ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ
Ａｐｒ，２０１６，Ｖ０１．３７，Ｎｏ．８
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于５号染色体左臂的ＥＲＧｌｌ基因可有两个拷贝甚至整条染 色体发生了复制”…。其次，调控ＥＲＧｌｌ基因表达的Ｕｐｃ２ｐ 转录因子表达量也有所升高，敲除白色念珠菌的ＵＰＣ２基 因，该菌对唑类药物的敏感性增加¨…：其他唑类耐药株如 近平滑念珠菌、热带念珠菌及克柔念珠茵，ＥＲＧｌｌ基因表达 量也有所升高“２ｉ。但目前仍不清楚这些菌株ＥＲＧｌｌ基因高 调的机制及其与耐药性的关系。烟曲霉唑类耐药株Ｃｙｐ５１Ａ 蛋白（与Ｅｒｇｌｌ同源）含量也有所增加，与ＨａｐＥ转录因子 （可结合ｃ，声，４基因的ＣＣＡＡＴ序列）发生了Ｐ８８Ｌ置换密切
麦角固醇合成酶过度表达临床分离的对唑类耐药的白
色念珠菌ＥＲＧＩＩ基因常出现过度表达．引起编码产物１４ａ一去 甲基化酶升高，相应地需要更高的唑类药物浓度才能抑制该 酶的活性，从而降低了茵株对唑类药物的敏感性。多种机制 参与了白色念珠菌唑类耐药株ＥＲＧｌｌ基因高调：首先，存在
万方数据
广东医学２０１６年４月第３７卷第８期
［２８］Ｇｉｕｎｔａ
Ｓ，Ｂｅｌｏｔｓｅｒｋｏｖｓｋａｙａ
ｔｏ
ｐｅｎｄｅｎｔ ＣＣＮＥＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｉｓ
ｌｉｎｇ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｅｌｌ
ｄｏｕｂｌｅ—ｓｔｒａｎｄ ｂｒｅａｋｓ ｄｕｒｉｎｇ
ｍｉｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ
ｇａｉｎ
Ｂｉｏｌ，２０１０，１９０（２）：１９７～２０７．
１．１
麦角固醇合成酶基因ＥＲＧｌｌ（ｃｙｐ５１Ａ）突变
研究发
现，念殊菌对唑类药物的耐药常与药靶麦角固醇合成酶 Ｅｒｇｌｌ基因突变有关；念珠菌唑类耐药茵存在１４０种ＥＲＧｌｌ 基因突变，分别引起麦角固醇合成酶发生氨基酸置换，引起 菌株对唑类药物耐药，并均有累加效应。白色念珠菌中，麦 角固醇合成酶Ｅｒｇｌｌ靠近亚铁血红素位点的Ｒ４６７Ｋ和 Ｇ４６４Ｓ突变．使此酶与唑类药物的亲和力大大下降，导致该 茵对唑类药物耐药。４’。另外，新型隐球菌耐药株ＥＲＧｌｌ基 因Ｙ１４５Ｆ和Ｇ４８４Ｓ突变，也与唑类耐药密切相关ｐ ｏ。目前 发现，烟曲霉唑类耐药株也存在麦角固醇合成酶基因ｃｙｐ５１Ａ 突变，其中ｃｙｐ５１Ａ第５４位密码子和第２２０位密码子改变最 为常见。这两种突变会使ｃｙｐ５ｌＡ靠近亚铁血红素位点的氨 基酸改变，导致Ｃｙｐ５１Ａ蛋白酶的空间构型发生变化，严重削 弱了该酶与唑类药物的亲和力，参与烟曲霉多重耐药悖』。迄 今，烟曲霉所有的ｃｙｐ５１Ａ位点突变均参与该茵对伊曲康唑 的耐药性，但对伏立康唑和泊沙康唑的耐药性则只依赖于 ｃ？ｐ５１Ａ特定位点改变…Ｊ：另外，在一些无唑类药物治疗史的 烟曲霉感染患者体内，也存在烟曲霉唑类耐药茵，说明这是 在环境中产生的，与农业中唑类药物的大量使用有关。研究 发现，这类环境耐药株的ｃｙｐ５１Ａ基因存在Ｌ９８Ａ突变，并且 启动子中插入了３４碱基串联序列ＴＲ。８】。另外，这类耐药株 还可与敏感菌株异位杂交，说明此耐药性可通过有性生殖进
３生物被膜形成
生物被膜形成是近年来与真菌耐药相关的一个新发现， 目前认为生物被膜引起的真菌耐药是临床上许多系统性感 染难以根除的重要因素。真菌可在体内植入的人工器官或 导管以及多种生物表面形成生物被膜，将自身包裹其中，造 成患者感染，相比其他酵母茵和丝状真菌，念珠茵最常见。 生物被膜是一种由融合的芽生抱子层、茵丝成分和细胞外多 聚基质三部分组成的三维结构。形成生物被膜的念珠菌对 唑类药物敏感性大大下降，耐药机制可能与下列因素有关： （１）高度表达药物外排转运蛋白，促进药物外排；（２）细胞外 聚合物基质形成生物膜屏障，阻止药物进入生物膜内层细 胞‘２…。与白色念珠茵游离细胞一致，生物被膜细胞中编码 外排转运蛋白的ＣＤＲ和ＭＤＲ基因也出现了高调，引起唑类 药物大量外排忙“。相比而言，细胞外聚合物基质形成的生 物膜屏障可能是菌株出现多重耐药的主要因素。Ｂ一１，３一 葡聚糖是生物膜的主要组成部分，由位于细胞膜中的Ｂ一１， ３一葡聚糖合成酶催化合成。酵母中Ｂ一１，３一葡聚糖的合 成及生物膜基质的产生均受ＰＫＣ信号通路下游蛋白Ｓｍｉｌ、 Ｒｌｍｌ、Ｒｈｏｌ和Ｆｓｋｌ的调控’２…。细胞内其他蛋白如转录因 子Ｚａｐｌ、乙醇脱氢酶（Ａｄｈ５、Ｃｓｈｌ和Ｉｆｄ６）和葡糖淀粉酶 （ＣａＧｃａｌ和ＣａＧｃａ２）也参与了生物膜基质的生成‘２４１。以上 研究表明病原真菌生物被膜的形成是真菌产生耐药性的重 要因素之一。
Ｍｏｌ
ｍａ［Ｊ］．ＩｎｌＪ ［３１］Ｓｍｉｔｈ
Ｓｃｉ，２０１４，１５（１０）：１８１４８—１８１６１． ＮＪ，ｅｔ ａ１．２０ｑ１１．１ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ＬＴ，Ｍａｙｅｒｓｏｎ Ｊ，Ｎｏｗａｋ
（收稿日期：２０１５—１０—０９编辑：罗劲娜）
唑类抗真菌药物耐药机制的研究进展
刘潇，龙腾腾，郭春丽
（１２ＴＭＤ）和ＤＨＡ２家族即药物：Ｈ＋逆向转运子（１４ ＴＭＤ）。 白色念珠茵有９５种ＭＦＳ蛋白，但只有ＭＤＲｌＰ蛋白（属 ＤＨＡｌ家族）参与唑类耐药。白色念珠菌中ＭＤＲｌ基因高表 达．可促进胞内多种唑类药物外排，引起菌株对多种唑类药 物的广泛耐受性，相比而言，在裂殖酵母中高表达白色念珠 菌的ＭＤＲｌ，只表现出对氟康唑的耐药性”…。烟曲霉伊曲康 唑耐药株中，编码ＭＦＳ转运蛋白的ａｆｕＭＯｎ３基因表达量也 出现了明显上调。２０ Ｊ。以上研究说明，药物外排转运蛋白在 真菌对唑类药物耐药的形成过程中也发挥了一定作用。
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８’７ｌ一８７９．
广东医学２０１６年４月第３７卷第８期
ｉｎ ＳＰ．Ｇｉｖｅ
ｍｅ
ａ
ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ
Ａｐｒ．２０１６，Ｖ０１．３７，Ｎｏ．８
ｇｉａｎｔ—ｃｅｌｌ ｔｕｍｏｒ ｏｆ ｂｏｎｅ：Ａｒｒａｙ ＣＧＨ，ＦＩＳＨ，ａｎｄ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ
［２７］Ｇｉｕｎｔａ Ｓ，Ｊａｃｋｓｏｎ
山东省青岛市青岛黄海学院（２６６４２７） 近年来，随着免疫抑制治疗、化疗、实体器官移植的增 加，病原真菌的感染率呈急剧上升趋势。对人类有致病作用 的真菌主要有念殊茵、新型隐球菌和曲霉菌等，可引起念珠 茵阴道炎、新型隐球茵病、侵袭性曲霉病等各种真菌感染。１１。 抗真菌药物特别是唑类药物如氟康唑和伊曲康唑的问世，开 辟了真菌病药物治疗的新时代。但目前用于临床的抗真菌 药物比较有限，主要包括：（１）唑类：抑制真菌细胞膜的麦角 固醇合成，如氟康唑、伏立康唑及泊沙康唑，具有广谱的抗真 菌活性且毒性小，是目前应用最广的抗真菌药物；（２）多烯 类：与麦角固醇结合，在细胞膜上形成水性孔道，引起膜通透 性增加，如两性霉素Ｂ，但不良反应大，尤其是严重的肾毒性 限制了其应用范围；（３）氟胞嘧啶类：抑制胸苷酸合成酶干 扰真菌ＤＮＡ的合成，如５一氟胞嘧啶；（４）棘白霉素类：抑制 真菌细胞壁的主要组分Ｂ一１，３一葡聚糖合成，如卡泊芬净、 阿尼芬净及米卡芬净‘２ Ｊ。随着抗真菌药物的广泛应用，真菌 耐药问题日趋严重，尤其对唑类药物耐药更为突出，给抗真 菌治疗带来了严峻的挑战。临床耐药导致的真菌感染治疗 失败已不容忽视，探讨其耐药机制对于预防耐药性的发生及 寻找更有效的抗真菌药物具有重要意义，本文从遗传学方面 就真菌对唑类药物的耐药机制分述如下。 甲基过程，抑制麦角固醇的合成¨Ｊ。但随着唑类药物的广泛 应用，真菌对唑类药物的耐药问题日趋严重，其耐药机制与 药靶麦角固醇合成酶Ｅｒｇｌｌ（Ｃｙｐ５ｌＡ）改变密切相关。
２药物外排增加
很多生物通过膜结合的外排转运蛋白将有害物质主动泵 出，以减少胞内积聚量，从而对毒性物质产生耐受。目前已知 的与唑类耐药相关的真菌外排转运蛋白，主要包括ＡＴＰ一结 合盒（ＡＢＣ）转运蛋白和主要易化子超家族（ＭＦＳ）两大类。
２．１
ＡＢＣ转运蛋白
ＡＢＣ转运蛋白是ＡＴＰ能量依赖性的
外排泵转运蛋白，由两个相同的亚单位聚合而成，每个亚单 位各含有１个高度疏水的跨膜结构域（ＴＭＤ）和１个催化 ＡＴＰ水解的核苷酸结合域（ＮＢＤ）。对病原真菌基因序列进 行分析，发现存在多个不同拓扑结构的ＡＢＣ转运蛋白。其 中，白色念珠菌至少含有２８种，光滑念珠茵可能存在１８种， 烟曲霉和新型隐球菌的种类更多。１５ｊ。这些ＡＢＣ转运蛋白 中，有３大家族参与药物外排，分别是多药耐药家族 （ＭＤＲ）、多药耐药相关蛋白家族（ＭＲＰ）以及多效性耐药家 族（ＰＤＲ）；以下主要对多效性耐药家族（ＰＤＲ）进行阐述。白 念珠菌中，多效性耐药家族（ＰＤＲ）包括ＣＤＲＩ、ＣＤＲ２及其他 ＰＤＲ型转运蛋白，均参与白色念珠菌对唑类药物的耐药。研 究发现，白色念珠茵中ＣＤＲＩ和ＣＤＲ２高表达可引起药物外 排增强，胞内唑类药物积累量减少，进而药效作用减弱¨…。 另外，白色念珠茵中ＣＤＲ３、ＣＤＲ４、ＣＤＲｌｌ、ＳＮＱ２这些基因虽 与ＣＤＲＩ和ＣＤＲ２同源，但至今仍未发现它们与耐药的相关 性。光滑念珠菌与唑类耐药相关的ＡＢＣ转运蛋白为 ＣｇＣｄｒｌ、ＣｇＣｄｒ２和ＣｇＳｎｑ２，新生隐球菌中为Ｍｒｌ蛋白…。。 实验室诱导突变或临床分离的烟曲霉伊曲康唑耐药株，胞内 的伊曲康唑积累量也大大下降，这与编码ＡＢＣ转运蛋白的
９５７—９６６．
ｅｖｅｎｔｓ［】］．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ，２０１１，１０（８）：１２１５～１２２１．
Ｒ，Ｊａｃｋｓｏｎ ＳＰ．ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ ｓｉｇｎａ—
［３２］Ｅｔｅｍａｄｍｏｇｈａｄａｍ
Ｄ，Ｇｅｏｒｇｅ Ｊ，Ｃｏｗｉｎ ＰＡ，ｅｔ ａ１．Ａｍｐｌｉｅｏｎ—ｄｅ— ｉｓ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ２０ｑｌ １ ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｃｏｌｏｎ ２０１３，１１：３１３．
ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｊ
ａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏ］ｉｆｅｒａｔｉｏｎ，Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ａｎｄ Ｄｉｇ Ｄｉｓ
ＥＭＴ［Ｊ］
Ｓｃｉ，２０１５，６０（８）：２３６０—２３７２．
［３０］Ｈｕａｎｇ Ｙ，Ｇｕｏ Ｗ，Ｋａｎ