＋/
－
＋/ － ＋
－
沙门菌
＋
－
＋
＋
－
变形杆菌 ⊕
－
＋/ － －
＋/－
肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验）
材料
1. 菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物
2. 伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水
方法
血清
生理盐水
肠道杆菌生化反应的结果
葡萄糖 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ＋ ＋
乳糖 ⊕ ＋ ± － － － －
革兰染色
纯培养 生化反应
触酶试验
甘露醇试验
药敏试验
革兰染色的操作步骤
涂片制作
染色 镜检
革兰染色的操作步骤
初染
结晶紫1分钟
媒染
卢戈氏碘液1分钟
脱色
95%酒精30秒
复染
稀释复红30秒
脓汁标本的生化反应
1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌； 2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株
与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养 基由紫色变黄色.
一、标本中未知病原性球菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方 法
2、掌握药物敏感试验
（二）实验器材
1、待检的脓汁标本； 2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普
通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸
片，3%过氧化氢； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养
动力 ± － ＋ ＋ ＋ ＋ －
H2S － － ＋ ＋ ± ＋ －
尿素 － － ＋ － － － －
埃希菌属 克雷伯菌属 变形杆菌
非致病 菌
乙型副伤寒
甲型副伤寒
伤寒杆菌
致病菌
痢疾杆菌
(-)
(+)
（甘—露）醇发（酵+试）验
二、标本中未知肠道感染细菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤 2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应
（二）实验器材
1、待检的粪便标本； 2、培养基：SS平板，生化反应管；普通
琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸
实验十
标本中未知细菌的分离和鉴定
致病菌的检验程序和常用项目
形态学检查
直接涂片 染色镜检
初步诊断
分离培养
形态特征
（常规培养或 生化试验
特殊培养）
血清学诊断
血清学试验 动物实验
药物敏感试验
明 确 诊
（沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等）
断
细菌的快速鉴定
(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核 酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等）
片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养
箱、显微镜、载玻片等。
（三）实验方法与检验流程
粪便标本
SS平板
克氏双糖铁斜 面培养基
观察结果
纯培养
革兰染色
生化反应管
玻片凝集试验
药敏试验Biblioteka 肠道杆菌五管糖试验菌名
葡萄糖 乳糖
大肠埃希菌 ⊕ ⊕
志贺菌
＋
－
麦芽糖 甘乳糖 蔗糖
＋
＋
箱、显微镜、载玻片等
（三）实验方法与检验流程
直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性
标本
观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板
涂片、染色、镜检
挑取可疑菌落 生化反应测定
纯培养
致病性测定
血液
肉汤增
脑脊液 菌培养
（凝固酶、耐热核酸酶）
涂片染色镜检
（三）实验方法与检验流程
脓拭子
分离培养 （血平板）
直接涂片 革兰染色