_剪_碎___，然后用 胰蛋白 酶处理，这是为了使细胞分
散开来。这样做的目的是_使_ 每个细胞__能__与__培__养__液__接_.触
(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有
_葡_萄__糖__、_ 氨基酸、无机盐、维生__素_ 和动物血清 等
。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第 10 代
，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为
C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改
变
D．动物细胞培养可用于检测有毒精品物文档质和获得大量自身健康细胞
下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图
回答
(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自
__幼__龄__动__物__的_ 器官或组织、动物胚胎
。
(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是
思考讨论
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因。
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
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小结
动物细胞和组织培养（原理、材 料选择及原因、一般过程、培养条件、 主要应用）
注意： ①概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、 细胞系 ②胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 ③动物细胞培养和植物组织培养的区别
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思考与探究： 如何用细胞培养技术，为烧伤病 人植皮？
取该患者的皮肤进行 细胞培养,获得足量的细 胞后再移植
拓展---动物组织或细胞培养的难易程度
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞 分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞 肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞
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2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？
保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生 大的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适 合用于药物测试、基因表达等实验研究。 3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对
3、适宜的温度 36.5+（-）0.5度
保证细胞顺利的 生长增殖
4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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问题： 1、培养基的类型
（1）天然培养基：营养价值高，成分复杂 （2）合成培养基：成分明确，便于控制试验条件
2、动物细胞培养液的主要成分是什么？ 较植物组织培养基有何独特之处？
B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散
C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株
6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代
下去，这种传代细胞称之为（ D ）
A．原代培养 B．传代培养 C．细胞株
D．细胞系
7、动物细胞培养的正确过程是（ A ）
• 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具 有癌细胞的特点，失去接精触品文抑档 制，容易传代培养。
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细 胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞 悬浮 液
细胞株
细胞系 遗传物质改变
10代 细胞
50代 细胞
无限传 代
原代培养
传代培养
。 多数组织细胞固定在表面生长和分裂 精品文档
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附 。
细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会 停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
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细胞贴壁过程
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有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞 。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培 养。
_原_代__培__养_____. (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用_胰蛋白__酶__ 处理，然后配置成_细__胞__悬__浮__液__，再分装。 (5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部 死亡。原因是_细__胞__没__有__发__生__瘤__变__________。
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二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
葡萄糖、动 物血清
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒精品植文档株等
获得细胞 或细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素 、单克隆抗体）
• 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断
某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清等。
独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞 大都生活在液体的环境） 2、成分中有动 物血清等
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植物组织和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理 培养基性质
细胞的全能性
细胞增殖
固体培养基 液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物 激素
同植物细胞一样，分化了的精品动文档物细胞核也具有全能性．
体细胞核移植技术的应用前景 1、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 2、保护濒危物种，增加存活数量 3、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织 器官的移植
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体细胞核移植技术存在的问题：
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷， 如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏 器缺陷，免疫失调等。
概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入 一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重 组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最 终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
核移植 胚胎细胞核移植：细 恢胞 复分 全化 能程性度容低易， 体细胞核移植：受体细胞：MⅡ期的 （难度高） 卵母细胞
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培
早期胚胎
育
胚胎移植
过另一头绵羊的子宫程妊娠、出生克隆羊多利
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思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
取出的动物组织进行处理？ 胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞
间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
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进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 否
②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什
么成份？
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3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
植物体细胞杂交技术过程
原理？
植物细胞的融合
原理？
植物组织培养
植物细胞A 方法？
融合 完成
去壁
的 标志
原生质体A 原生质体B
去壁
筛选融 杂种
愈
合AB
细胞
伤
人 工 诱 导
的原生 质体
A.原代培养→传代培养→细胞株→细胞系
B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株
C.传代培养→细胞系→原代培养→细胞株
D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株
8、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ C ）
A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞
动物细胞工程
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提问：
❖ 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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动物 细胞 工程 技术
动物细胞工程 的基础
在研究方面，克隆动物基因组重新编程的机 制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸 形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这 些问题尚在研究中。 在应用上，生产克隆动物费用昂贵，距大规 模应用还有一定距离。
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通过长期的实验， 科学家们采用体细胞杂 交技术获得了“番茄— 马铃薯”植株。
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“番茄—马铃薯”理想图
动物细胞与组织培养
动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植
体细胞克隆
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一、动物细胞培养
• 概念:就是从动物机体中取出相关的组织 ,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜 的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
植物组织培养 在无菌和人工控制的条件下,将离体的植
物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培 养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。