一、动物细胞培养
1、概念： 动物细胞培养就是从动物机体内 取出相关的组织，将它分散成单 个细胞，然后，放在适宜的培养 基中，让这些细胞生长和增殖。
2、过程
取动物器官 和组织 幼龄动物 剪碎组织
胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞 细胞 物的组织、器官 剪碎 制成 悬浮 液 去掉组织 细胞增殖能力强 间蛋白
保证细胞顺利的 生长增殖
4、必要的气体条件 O 和CO （95%空气和5% CO ） 2 2 2
维持培养液的PH
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
培养基性质 培养基特有成分
细胞的全能性
细胞增殖
固体培养基
蔗糖、植物 激素 植株 快速繁殖、培育 无病毒植株等
液体培养基
有关概念
细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞 生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存 活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现 细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物 质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代， 这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗 传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑 制，容易传代培养。
高二生物教研组
2007.03.28
学习目标：
【知识能力】
1、动物细胞培养的过程、条件及应用
2、应用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础
【情感态度与价值观】
1、讨论细胞工程技术的社会意义 2、认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系
思考：
植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养、 植物体细胞杂交
加培养液
无限传代
细胞系 细胞株
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
如何界定原代培养和传代培养；细 胞株和细胞系？
随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖
细胞株
遗传物质未改变
细胞系遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
原代培养
50代 细胞
传代培养
无限传 代
多数组织细胞固定在表面 生长和分裂。
有关概念
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内 的细胞称为原代细胞培养。 • 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。
葡萄糖、动物 血清
培养结果
培养目的细胞株Leabharlann 细胞系获得细胞或 细胞产物
4、应用
• 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体） • 作为基因工程中的受体细胞 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒物 质，判断某种物质的毒性 • 用于生理、病理、药理等方面的研究， 为治疗和预防疾病提供理论依据
１０、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼 龄动物的组织或器官，请解释原因？ 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛
探究
11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂 就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培 养，让细胞继续增殖。
问题讨论:
烧伤病人的治疗通常是取 烧伤病人的健康皮肤进行 自体移植，但对于大面积 烧伤病人来讲，健康皮肤 很有限，请同学们想一想 如何来治疗该病人？
取该患者的皮肤进行细胞培养,获得 足量的细胞后再移植
探究
1、植物组织培养过程要将组织分散成单个细胞吗？ 没有 ２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞吗？ 是 ３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 ４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 ５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质 是什么成份？ 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质
探究
６、细胞膜的主要成份是什么？
７、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 蛋白质和磷脂 能 ８、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散 成单个细胞要注意什么问题呢？ 注意时间的控制 ９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？
不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白 酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。
小结
一、动物细胞培养
1、概念
2、过程
3、条件 4、应用
动物细胞培养液的主要成分：
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
动物体细胞大都生 活在液体的环境
（1）液体培养基 与植物培养基相比其特点 （2）含有动物血清
这样的过程叫做传代培养
探究
14、如何理解原代培养和传代培养？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养， 之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 15、传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 不都能 16、有些为何能一直传下去吗？ 发生突变，朝着癌细胞方向发展 17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 不是 18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞，因为10－50代部分细胞的细胞核 型可能发生变化，有少部分遗传物质发生改变，发生突 变向癌细胞方向发展。
探究：
多细胞动物和人体的细胞都生活 在内环境中，根据你所学的知识， 认为体外培养细胞应该模拟内环 境的哪些内容呢？
3、条件：
1、无菌、无毒 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、全部的营养物质
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
3、适宜的温度和PH值
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体
强调： 动物细胞培养技术是其他动物细
胞工程技术的基础。
补充： 动物细胞培养发展历史
20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞 的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的 其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开 了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森 (Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它 放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织 存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。 哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而 且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学 家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发 展成为动物细胞培养。