１２ ２ ２ ２ ２ ，Ｘ ， Ｚ ＨＡＮＧ Ｗ ｅ ｉ ｈ ｏ ｎ ＨＡＮＧ Ｘ ｉ ｃ ｈ ｅ ｎ Ｉ ＮＧ Ｓ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ Ｉ Ｚ ｅ ｚ ｈ ｏ ｎ ＯＮＧ Ｐ ｅ ｎ ｔ ａ ｏ － － － － － ｇ ，Ｚ ｙ ｇ ，Ｌ ｇ ，Ｇ ｇ ２ ２ １ ，ＹＡＮＧ ，Ｎ Ｌ Ｉ Ｊ ｉ ａ ｎ ｈ ｕ ａ ＹＵ Ｉ Ｊ ｉ ｎ ｓ ｏ ｎ － － ｇ ，
（ 吉林大学白求恩医学院 病理生物学教育部重点实验室 ， 吉林 长春 １ １． ３ ０ ０ ２ １； ） ２．吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室 ， 吉林 长春 １ ３ ０ ０ ６ ２
［ 摘 要］ 重组质粒对人乳腺癌细胞 Ｓ ７ 基 因 过 表 达 和 ＤＨＲ Ｓ ７特异性短发夹 Ｒ ＮＡ（ ｓ ｈ Ｒ ＮＡ） 目 的 ： 探 究 ＤＨＲ ＭＣ Ｆ ７ 细胞周 期 的 影 响 及 ＤＨＲ Ｓ ７ 与 乳 腺 癌 浸 润 癌 的 关 系 ， 阐 明 ＤＨＲ Ｓ ７ 在 乳 腺 癌 发 生、 发 展 中 的 作 用。 － 方法 ： 利用 Ｒ 质 粒 中， 构 建 ｐ Ｔ－Ｐ Ｃ Ｒ 技术将 ＤＨＲ Ｓ ７基 因 全 长 克 隆 入 真 核 表 达 载 体 ｐ ｃ Ｄ ＮＡ ３ ． １（＋ ） ｃ Ｄ ＮＡ ３ ． １ － 、空 白 对 照 组 和 ＤＨＲ Ｓ ７ 重组真核 表 达 质 粒 。 实 验 分 为 ｐ ｃ Ｄ ＮＡ ３ ． １ Ｓ ７ 组、 阴 性 对 照 组 （ ｃ Ｄ ＮＡ ３ ． １ 组） －ＤＨＲ ｐ ＤＨＲ Ｓ ７ ｓ ｈ Ｒ ＮＡ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｌ组 ， 用 Ｆ ｕ ｅ ｎ ｅ ＨＤ 转 染 试 剂 将 各 种 质 粒 转 染 ＭＣ Ｆ ７ 细 胞，采 用 Ｒ Ｔ－Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｗ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ － － － ｐ ｇ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ Ｆ ７ 细胞中 ＤＨＲ Ｓ ７ 的表达情况 ， 流式细 胞 术 分 析 细 胞 周 期 变 化 ， 免 疫 组 织 化 学 Ｓ Ｐ法检 － ｇ 法检测各组 ＭＣ 测乳腺原位癌和乳腺 浸 润 癌 组 织 中 ＤＨＲ Ｓ ７ 蛋 白 的 表 达 情 况。 结 果： 成 功 构 建 ｐ ｃ Ｄ ＮＡ ３ ． １ Ｓ ７重组表达质 －ＤＨＲ ，ＤＨＲ 粒 。Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｗ ｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ Ｓ ７组蛋白的表达量高于空白对照组（ Ｐ＜０ ． ０ ５） Ｓ ７ ｃ Ｒ ＮＡ－ＤＨＲ － ｇ 结果显示 ，ｐ 。 流 式 细 胞 术 显 示 ，ＤＨＲ ｓ ｈ Ｒ ＮＡ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｉ ｌ组蛋白的表达量低于空白对照组 ， 差异 均 有 统 计 学 意 义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５） Ｓ ７ －ｐ ） ，ＤＨＲ ） 。 免疫 表 达上调使 ＭＣ Ｆ ７ 细胞 Ｓ 期细胞增多 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ Ｓ ７ 的表达下调使处于 Ｇ Ｐ＜０ ． ０ ５ － ２ 期的细胞增多 （ ／ ） ； 在乳腺浸润癌 的 表 达 明 显 降 组织化学染色显示 ，ＤＨＲ Ｓ ７ 蛋白在原位癌中高表达 ， 阳性表达率为 １ ０ ０％ （ ３ ７ ３ ７ ／ ） ， 两者比较差异有统计学意义 （ ） 。 结论 ：ＤＨＲ 低 ， 阳性率为 １ ８ ． ９％ （ ７ ３ ７ Ｐ＜０ ． ０ １ Ｓ ７ 基因参与了 ＭＣ Ｆ ７ 细胞细 － 胞周期的调控过程 ， 可以抑制细胞增殖 ，ＤＨＲ Ｓ ７ 蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润 。 ［ 关键词 ］ Ｓ ７ 基因 ； 过表达 ； 干扰 ； 细胞周期 ；乳腺肿瘤 ； ＭＣ Ｆ ７ 细胞 ＤＨＲ － ［ 中图分类号 ］ 文献标志码 ］ ７ ３ ７ ． ９ ［ Ｒ Ａ
Ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｄ Ｈ Ｒ Ｓ ７ｏ ｎ ｃ ｅ ｌ ｌ ｃ ｃ ｌ ｅ ｏ ｆ ｈ ｕ ｍ ａ ｎ ｂ ｒ ｅ ａ ｓ ｔ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ＭＣ Ｆ ７ － ｙ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｎ ｄ ｉ ｔ ｓ ｅ ｘ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｂ ｒ ｅ ａ ｓ ｔ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｐ
（ ，Ｍ ，Ｎ ，Ｊ １． Ｋ ｅ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｏ ｆ Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｏ ｆ Ｅ ｄ ｕ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ Ｂ ｅ ｔ ｈ ｕ ｎ ｅ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｅ ｏ ｆ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ｉ ｌ ｉ ｎ ｙ ｙ ｇ ｙ ｙ ｇ ， ； ，Ｓ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ Ｃ ｈ ａ ｎ ｃ ｈ ｕ ｎ １ ３ ０ ０ ２ １，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ ． Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｏ ｆ Ｐ ａ ｒ ａ ｓ ｉ ｔ ｉ ｃ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｚ ｏ ｏ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｃ ｓ ａ ｎ ｄ ｇ ｙ ｙ ，Ｊ ，Ｃ ） Ｖ ｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｈ ａ ｎ ｃ ｈ ｕ ｎ １ ３ ０ ０ ６ ２，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｙ ｙ ｇ
５ ３ ７） 文章编号 ］ ６ Nhomakorabea７ １ ５ ８ ７ ２ ０ １ ２ ０ ３ ０ ５ ３ ７ ０ ６ ［ １ － Ⅹ（ － －
Ｄ Ｈ Ｒ Ｓ ７ 对人乳腺癌细胞 ＭＣ Ｆ ７ 细胞周期的影响 － 及其在乳腺癌组织中的表达
２ ， 张西臣２ ， 邢沈阳２ ， 李泽中２ ， 宫鹏涛２ ， 李建华２ ， 杨 举２ ， 倪劲松１ 张伟红１，
第３ ８卷 第３期 ２ ０ １ ２年５月
吉 林 大 学 学 报 （医 学 版 ） ） Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｙ（
Ｖ ｏ ｌ ． ３ ８ Ｎ ｏ ． ３ Ｍ ａ ０ １ ２ ２ ｙ