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奥林巴斯显微镜:物镜的数值孔径和分辨率

奥林巴斯显微镜:物镜的数值孔径和分辨率
显微镜物镜的数值孔径是其收集光并解决细标本细节
在一个固定的物体距离的能力的量度。

图象形成光波穿过试样和在倒置锥体进入物镜,如图1这个锥形光的纵向切片显示了孔径角,是由物镜的焦距确定的值。

角μ是二分之一的数值孔径角(A),它与通过以下等式的数值孔径:数值孔径(NA) = n(sin μ)其中n是物镜的前透镜和试样玻璃盖,一个值,该范围为1.00空气1.51专门浸没油之间的成像介质的折射率。

许多作者替换变量α为μ在数值孔径方程。

从这个等式很明显,当成像介质为空气(具有折射率,n= 1.0),则数值孔径仅取决于所述角μ的最大值为90°。

角度的sin μ,因此,具有1.0(SIN(90°)= 1),这是一个透镜与空气作为所述成像介质操作的理论最大数值孔径(使用“干”显微镜物镜)的最大值。

在实践中,但是,它是很难实现的数值孔径值在0.95以上的干的物镜。

图2示出了一系列从变焦距和数值孔径的物镜衍生光锥。

作为光锥改变,角度μ从7°的增加在图2(a)至图2的(c)60°,从而增加了数值孔径从0.12至0.87,接近极限时空气是成像媒介。

通过检查数值孔径方程,很明显的是,折射率是在实现数值孔径大于1.0的限制因素。

因此,为了获得较高的工作数值孔径,物镜的前透镜和试样之间的介质的折射率必须增加。

显微镜物镜,
现已允许成像在其他媒体,如水(折射率= 1.33),甘油(折射率= 1.47),和浸油(折射率= 1.51)。

护理应与这些物镜可用于防止当一个物镜是,使用具有比它的物镜是为不同的浸没介质,这将产生不希望的伪影。

我们建议显微镜从来不使用专为油浸无论是与甘油或水的物镜,虽然有几个新的物镜,最近已经出台,将与多个介质。

您应与制造商检查是否有任何疑虑。

多数物镜在60倍和100倍(或更高版本)的放大倍率范围是设计用于浸油的使用。

通过检查上面的数值孔径方程,我们发现,最高理论数值孔径与浸油获得的是1.51(当sin(μ)= 1)。

在实践中,然而,大多数的油浸物镜的1.4的最大数值孔径,以最常用的数值孔径范围为1.0至1.35。

物镜的数值孔径也依赖,在一定程度上,在校正光学像差的量。

高度校正的物镜趋于如示于下表1中有大得多的数值孔径为各个放大倍数。

如果我们采取了一系列典型的10倍物镜作为一个例子,我们看到,平场校正的规划物镜,数值孔径增加对应校正色差和球面像差:平场消色差,NA = 0.25; 平场萤石,NA = 0.30; 并平场复消色差透镜,NA = 0.45。

物镜的数值孔径放大平场
消色差
(NA)平场
萤石
(NA)平场
复消色差透镜
(NA)0.5X0.025不适用不适用1X0.04不适用不适用2倍0.06不适用0.104倍0.100.130.2010倍0.250.300.4520倍
0.400.500.7540倍0.650.750.9540倍(油)不适用
1.301.0060X0.750.850.9560倍(油)不适用不适用
1.40100X(油)1.251.301.40150倍不适用不适用0.90。

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