抗原+抗体
结合补体
抗原+抗体+补体
补体活化，形成MAC
靶细胞裂解
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据定量溶血分光光度计法体外检测 细胞产生抗体的能力
( QHS——Quantitative Hemolytic Spectrophotometric determination )
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结合抗原之前
结合抗原之后
Fc段
CH1
C1q 结合
CH2
位点被屏
障
IgM CH3区，IgG CH2区
暴露的 C1q结 合位点
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3. 方法：
1ml
Hank’s
脾细胞
2）抗原-抗体-补体反应：
加1ml SRBC 溶液 加1ml补体
彻底混匀
37℃孵育1h 离心，3000rpm，5min
分光光度计检测上清液 413nm波长下的吸光值
2. 材料：
SRBC免疫小鼠 新鲜SRBC溶液 (1.5×108/ml) 经SRBC吸收的补体溶液
来自豚鼠血清 经SRBC吸收去除非特异性抗体
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本断人颈处删死除S。RBC免疫的小鼠
3. 方法：
取脾，以Hank’s 液漂洗 经200钼铜网，以针拴研磨脾脏成单细胞悬液
1） 制备脾细胞
收集细胞悬液，加适量Hank’s 洗涤
离心1500rpm, 5min 弃上清
细胞沉淀中加入4.5ml蒸馏水，用力混匀 40s 迅速加入0.5ml 9%NaCl 离心 1500rpm, 5min 弃上清，加入1.2ml Hank’s溶液
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1. 原理： 处，请联系网站或本人删除。
抗原
脾脏
IgM
SRBC
免疫小鼠
4 days later
+ SRBC 补体
浆细胞
分光光度计 定量分析
Hb
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4. 注意事项：
新鲜SRBC溶液，用前晃匀 保持脾细胞活性
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Test 2 第三次免疫
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2. 方法:
处，请联系网站或本人删除。
脱纤维绵羊红细胞（SRBC）
加入3ml 生理盐水，混匀 2000rpm, 离心，5min
弃上清 加入3ml 生理盐水，混匀
2000rpm, 离心，5min
弃上清
制备绵羊红细胞溶液20%、 25%、30%、40%
取0.1ml 皮下注射 免疫小鼠
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Complementbinding site
3. 方法： 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
WBC
1mm WBC 1mm
WBC
WBC
细胞浓度/ml = 4个大方格中的细胞总数/4 x 104
RBC
细胞浓度/ml = 5个中方格中的细胞总数 x 5 x 104
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