1.操作台基本要求：
2. 随着传代次数的增加，连续培养细胞系遗传物质不稳定，不得将细胞存放于-20℃或-80℃冰柜中，因为细胞存在次低温条件下活力迅速降低。

3.细胞污染：
（1）细菌污染
（2）酵母污染
（3）霉菌污染
初期PH值维持稳定，污染严重后PH值迅速升高，导致培养基浑浊。

（4）病毒污染
一般不会对与其宿主物种不同的细胞培养物造成不良影响，通过电子显微镜检查、一组抗体的免疫染色，ELISA实验或者采用适当病毒引物的PCR技术可以检测出细胞为病毒污染。

（5）支原体污染
唯一检测支原体污染的方法是采用荧光染色、ELISE、PCR、免疫染色、放射自显影
4.抗生素只能作为对付污染的最后手段而且只能短期使用，并应尽快撤出
5．适合贴壁的细胞和悬浮的细胞
6.基础培养基，减血清培养基，无血清培养基
7.PH值：大多数正常哺乳动物细胞系PH为7.4；
成纤维细胞系适合轻度偏碱（pH7.4-7.7）
Sf9和sf21等昆虫细胞系最适合在PH值为6.2的环境中生长8.温度：大多数人和哺乳动物细胞系在36℃至37℃最佳
昆虫细胞在27℃为最佳
禽类细胞在38.5℃最佳
冷血动物（15℃-26℃）
9.动物细胞形态划分：
●成纤维细胞，贴附生长
●上皮样细胞呈多角形，贴附
●淋巴母细胞样细胞呈球形，不贴附
●特殊形态：
✧I型有长突触
✧Ⅱ型没有轴突
10.细胞增长模式
11.何时传代？
●哺乳动物：生长的PH值通常表示乳酸储积，且有毒性，当PH迅速降低（）
0.1-0.2PH单位），同时细胞浓度增大，则应对细胞进行传代。

●昆虫细胞PH值会上升但不超过6.4
12．贴壁细胞的解离
13.贴壁细胞的传代
14.贴壁昆虫细胞传代：
15.悬浮细胞传代流程
16.细胞冻存：
17.冷冻细胞解冻方案：
18.利用血球计数器进行细胞计数：
19.台盼蓝拒染法：。