四元低压液相色谱仪操作步骤目录一、开机步骤二、基线不稳的原因以及解决方法三、如何维护保护柱四、进样操作结束后的信息填写五、关机步骤六、故障及排除方法一、开机步骤：1、根据药典的要求配置好流动相，过滤和超声30分钟流动相。
更换好所需流动相；开电脑主机，然后开四元液相机器，待检测器稳定的时候，打开伍丰液相色谱工作站2、置换流动相排气泡其步骤如下：设置压力下限为0MPa，打开排空阀.分别把更换好的流动相通道比例设置100和流速5ml/min按“泵冲洗”，冲洗管路约5分钟左右，排出气泡；然后根据药典上的要求将流动相的比例设置好以流速5ml/min按“泵启动”，一起冲洗管路约5分钟左右，排出气泡；泵停止，关闭排空阀。
（例如:药典要求流动相：A泵为甲醇，B泵为水，比例为75:25；打开排空阀,设置压力下限为0MPa.,A泵的流量设置为100和5ml/min流速大概冲洗管路5分钟左右；B泵的流量设置为100和5ml/min流速大概冲洗管路5分钟左右；然后按照要求，将A泵流动相设置为75，B泵流动相设置为25和5ml/min 流速一起大概冲洗管路5分钟左右，排出气泡；泵停止，关排空阀。
）3、然后按照药典在色谱工作站上设置波长、所需各泵的流量，流速一般为1ml/min（例如：A泵：75，B泵：25，C和D自动为0；流量：1.000）、柱温（一般30℃-35℃）、压力下限和压力上限（一般为0.3MPa和25-42MPa），按泵启动。
4、如果药典方法需要梯度洗脱，则在上面界面的左下角时间表设置梯度流量例如：桑叶的高效流动相：以甲醇为流动相A，以0.5％磷酸溶液为流动相B （因为实验室有一个共识：A为甲醇，B为水，C为乙腈，D为含有酸、碱或缓冲盐）所以将以0.5％磷酸溶液为流动相B，改为流动相D，首先设置初始流量A：B=30：70时间（分钟）流动相A% 流动相D%0～5 5～10 10～15 15～183030→3535→4040→507070→6565→6060→50注：（1）每设置一个都要点击一下“加入”（2）此处的流量一直都是：1.000（3）0分钟的流量已在初始流量中设置，因此不需再重复设置(4)按药典梯度洗脱结束后，需设置回到初始流量比例，平衡10-15分钟。
5、在参数设置中把上限设为-5；下限设为5。
满屏时间为60分钟，然后点击伍丰液相色谱工作站右上角的“归零”健，直至基线走稳。
6、我的电脑—E盘—高效液相色谱图—新建文件夹—双击打开—再建立一个新文件夹同时标上当天做实验的日期7、在走基线的期间，打开进样器工作站，除泡，清洗取样针，待基线平稳后，设置信息，开始进样（请紧跟着以下步骤操作，详情如下）Arcus 5自动进样器操作步骤一、接好清洗液和废液管，打开电源开关。
（初次调试仪器或更换定量环后需执行此步骤，平时无需执行此步骤。
）二、打开自动进样器控制程序，电脑屏幕会出现如图一的对话框。
（图一）二、选择“测试”，出现下图的对话框。
三、选择“系统测试”，出现下图的对话框。
四、去除管路气泡，设定次数为20，选择“除泡”，系统自动开始去除管路中的气泡，请观察柱塞杆内是否有气泡，如有，继续选择“除泡”，直至柱塞杆内没有气泡。
五、选择“清洗取样针”，系统会自动开始清洗取样针。
隔二分钟后重复一次，隔二分钟后再重复一次。
选择“关闭”。
六、选择图一中的“系统”，出现如下图的对话框。
设定定量环体积。
（初次调试仪器或更换定量环后需执行此步骤，平时无需执行此步骤。
）七、选择图一中的“运行”，出现如下图的对话框。
八、选择“取样”，出现如下图对话框。
九、选择“加入”，出现如下图的对话框，编辑取样序列。
十、选择1、样品名称填写；2取样方式：部分定量环取样；3、清洗方式：取样前清洗（每针之间）（这个清洗模式是不规定的）；4、设置起始位置、终止位置：看你的瓶子放在哪个位置，选择哪个起始和终止位置；5、取样速度：一般选择2；6、置换量（默认为70微升）；7、取样量（按照药典的要求）；8、扎针深度：一般选择2，数字越小代表扎针的深度越深；9、取样次数（试针的时候一般的次数为1）；10、清洗次数：一般选择2次；11、间隔时间：一般选择30分钟为基础，若30分钟还没有出峰，那就不要急着试走下一针，继续等，看后面是否有峰出来，若有，继续走多一针，这次设置的间隔时间为出峰后多10分钟左右，让基线走平稳；12、样品瓶缺失：忽略空缺；13、取样针故障：故障报警。
选择“确认”。
备注：1、扎针深度可选择２～４mm，数字越小，针扎得越下。
当选择4mm时，2毫升样品瓶中样品量低于0.5毫升时即无法进样。
2、如需进行重复性试验，建议将样品瓶瓶盖稍稍旋松，或者不放盖垫。
同时将扎针深度选择２mm。
基线是否稳定，主要是看仪器状态是否稳定一、基线不稳的原因以及解决方法：1、压力过高（解决方法详情请看注意事项一）2、压力过低（解决方法详情请看注意事项二）3、压力波动：单向阀的闭塞或是密封圈的损坏（解决方法详情请看注意事项三）（先关氘灯）（建议：最好在需要关灯时间4小时以上才关灯，因为频繁的开关灯，同样会缩短灯的使用寿命）。
注意事项一：（压力过高）1、以纯甲醇流量1ml/min的流速分别来记录压力数据：先接保护柱（小于1MPa）检查和记录压力数据，然后接色谱柱（6-7MPa）检查和记录压力数据，最后检查紫外检测器（0MPa）和记录压力数据看哪一个数据较高，通过数据来判断哪个的压力过高，就说明哪个部分堵住了。
注：若流动相不是纯甲醇，则压力也不一样。
注意事项二：（压力过低）1、检查排空阀是否已经拧紧2、检查各连接管线是否有漏液3、高压恒流泵是否启动，以及废液口是否有液体流出来注意事项三：（压力波动）（详情请看：单向阀拆下的步骤）（一）、单向阀的堵塞1、若压力上下跳动：跳动的间隔大于0.1，旧机械的跳动间隔大于0.2才算是不正常的压力跳动；先拧开连接保护柱一端的PK输液管，以流速5ml/min输液观察是否有连续的液体流出。
2、单向阀分为吸入单向阀和排出单向阀（泵体上面的是输出阀），两种绝对不能调换；最好先拆卸吸入单向阀检查（故障一般出在吸入单向阀上）；3、单向阀拆卸下来后，需放入干净的器皿内（如干净的烧杯或培养皿等），防止接头沾污或灰尘进入管道；4、如果液体断续流出，则泵的某一个输入单向阀堵塞了，先用流动相（一般用甲醇）流速5ml/min，开排空阀走2-3分钟，然后关掉排空阀，观察始端的输液管2-3分钟，是否有连续液体流出，若连续，则通5、用烧杯装一些干净的纯净水，拆下输入单向阀的时候，先松开连接单向阀的两端，拆开连接单向阀的那端，然后拆下单向阀，用输液器连接单向阀装水往单向阀打进去，打的时候，要用手指两边轻轻托住一端，避免用力过度，将里面的配件打出去，要是打得出液体，则说明是通的6、用烧杯装一些干净的纯净水，拆下输出单向阀的时候，先松开连接单向阀的两端，拆开连接单向阀的那端，然后拆下单向阀放进装有干净纯净水的烧杯里，用输液器连接单向阀往单向阀抽水上来，抽的时候，要是液体抽得上来；以及往下打空气，若没有气泡跑出来，则说明是通的7、若是都不通，则拆下单向阀超声清洗1-2分钟，接着步骤5和步骤6的“用输液器连接单向阀”这步骤开始测试。
单向阀拆下的步骤单向阀拆下的步骤一、LC-P100正面各部件示意图二、用扳手卸下吸入阀接头连接的Φ1.6mm 不锈钢管，再按下图所示拆下吸入单向阀。
注射器如何与单向阀连接图将注射器连接件的另一端连接一支注射器。
注射器中装有一定体积的蒸馏水溶液，一只手握住阀体端面，另一只手推注射器活塞杆，使注射器里面的液体能够快速流出；注意事项：（1）处理完毕后，按照原样安装好，先装单向阀（注意旋紧），再装管线。
安装步骤与拆卸步骤刚好相反。
（2）所有接头需要先用手旋动2～3圈以上，再用扳手旋。
绝对禁止在镙纹未对好的情况下用扳手直接旋，这样容易把镙纹弄花，造成管路不密封。
（3）旋镙帽时，以旋紧不漏液为原则。
避免因过大的力造成镙帽断裂在单向阀内。
（二）密封圈的损坏检查步骤：将泵的输出口用密闭头密闭，然后用0.2ml/min的流速测试观察压力是否有缓慢上升，（在上升的过程中，如果压力出现上升一下，停一下，缓一下，降一下，则说明其中有单项阀可能反向耐压不好。
若单项阀是新的则可能是密封圈不密闭，密封圈损坏）当上升到20MPa时，停止泵，观察压力下降的速度（若是仪器正常，则压力不会下降得很快）。
三、如何维护保护柱（建议每周一次进行维护保护柱）1、在柱套上做好标记，确认保护柱芯的正反方向；取下保护柱，在不打开卡套的前提下将保护柱反接（注意此时不能接色谱柱），用甲醇：水＝10：90 以1.2ml/min流速冲洗30min，然后再用纯甲醇以1.2ml/min流速冲洗30-60min；2、冲洗好后将保护柱正接，打开泵除去保护柱和连接管内的空气，再连接好色谱柱，象往常一样使用。
保护柱使用时的注意事项1、新的保护柱柱芯在首次使用时，先接好保护柱（保护柱的出口端不与色谱柱相连），用纯甲醇以1ml/min的流速冲洗20至30分钟，以除出保护柱和柱芯内的空气，并使柱芯内的填料充分润湿。
2、旋紧保护柱柱套时，一端用1/4英寸的扳手、另一端使用1/2英寸的扳手（或14号的扳手也可），一般先直接用手旋至旋不动后（约需要转动3至4圈），再用扳手稍微旋转一下（一般旋转1/8圈至1/4圈即可），以不漏液为原则。
特别注意：柱套一定要对正镙纹后再旋，如果镙纹没有对正，用扳手用力旋紧会弄花镙纹，影响密封性，严重时会使保护柱柱套报废。
四、进样操作结束后的信息填写1、文件—后处理—文件—打开—找到自己设置好的药品文件夹—打开所需图谱（一般当完成一针，图谱会自动弹出，这时，如果所出的峰型是正常的（即起点和终点在同一水平线上，没有双头峰、平峰等））和理论塔板数是符合药典要求的，可视为有效峰。
注：峰型若不是很美观，可以选择修改：右击——手工积分——手工基线——从峰的起点到峰的末端，需在同一水平线上。
2、设置样品信息：（1）单位名称：化州市华聪药业有限公司中药饮片厂（2）分析人员（3）样品来源：中国食品药品检验研究所（4）样品批号：（对照品：瓶子上的批号；供试品：当批的批号）（5）处理状态：不填（6）备注：填写压力**MPa（7）色谱柱：C18（8）柱长：250（9）柱温：根据药典上的要求，要是没有一般都是30℃-35℃（10）波长：根据药典要求（11）流动相：根据药典要求（12）流量：1.000ml/min ——点击“自动合成报告头”——保存——保存在所建立的药品文件夹内——写上文件名：供试品报头/对照品报头——保存3、峰详细资料：点击有效峰的空白处，会有一个组份的图框出来，填写组份名：即填写对照品名称——点击确认即可。