专题三植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养淮中刘昌萍【课前自主学习】学习目标1.识记被子植物花粉发育的过程2.通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力学习重点难点重点:1.被子植物花粉发育过程 2.花药离体培养过程难点: 1.被子植物花粉发育过程 2.花药离体培养过程一．植物组织培养的基本过程1、什么是细胞分化？植物个体发育过程中，细胞在上产生的过程，称为细胞分化。
2、植物组织培养技术运用了什么样的原理？植物组织培养的原理是：。
3、什么是愈伤组织？愈伤组织是指离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，通过形成的、的薄壁细胞。
4、什么是脱分化？由高度分化的植物组织或细胞产生的过程，叫做脱分化，或叫做去分化。
5、什么是再分化？脱分化产生的继续进行培养，又可以重新成根或芽等器官，这个过程叫做6、观察参考书P32页，总结植物组织培养的基本过程用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做注意：在植物组织培养过程中，往往需要，人为的控制细胞的与二、影响植物组织培养的因素1、不同植物组织的培养，培养难易程度如何?同一植物组织的不同部分培养呢？举例说明不同植物组织或同一植物的不同部分，培养的难易程度，菊花的组织培养，一般选择的茎上部新萌生的侧枝。
2、通过阅读P33，试总结一般的培养基的成分都有哪些？离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要适宜的培养基。
常用的一种培养基是培养基。
成分：大量元素____________________________微量元素____________________________微量元素有等；有机物_______________________________等；另外还要添加。
3、对照P33页表，比较对两类激素的不同的操作顺序和用量，其实验结果有何不同？启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素是________。
当先使用生长素，后使用细胞分裂素时，实验结果：__________________________；当先使用细胞分裂素，后使用生长素时，实验结果_________________；同时使用细胞分裂素、生长素时，实验结果： _。
生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，则有利于_____________________；比值低时，则有___________；比值适中时，则促进_______________。
4、除了上述因素外，对于其他条件有何特殊要求？一般PH控制在；温度控制在；每天用日光灯照射12小时。
思考：①植物组织培养体现了____________。
植物细胞的分裂方式是______。
②植物细胞表现出全能性的条件是________________________。
问题反馈：【课中互助合作探究】探究一：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同。
探究二：MS培养基中各种营养物质的作用是什么？肉汤培养基相比，MS培养基有哪些特点？探究三：在选取菊花茎段时，为什么选取生长旺盛的嫩枝？探究四：在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？探究五:应该做几组重复、设置几组对照实验？探究六:外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？当堂检测：1．植物细胞表现出全能性的必要条件是（）A.给予适宜的营养和外部条件B.导入其它细胞的基因C.脱离母体后，给予适宜的营养和外部条件D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内2．以下成为组织培养条件的是( )①C02 ②有机物③生长素④细胞分裂素⑤水⑥矿质元素A. ①③⑤⑥B. ②③⑤⑥C. ②③④⑤⑥D. ①②⑤⑥【课后巩固拓展】1．用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列说法错误（）A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.该愈伤组织的细胞没有全能性C.该愈伤组织是有排列疏松的薄壁细胞组成D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构2．细胞分化是稳定的，其方向一般（）A.可逆B.不可逆C. 有时可逆 , 有时不可逆D. 无法确定3．愈伤组织分化过程中, 当培养基中细胞分裂素/ 生长素的比值较低时, 诱导分化的器官( )A. 根B. 芽C. 叶D. 胚性细胞团4．当先使用细胞分裂素, 后使用生长素时, 实验结果是( ) 。
A. 有利于细胞分裂, 但细胞不分化B. 细胞既分裂又分化C. 分化频率提高D. 有利于细胞分化, 但不分裂5．MS培养基和微生物培养基相比有哪些不同? ( )A.MS培养基不含有机物B. 微生物培养基以有机物为主C.MS培养基不含微量元素D.MS培养基需提供大量无机营养6．生长素比细胞分裂素比值低时, 则( )A. 有利于根的分化, 抑制芽的形成B. 有利于芽的分化, 抑制根的形成C. 促进愈伤组织形成D. 促进根和芽的分化专题三植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养第二课时三、实验操作过程（一）制备MS固体培养基实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备1、配制各种母液。
配制母液时，大量元素浓缩，微量元素浓缩。
常温保存。
激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。
用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
2、配制培养基。
配制1LMS培养基时，先将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热使琼脂熔化，然后加入蔗糖30g,去配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。
调节pH值，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装50或100mL3、灭菌。
高压蒸汽灭菌［思考1］MS培养基中各种营养物质的作用是什么？肉汤培养基相比，MS培养基有哪些特点？（二）外植体消毒1、选取菊花茎段时，要取。
2、无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料（外植体）的消毒灭菌。
对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑_______________；另一方面还要考虑植物材料的__________。
不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。
一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，真菌污染可能是_________灭菌不当。
〖思考2〗为什么选取生长旺盛嫩枝进行组织培样？［思考3］在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？（三）接种接种前，用将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。
所有的接种操作必须在旁进行，并且每次使用器械后，都要用灭菌。
（四）培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。
培养期间定期，温度控制在℃，并且每天用日光灯光照12h。
（五）移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用清水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
（六）栽培每天要观察记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花〖思考4〗实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌，实验中是如何做到无菌操作的？课中小结：【课后巩固拓展】时间要求：在30分钟之内完成。
实际用时：分钟1.愈伤组织分化过程中，当培养基中细胞分裂素用量/生长素用量的值较高时，诱导分化的器官是（）A．根B．芽C．叶D．胚性细胞团2．下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情况下，最易表达的是（）A．枝条上的一个芽B．柱头上的花粉C．胚珠中的珠被细胞D．根尖分生区细胞3．下列关于植物组织培养的目的，不正确的是（）A．生产人工种子B．生产新品种C．生产杀虫剂D．生产干扰素4．将一粒花粉培育成幼苗，对它的茎尖用秋水仙素处理，长大后该植株正常开花结果.该植株的下列哪种细胞与其它细胞染色体数目不相同（）A．根细胞B．叶细胞C．花粉细胞D．卵细胞5. (03，江苏高考)要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（）A.具有完整细胞核的细胞B．离体状态C．导入外源基因D．一定的营养物质和激素6．(03，江苏高考)用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误的是（）A．细胞经过脱分化和分裂形成的B．细胞没有全能性C.由排列疏松的薄壁细胞组成D.可以形成具有生根发芽能力的胚状结构7.(04，广东高考)下面几种说法中，正确的是（ ）A.叶肉细胞脱分化后形成无定形状态的薄壁细胞B.叶肉细胞经再分化过程形成愈伤组织C ．融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜D ．叶肉细胞离体培养时，不可以表现出全能性8.（2006，北京）以下不能说明细胞全能性的实验是（ ）A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B.紫色糯性王米种子培育出植株C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株9．右图表示水稻（体细胞有24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb 。
（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得 和 、小分子有机物等营养物质。
（2）要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有 和 两类激素。
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具根、茎和叶的植物体。
这一过程必须给予光照，其原因是 利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。
（4）试管苗的细胞中含有 条脱氧核苷酸链。
（5）培育出的试管苗可能出现的基因型有 。
（6）这种利用花药离体培养成的试管苗属于 体。
要使它繁殖后代必须采取的措施是 。
10. 下图是植物组织培养的简略表示。
请据此回答：（1）①表示 ，它能被培养成为④的根本原因是 。
（2）②表示____ ，它的特点是。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）。
（4）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片颜色是，这说明了根尖细胞。
（5）若①是花粉则④是 。
课后反思：① ② ③ ④脱分化 再分化。