畸形、不匀称 腐烂幼苗——由初生感染引起主要构造发病和腐烂 并妨碍正常生长者
况，为种子清选分级提供依据;分离出的净 种子为其它项目的分析提供样品
分析标准—— 将样品分为
（快速法）
净种子 其它植物种子 杂质
净种子(pure seed)——从种类上看是指送验者所叙述种，
包括该种的全部植物学变 种和栽培品种； 从构造上看是指完整的种子单位 和大于原来大小一半的破损 种子单位 说明：即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的、发过 芽的种子，如能明确地鉴别出它属于所分析的种， 应作为净种子，但已变成菌核、黑穗病孢子 团或线虫瘿的应除外
将含样品的烘盒放入103 ˚C±2 ˚C烘箱内
烘干8 h 后取出置干燥器中 冷却后称重 结果计算 种子含水量＝ 结果计算并核对允许误差（≤0.4%） 试样烘前重量－试样烘后重量 ×100％
试样烘前重量
若送验样品为高水分种子
禾谷类 >18% 豆类、油料 > 16％

必须用二次烘干法
称取整粒种子25±0.02g×2 分别置样品盒中 放入103˚C烘箱内预烘30min (油料种子70˚C 1h ) 取出冷却称重 计算第一次烘干水分％(S1)
手工（如图 1-5 ） 机械（原理与手工同）
3. 人工种子研制的意义
人工种子最大优点是能直接利用体细胞起源的分裂 组织，在植物育种、栽培上均具重要意义： 简化育种过程、缩短育种年限、固定杂种优势 有利于远缘杂交、孤雌生殖等突变体利用 便于营养繁殖和机械化播种、节约粮食 便于工厂化生产、保证种子质量
身 不 正 常 幼 苗
4、种子生活力和活力测定
1）测定意义—— 测定休眠种子的生活力：利于正确评定种 子品质、合理利用种子； 可在短期内了解种子的发芽状况 引、 调种前林木、花卉、牧草发芽所需时间长 测试研究新品系或新品种的休眠特性
2）测定方法

四唑法
简况：1942年德国kon发明，经研究、完善1984年国际种 子检验协会（ISTA）编写的（四唑测定手册）介绍了650多个属、 种、种子的四唑测定技术，适用于农作物、蔬菜、林木、牧草、 药材和花卉种子的生活力测定，国家 种子检验规程中列入58种 作物种子的四唑测定方法。 试剂特性：四唑盐种类较多，常用的是2、3、5—氯化三苯基四 氮唑，简称红四唑（TTC、TTB或TZ）该试剂为白色粉末，易溶 于水，有微毒，见光易还原成红色，棕色瓶包装，外包黑纸，存 于暗处。若溶液发红，便不能再用。
上或湿纸间进行吸湿，豆类纸间6—8h 暴露种胚——禾谷类沿胚中部纵切显示出胚各部分的结 构，取半粒； 棉花纵切，去掉部分种皮和胚乳遗迹
c. 四唑浸泡显色——纵切种胚的为 0.1%、35℃ 0.5~1h
棉花 0.5% 35 ℃ 2~3h 豆类、瓜类等整胚 1% 35 ℃ 2~3h d. 观察鉴定——有光泽的鲜红色为有生活力，不显红色或显浅红 色或显异 常颜色的为无生活力
2. 人工种子的结构及制作技术：
结构 目前研制成功的人工种子由胚状体（embryoid）、 人工种皮、人工胚乳三部分构成：
人工种皮 胚状体 人工胚乳
高质量胚状体的诱导 (已有92属、100余种植物)
制作技术
人工胚乳的配制 (营养素+生长调节剂+抗菌素) 人工种皮的研制
包裹 干燥 播种或贮藏
包裹可用
2、室内检验 程序 品种真实性鉴定，若真实
随机数取试样两份
选择适宜方法检验品种纯度 计算品种纯度
本品种粒数（重量） 品种纯度＝ 检验总粒数（重量）
×100％
棉花种子纯度可依籽棉纤维长度、纤维整齐度、杂籽
百分率鉴定
测定方法
形态测定法 物理化学法
籽粒形态 幼苗形态 荧光测定法 苯酚染色法
电泳法 液相色普技术 酶联免疫法
×100％
注：上式分母应为分析后的各成分重量之和；
又分全试样和半试样法，前者%保留 到1位小数，后者到2位小数； 各成分％相加之和应为100.0%，否则应予以修正
当送验样品中含重型杂物时，净度分析结果应 按下式计算：
M-m 净种子 P2（%）=P1×——— M M-m m1 其它植物种子 OS2%=OS1×——— +——— ×100 M M M-m m2 杂质 I2%=I1×——— +——— ×100 M M
四、种子含水量测定
1、种子含水量及其测定方法
种子含水量——种子中含有的水分重量占种子重量的百分数
烘干法——标准法
测定方法 定 电子仪器法——快速测定法
甲苯蒸馏法 — 特殊样品如含挥发物质的测
2、种子含水量的标准法（烘干法）测定
程序 称取除去杂质的种子样品约30g 磨碎（油质种切碎）混匀 分取磨碎样品 5g×2 分别置于烘至恒重的烘盒内并准确称重
品种纯度是指一批种子（或田间植株）中个体与 个体间在特征特性方面典型一致的程度，即本 品种种子（或株、穗）占本作物（种）样品数 的百分率。 品种纯度检验的对象可以是种子、幼苗、植株或 器官，又分田间检验和室内检验：
1、田间检验——选择品种特征特性最明显的时期如
抽穗、开花或成熟期进行：
程序
选取有代表性的若干点
+2H 脱氢酶
TTCH + HCI
红色
测定方法 a. 配制试剂：
1%——测整胚种子
0.1%——测纵切种胚的种子 试剂不纯，溶液酸性强（pH4）不能用于测定。
b. 种子预措、预湿和暴露种胚（T15—1）
随机取净种子100粒2~4次重复
30℃水浸3-4h（禾谷类、棉花、白菜等），或将种子 置于湿纸
生化测定法
分子生物学技术
RAPD RFLP AFLP
三、种子发芽试验
1、种子的发芽指标
种子发芽势 —— 种子在发芽试验初期(规定条件
(germinative energy) 和日期内)长成的正常幼苗数 占供试种子数的百分率 种子发芽率 —— 种子在发芽试验终期(规定条 (germinative percent) 和日期内)长成的正常幼 苗数占供试种子数的 百分率
1. 人工种子的概念及研究进展：
人工种子——指通过组织培养获得发育完全的植物个 体，将其用适当方法加以保护，以代替 天然种子传播的结构
人工种子的概念，于1978年在第四届国际组培会 上由美国生物学家Murashige首次提出。1983 年，美国遗传公司申请专利，日本麒麟啤酒股 份公司参与开发。上世纪80年代中期，美、日、 法相继开展研究，欧州共同体将其列入尤里卡 计划；我国自1985年开始进行人工种子研究。 目前，已研制成功的主要有：水稻、胡萝卜， 苜蓿、芹菜、花椰菜、花旗松、天竺葵、山茶、 西红柿、黄连、西洋参、橡胶等。
测定原理：有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都有氧
化还原反应的发生，当四唑渗入种子后，参与活细胞的还
原反应，从脱氢酶上接受氢，自身被还原成稳定、红色、
不扩散、不溶于水的三苯基甲 ，使其显红色、而死种子 或种胚某一部位无生活力时，则不显红色，据此鉴别种子
有无生活力及无生活力种子死组织的部位。
TTC
无色
个别种属如豆科十字花科种皮完全脱落的为
杂质，有胚芽、胚根，并带有超过原来 一半种皮的豆科种子的分离子叶也 列为杂质
其它植物种子（other seed）——指净种子以外 的任何植物种类的种子单位，其 鉴别标准与净种子标准基本相同 杂质（impurity）——除净种子和其它植物种子 以外的所有种子单位、 其它杂质及构造
依据株高、株形、叶色、叶形、花色、穗形等 确定品种的真实性
逐株鉴别记载本品种、异品种、异作物、杂草、感染病株数
分别计算各成分％
结果计算
本品种株(穗)数
品种纯度% ＝
供检本作物总株(穗)数
×100
若
检验的为杂交制种田，还应记载和计 算母本散粉株率、父本散粉杂株率 及母本杂株率 检验点外有零星发生的检疫性杂草病虫 感染株应单独记载
开发前景十分诱人
4.存在问题与展望：