• 文献综述 •437的上升，达到了96.7%。
常智云[7]通过对95例需进行院前急救的患者进行了回顾性分析，认为强化急救技术的培训和心理素质的培养、制定管理预案与风险评估、强化法律意识、做好充分的物品及人员的准备是95例患者未出现1例安全事故的主要预防因素。
陶秀萍[8]对120辆急救车进行了五常法管理（“5S ”管理），即常组织、常整顿、常规范、常清洁、常自律。
经过1年的院前急救，发现急救车物品的标准化放置率从92.48%上升到98.92%；物品的取放效率从72.94%上升到95.78%。
认为五常法管理是目前提升护理人员自身素质和业务规范的重要技术。
能有效提高工作的效率，降低各类医疗实践的发生率。
2 未来护理安全管理的发展方向医患纠纷是当前我国较为突出的一个问题，无论医院的何种部门，其纠纷的发生都是难以避免的。
曾有调查指出[9]，护理人员对医疗诉讼的了解率仅为39.75%。
很大程度上说明目前护理人员只关注自身的业务问题，而忽视了更为重要的法律问题。
因此，加强对各类护理人员进行医疗卫生法规的学习就显得很有必要。
另外，对院前急救的事故进行统计发现，护理人员的专业知识水平以及处理能力往往和急救中事故的发生密切相关。
曾有报道称，有近三成的医疗纠纷是护理人员对病情的误判和操作不当引发。
鉴于此，美国在2005年通过了“患者安全和医护质量行动”[10]。
所以，制定相应的、多层次的护理培训制度，就成为了护理人员专业水平及处理能力提高的重要方式。
就护理工作而言，护理人员往往处于急救现场的第一线，面临的工作强度及心理压力较大，护理人员长期处于一种高紧张的心理状态。
另外，目前我国护士从业缺口较大，很多急救队伍出诊时人员配备明显不足，特别是突发事件时，需要急救的患者较多，而护理人员无法同时对多个目标进行急救，也是造成医患纠纷的一个重要内容。
有文献报道[11]，护理人员在急救过程中忽视了设备和药品的管理，在患者已经上车的情况下将药品遗落在抢救现场，最终导致了医疗纠纷的发生。
目前，我国慢性疲劳综合征的发病率为（75～267）/10万，而该比例在护理人员中的发病率为1088/10万。
国外众多医院以及开始重视“人文关怀”在护理人员中的应用，对护理人员进行定期的心理疏导、放松假期，可以明显改善负面情绪在日常急救护理过程中的出现，从而降低发生医疗差错的概率。
最重要的一点，患者是院前急救的中心。
因此，任何护理工作的开展都应当及时、清楚地和患者及家属沟通，并取得其理解和同意，形成“交流—协作—互补”型的护患关系。
综上所述，目前院前急救的护理安全管理研究在我国开展的时间较短，研究较少，但其重要性却是不言而喻的。
因此，根据所在医院的具体情况，制定合理、有效的院前急救护理安全管理办法，将是未来一段时间内各医院护理工作研究的重点。
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这就需要通过基因转移技术将目的基因插入患者的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能发挥效应。
造血干细胞是一种多能干细胞，不仅有重构造血免疫系统的潜能，而且有潜能被诱导分化为多种人体组织细胞，这无疑是基因治疗很好的靶细胞，受到了越来越多的关注，并取得很多进展。
【关键词】基因治疗；造血干细胞；基因转移技术中图分类号：R34 文献标识码：A 文章编号：1671-8194（2013）05-0437-021990年，美国NIH 首次运用基因治疗的方法，成功治愈了由于腺苷脱氨酶（ADA ）基因缺陷而引起的重度联合免疫功能缺陷的患者，这一历史性的创举引起了人们的极大关注，使得基因治疗迅速的发展，至今已达20多年。
今天的基因治疗已从单纯的重组技术导入DNA 变为了了包括DNA 和RNA 两个水平的干预，和基因上调及下调两个方面。
造血干细胞作为一种多能干细胞，不仅能够重构造血免疫系统，而且有潜能被诱导分化为多种人体组织细胞，同时具有持续的自我更新能力，这为目的基因的持续稳定有效表达创造了条件，是基因治疗理想的靶细胞。
1 造血干细胞研究造血干细胞（HSC ）是最早发现的一种干细胞，也在目前研究中最受瞩目。
它能不断更新血源细胞来维持机体整个生命周期的运转，造血干细胞来源于骨髓和脐血，它采用不对称的分裂方式：当一个细胞一分为二时，其中一个细胞继续保持原干细胞的一切生物特性，以438• 文献综述 •维持体内干细胞数量基本稳定，这是其自我更新潜能。
而另一个细胞则可在不同条件下分化为不同类型的细胞，这是其多能性。
基因治疗近年来多涉及到造血干细胞正是因为这些HSC独具的条件：①造血干细胞的自我更新，它为导入目的基因的持续表达提供了理想的基础。
②造血干细胞的多能性，HSC不仅能分化为各种血细胞而且在诱导条件下还能向非造血组织细胞分化如：肝细胞、胰腺细胞等。
与其他靶细胞相比，造血干细胞来源于骨髓或脐带血，可以方便获得，而且无伦理道德争论，其体外纯化、培养和扩增技术日趋完善，这就为造血干细胞作为基因治疗的靶细胞提供技术保证[1,2]。
为人类疾病治疗提供了全新的理想的方法。
2 基因治疗载体的选择选择合适的载体系统是基因治疗成功的关键，使用非病毒载体和各种病毒载体达到的转染效率差异很大，对目的基因的长期稳定表达有很大的影响。
非病毒载体是利用物理和化学的方法增强细胞膜通透性，是目的基因进入细胞内，而病毒载体利用的则是病毒对人体细胞天然的感染能力，二者在不同方面各有优劣：①非病毒载体。
基因治疗中载体的安全至关重要，非病毒载体将基因治疗中的基因看作药物，依从药理学的角度将目的基因导入靶细胞表达。
病毒性载体应用于临床上安全性问题，使得非病毒载体的研究受到高度重视，其导入方法主要有：a.细胞转导肽介导的基因导入系统：1988年，Green 首先发现人类免疫缺陷病毒（HIV）的TAT蛋白可以进入细胞和细胞核。
这之后不断有新的大分子蛋白被发现可以进入细胞膜，将这些蛋白特有结构域与其他大分子结合或融合表达，可以携带生物大分子进入细胞发挥作用，这些结构域称为蛋白质转导功能区。
这一发现为体内基因治疗的新载体开发提供了基础。
b.电脉冲刺激可以在体外介导目的基因进入靶细胞。
1998年，Aihara 的研究报道了电脉冲刺激促进裸DNA导入骨骼肌细胞。
近年来这一技术不断改进，已为基因治疗提供了很好的基础。
c.壳聚糖是甲壳类动物中的甲壳质脱乙酰化后所得的多糖类物质，壳聚糖/DNA可复合为纳米颗粒，有效导入细胞，其导入新基因，其最大优点为安全、无毒[3]。
②病毒载体：a.腺相关病毒载体，其具有能感染分裂及非分裂细胞能力，还有宿主范围广，定点整合和免疫原性低等优点，安全性较好。
但其转导HSC是效率很低，转移基因多呈瞬时转染。
b.逆转录病毒是正链RNA病毒，它的有编码逆转录酶和整合酶的功能，定染色体整合可以使目的基因的终身表达，因而其成为目前运用最广的载体。
c.慢病毒载体是以HIV-1为基础发展起来的逆病毒科载体体系，慢病毒具有容纳大片段外源基因，稳定整合，感染非分裂期细胞，免疫反应小等优点，但是，虽然科研人员已做了大量工作在保证HIV-1载体的安全，使其不能产生有复制能力的HIV-1病毒。
但仍人们对其安全忧虑仍然存在，因此，以非人类的慢病毒为基础构建载体如猫免疫缺陷病毒、猴免疫缺陷病毒等已经开展起来并获得了长足的发展，这为病毒载体的生物安全增加了保障[4-5]。
3 造血干细胞基因治疗的临床应用造血干细胞移植（HSCT）在临床上为众多患有血液系统恶性疾病和一些遗传性疾病的患者带来福音，目前仍然是治疗血液系统疾病和一些遗传性疾病的有效方法和重要的研究方向。
在异基因造血干细胞移植当中，HLA基因匹配程度会影响到移植效果和患者术后生存状况。
当HLA基因不匹配程度的增加，移植相关的病死率会上升。
所以异基因HSCT这种方法有着严格的供体来源限制。
而造血干细胞为靶细胞的基因治疗可以不避免移植物抗宿主等并发症。
其中以逆转录病毒为载体造血干细胞基因治疗在治疗腺苷脱氨酶严重复合型免疫缺乏症、X连锁的严重复合型免疫缺陷症、X连锁的慢性肉芽肿疾的临床实践中已获得巨大的成功。
XL-SCID是由于编码IL-2，IL-4，IL-7，IL-9和IL-15共同的受体γ链（γc）基因突变引起的，通过逆转录病毒携带γc基因进入患儿自体造血干细胞当中，再回输患儿体内，实验结果显示接受基因治疗的大部分患儿出现了基因修正后正常的T细胞和NK细胞，之后几个月的跟踪报道显示患儿体内的T细胞表型和功能都趋于正常。
类似的临床实践在其他XL-SCID患儿身上同样获得成功。
而ADA-SCID的基因治疗结果更加令人振奋，将携带有ADA基因的病毒载体转染到患者自体HSC输到患者体内，经过基因治疗后，在患者的骨髓中观察到稳定植入的转导细胞，随后发现基因纠正后的细胞逐渐分化成大量正常的细胞。