兼具T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性 杀瘤优点
增殖速度快，杀瘤活性高，杀瘤谱广，对多种耐药肿瘤细 胞同样敏感
能以不同机制识别肿瘤细胞，通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的肿 瘤细胞膜进行胞吐，达到对肿瘤细胞的裂解
能分泌IL-2、IL-6、IFN-γ等多种抗肿瘤的CK 对正常细胞无毒性作用，被认为是新一代抗肿瘤过继免疫治疗的首
TIL对IL-2的依赖性较小 动物实验表明，其体内抗肿瘤效应比常规LAK强50-100倍 TIL对某些实体瘤治疗已取得疗效 TIL细胞由于杀瘤谱窄，制备困难，及在收集过程中可能导致的功 能改变而限制了其临床应用价值.Leabharlann 19.20
.
21
细胞治疗临床研究的困难
个体化制备，难以产业化，缺乏投入 免疫方案的变量（抗原、佐剂、细胞因子、效应细胞类型
肿瘤的生物治疗
.
1
概念
肿瘤的传统治疗模式
手术 放射治疗 化学治疗
肿瘤生物治疗：用生物来源的制剂或调节生物 反应的制剂治疗肿瘤的方法
.
2
肿瘤生物治疗的主要途径
调节细胞生物学行为： 增殖、凋亡、分化、血管生成、侵袭、转移等
调节宿主免疫反应
.
3
恶性肿瘤的生物学行为特征
自我满足的生长信号 对生长抑制信号不敏感 逃避凋亡 无限复制的潜能 诱导血管生成 侵袭和转移 免疫逃逸
属于主动免疫治疗
抗原＋佐剂
.
24
肿瘤疫苗分类
蛋白/多肽疫苗 抗独特型抗体疫苗 病毒疫苗 DNA疫苗 以树突细胞为基础的肿瘤疫苗 全细胞肿瘤疫苗
.
25
肿瘤疫苗设计策略
选择合适的肿瘤 抗原
选择肿瘤抗原的 给予方式
.
26
树突状细胞（DC）
.
27
DC的制备
BMDC
TNFα, IL-4, GM-CSF
血 肝肾功能损害（IFN） 骨痛（G-CSF） 诱发自身免疫反应（IFN等）
.
13
免疫效应细胞
.
14
免疫效应细胞治疗
过继性免疫效应细胞治疗，adoptive cellular immunotherapy,ACI
通过分离技术获取患者自身免疫细胞，在细胞因子 的诱导下，体外大量扩增出具有高度抗肿瘤活性的 免疫细胞，再回输到患者体内，达到增强肿瘤患者 的免疫功能和抗肿瘤的目的
.
4
免疫逃逸
免疫监视假说 免疫编辑假说
.
5
肿瘤生物治疗的特点
具有肿瘤特异性（高度选择性） 作用机理及毒副作用与常规治疗不同 不容易产生耐药 毒副作用较小
.
6
肿瘤生物治疗的分类
细胞因子 免疫效应细胞 肿瘤疫苗 免疫刺激剂 基因治疗 单克隆抗体 小分子靶点药物
.
7
细胞因子（cytokine, CK）
放化疗后骨髓抑制的支持治疗
.
12
CK的毒副反应
流感样症状（多数CK）：寒战、发热、肌痛、头痛、 乏力等
毛细血管渗漏综合征（IL-2，IL-11）：低血压、浆膜 腔积液、组织水肿等
胃肠道反应（IFN）：恶心、食欲减退、呕吐等 神经精神症状（IFN）：抑郁、躁狂、人格改变等 血液学毒性（IFN）：白细胞减少，血小板减少，贫
.
10
CK的抗肿瘤作用机制
诱导免疫效应细胞的激活、增殖与分化，增强免 疫效应细胞的功能与活性
抑制肿瘤病毒的增殖和肿瘤细胞的分裂 促进肿瘤细胞抗原递呈和共刺激分子表达 直接杀伤肿瘤细胞或诱导肿瘤细胞凋亡 抑制肿瘤血管生成，诱导肿瘤细胞分化
.
11
CK临床应用举例
IFN-α：高危皮肤黑色素瘤的术后辅助治疗 IL-2：晚期黑色素瘤的姑息治疗 EPO、TPO、G-CSF、GM-CSF、IL-11等：
选方案
.
17
CIK细胞的制备
PBMNC 0.5-5×107（50ml blood）
IFNγ IL-2 CD3 mAb IL 1α
24 个175cm 的培养瓶
12-14 days 1~1.5×1010
.
18
肿瘤浸润淋巴细胞
（Tumor infiltration lymphocytes,TIL）
浸润在肿瘤组织中具有抗肿瘤效应的淋巴细胞 从实体瘤组织分离的TIL在体外经IL-2激活后可大量扩增 TIL来自肿瘤组织区域，可特异识别自体肿瘤，具有特异的MHC限制 性溶解肿瘤活性
.
8
CK的分类（按作用方式）
调节天然免疫的CK：
TNF-α,IL-1，IL-6，IL-10，趋化因子等
调节获得性免疫的CK：
IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-β等
作用于造血系统的CK：
EPO、TPO、G-CSF、GM-CSF、IL-11、IL-3等
.
9
CK的特点
低分子量蛋白质 非特异性结合 自限性和短效性 高效性 多源性 多效性 网络性
抽50ml-60ml外周血
分离单核细胞，体外诱导DC细胞
DC细胞负载自体肿瘤抗原并与自体的淋巴细胞混合， 刺激自体T细胞产生CTL
回输CTL
直接杀伤肿瘤肿瘤细胞
PBDC
TNFα, IL-4 GM-CSF
肿瘤抗原 6~8 days
成熟的DC
.
28
DC疫苗在实体瘤治疗中的策略（1）
抽50ml-60ml外周血
分离单核细胞，体外诱导DC细胞
DC细胞负载自体肿瘤抗原，通过 静脉回输给病人或经皮下注射
经肿瘤抗原负载DC细胞刺激自体T细胞
产生抗肿瘤免疫应答
.
29
DC疫苗在实体瘤治疗中的策略（2）
等）等多，难以确定最佳免疫方案进行III期临床试验 缺乏能指示临床转归的(免疫)检测指标，RECIST、WHO
标准不适用 辅助治疗，研究周期长,难以重复 现阶段难以获得高级别的循证医学证据
.
22
肿瘤疫苗
.
23
概念
肿瘤疫苗：
利用肿瘤抗原，通过主动免疫方式诱导机体产生特异性 抗肿瘤效应,激发机体自身的免疫保护机制,达到治疗肿 瘤或预防复发的作用
.
15
免疫效应细胞分类
非特异性：NK,CIK,LAK等 特异性：CTL,TIL等 中山大学肿瘤医院生物治疗中心开展的细胞免
疫治疗项目
CIK、DC、D-CIK、NK、DC-T
.
16
细胞因子诱导的杀伤细胞 （cytokine induced killer cells, CIK）
人外周血单个核细胞在体外用多种CK（如抗CD3-McAb, IL-2,IFN-γ,IL-1α等）共同培养一段时间后获得的一群 异质细胞