绘制吸收曲线
比色皿， 用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在260-290nm 比色皿 以蒸馏水为参比， 每隔5nm测量一次吸光度，在峰值附近每隔 测量一次吸光度， 间，每隔 测量一次吸光度 2nm测量一次。以波长为横坐标，吸光度为纵坐标 测量一次。 测量一次 以波长为横坐标， 绘制标准吸收曲线，确定最大吸收波长为Xmax. 绘制标准吸收曲线，确定最大吸收波长为
混合磷酸盐 缓冲溶液和 清洗好的电 极。
配制标准缓冲溶液并 清洗安装电极 用蒸馏水清洗好 电极，并用洁净 仪器准备 的滤纸吸去附着 连接仪器，开启开关，检查电极的 在电极上的水。 玻璃球泡是否有裂痕，内参比电极 是否浸入内参比溶液内，仔细检查 参比溶液内是否有气泡。
供试品pH的测定 供试品 的测定
用蒸馏水冲洗电极， 并用滤纸吸去附在表 酸度计的标定 面的水珠，并用氯霉 先用试纸大概测一下 素注射液淋洗，将电 极放入氯霉素注射液 氯霉素注射液的pH 值，再选用一个与其 中，轻轻摇动，待读 数稳定后，读取数据， 相似的pH的标准缓 如此重复5次，取其 冲溶液，将电极浸入 标准缓冲溶液，轻轻 平均值。关上电源， 摇匀，待读数稳定后， 取下电极并清洗干净， 收藏待用。 记录数据，如此重复 操作2-3次。
目录
实验内容
实验目的 实验原理 实验仪器与器材 实验药品 实验步骤 1.pH值的测定 值的测定 2.含量的测定 含量的测定 数据的记录 数据处理 实验分析
Contents 1
Contents 2
实验目的
学会正确使用直接电位法 测溶液的pH值；学会利用紫 测溶液的 值 外分光光度计来准确测定溶液中 氯霉素的含量。 氯霉素的含量。
实验仪器与器材
复合电极
紫外分光光度计
Description of the contents
Description of the contents
温度计，烧杯（ ） A 温度计，烧杯（150ml）
分析天平
D
实验仪器与器 材
B 容量瓶（25，100ml） ， ）
比色皿， 比色皿，吸量管 C
实验药品
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0.025mol/l
氯霉素注射液
0.025mol/l混合磷酸盐 混合磷酸盐
实验步骤
氯霉素注射液pH值的测定 氯霉素注射液 值的测定
Title
• 仪器准备
Title
• 配制标准缓冲溶液 •清洗电极并安装 清洗电极并安装
Title
•酸度计的标定 酸度计的标定
Title
•供试品 的测定 供试品pH的测定 供试品
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波长nm 标准氯 霉素溶 液A 供试品A 波长nm
260
265
270
272 274
将上述配制好的不同浓度的标准氯霉素溶液， 将上述配制好的不同浓度的标准氯霉素溶液，各 吸取5ml,和供试液 和供试液5ml,用紫外分光光度计于 用紫外分光光度计于Xmax 吸取 和供试液 用紫外分光光度计于 处测定吸光度并记录数据，绘制工作曲线。 处测定吸光度并记录数据，绘制工作曲线。
能够利用所学 知识来设计并 独立完成实验 法案。 法案。 能够理解并掌 握利用紫外分 光光光度计对 样品做定性和 定量分析的原 理。
实验原理
测定溶液的pH值 通常用玻璃电极做指示电极， 测定溶液的 值，通常用玻璃电极做指示电极，饱和甘汞电极做 参比电极（ ），与待测溶液组成原电池 参比电极（SCE），与待测溶液组成原电池，在一定的实验条件 ），与待测溶液组成原电池， 原电池的电动势与溶液的电动势的pH之间的关系符合能斯特 下，原电池的电动势与溶液的电动势的 之间的关系符合能斯特 方程式， 方程式，即： E=K’+0.0592pH（t=25。C） （ ） 本实验采用比较法来测定氯霉素注射液的pH值 本实验采用比较法来测定氯霉素注射液的 值。 紫外分光光度法测定氯霉素含量的原理是朗伯比尔定律，即： 紫外分光光度法测定氯霉素含量的原理是朗伯比尔定律， A=kcb 即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。 即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度呈线性关系。且同一物 质的吸收曲线相似，最大吸收波长相等，浓度越大， 质的吸收曲线相似，最大吸收波长相等，浓度越大，吸收强度越 不同物质吸收曲线不同，最大吸收波长不等。 大，不同物质吸收曲线不同，最大吸收波长不等。
含量检测
根据质量标准，供试品氯霉素注射液的 值是否符 根据质量标准，供试品氯霉素注射液的pH值是否符 合标准？ 合标准？
根据质量标准， 根据质量标准，供试品氯霉素注射液的含量是否
符合标准？ 符合标准？
Company LOGOTha Nhomakorabeak You!
L/O/G/O
仪器分析课题研究
氯霉素注射液含量与pH值的测定 汪加红 张志雄 周强 张锦雯
L/O/G/O
背景知识
氯霉素是由委内瑞拉丝菌产生的抗生素。氯霉素注射 液是氯霉素的灭菌溶液，它的含量应为标示量的90%-110%。 也就是说它的浓度应为0.125g/ml，其PH大概应为5.0-7.5. 氯霉素注射液是无色或略带微黄色的澄明液体。
276
278
280
285 290
附图表如右侧
标准氯 霉素溶 液A 供试品A
数据记录与处理
数据处理
溶液 编号 吸光度A 1 2 0.02 浓度mg/ml 0.01 标准溶液 3 0.03 4 0.04 5 0.05 供试品 6 Cx
绘制出标准工作曲线，并校正工作 绘制出标准工作曲线， 曲线， 的关系式， 曲线，得到一个A-C的关系式，即可 求出供试品的浓度，并求出含量。 求出供试品的浓度，并求出含量。
溶液pH 标准缓冲溶液 氯霉素注射液
1
2
3
4
5
平均值
氯霉素注射液中氯霉素含量测定
氯霉素标准溶液的配制:称取 标准氯霉素， 氯霉素标准溶液的配制 称取10mg标准氯霉素， 称取 标准氯霉素 蒸馏水溶解后， 容量瓶， 用1ml蒸馏水溶解后，转移至 蒸馏水溶解后 转移至100ml容量瓶， 容量瓶 用蒸馏水定容至刻度线，分别移取2.5， ， 用蒸馏水定容至刻度线，分别移取 ，5.0， 7.5，10.0，12.5ml标准氯霉素溶液移至 标准氯霉素溶液移至25ml ， ， 标准氯霉素溶液移至 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。即配成浓 度分别为0.01，0.02，0.03，0.04， 度分别为 ， ， ， ， 0.05mg/ml的标准氯霉素溶液。 的标准氯霉素溶液。 的标准氯霉素溶液