NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。 测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
关键词：蔬菜; 硝酸盐; 紫外分光光度法 前言：蔬菜( 尤其叶菜类) 是一种容易累积硝酸盐的作物，硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用,而且有些蔬菜生产者采用工业废水和 生活污水浇地,造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高,已证明,硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐,它可与人体血红蛋白 作用, 使之失去载氧功能,造成高铁血红蛋白症, 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害[ 1]。因此,蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标[ 2]。 蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多，如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法, 但由于干扰因素多，操作步骤过于繁琐，很难满足批量 常规分析之需要，而其它几种方法则需要精密仪器， 测定条件较为 严格，不适宜作常规监测分析[3]。本实验采用操作简单、准确度高 的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
0.2664
0.8943
0.5871
1.9639
小瓜
0.3476
0.4843 1.1653
1.6211 354.91
0.5182
1.7342
0.2270
0.7631
土豆
0.1497
0.1495 0.5052
0.6546 68.43
0.2068
0.6956
0.1715
0.5780
黄瓜
0.2531
0.2198 0.8502
吸光度太高，可用蒸馏水稀释 5~10 倍后再测（空白同样稀释） [4]。
3 结果与分析： 六种蔬菜的吸光度（A）和硝酸盐浓度(C)
表一 测
种定 类
吸光度 （A）
0.0891
平均值
NO3ˉ浓度 /ug·mL-1
平均值
硝酸根含量 （mg/kg）
0.3031
京白菜
0.3775
0.2443 1.2650
0.8208 146.16
2 实验方法 2.1 标准曲线的绘制
依次配制 NO 浓度为 0.4ug/ml, 0.8ug/ml, 1.2ug/ml, 1.6ug/ml, 2.0ug/ml, 2.4ug/ml，2.8ug/ml 的溶液，以重蒸馏水做空白，用 石英比色皿在 219nm 处测定吸光度（A）。以标准溶液浓度为横 坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 如图 2, 得回归方程为 A = 0 . 00919 +0 . 0596C,相关系数 r = 0 . 9996( n = 5)。
蔬菜中硝酸盐含量的测定
摘要:基于硝酸根在 219 nm 处有强烈吸收,且干扰少, 测定提取 液的吸光度，从标准曲线上查得相应浓度。提取液用 pH=9.6-9.7 的 氨缓冲液，从待测样品中提取硝酸根离子。此法测定的结果表明回 收率在 95.1%-100.9%之间,相对标准偏差为 1.55%-4.14%。操作方法 简便, 适用于蔬菜中的硝酸盐含经自来水、去离子水洗净,用滤纸擦干后选取有代表 性的可食部分,将其切碎、混匀, 并于研钵中捣碎,处理后放入 烧杯中。 2.1.2 样品测定 准确称取蔬菜样品 0.5100g，放入研钵中加入少量蒸馏水， 研磨成匀浆，用 30ml 蒸馏水将研磨好的匀浆冲入 100ml 容量 瓶中，同时用蒸馏水 30ml 放入另一 100ml 容量瓶中做空白校 正，两瓶分别加 5ml 氨缓冲液（pH=9.6）,30ml 蒸馏水，0.5g 粉末状活性炭，摇动均匀，静置 20min，加入蛋白质沉淀剂溶 液Ⅰ1ml 和蛋白质沉淀剂Ⅱ2ml,充分混合，用蒸馏水定容到 100ml（V），摇匀，放置 5~10min，定量滤纸过滤；取滤液用 石英比色皿在紫外分光光度计 219nm 处测定吸光度（A）。如
50 0
京白菜
各种蔬菜的硝酸盐含量
小瓜
土豆
黄瓜
种类
莲花白 胡萝卜
系列1
由表可看出六种蔬菜硝酸盐含量大小为： 小瓜>京白菜>黄瓜>胡萝卜>土豆>莲花白。
3.1 共存离子的干扰及消除 按实验方法,对于硝酸盐溶液, 以相对标准偏差 ( RSD )小于 5 %为限, 少量的 K+, Na+、Ca2+、Mg2 +、SO42 -、F-不干扰测定; 而 NO-2、CO2-3 有干扰。实验证明,加入 1 mo l/L 盐酸溶液 2 mL 可消除碳酸盐的干扰,再加 1%氨基磺酸铵 0.1 mL 能很好消除 NO-2 的干扰。
1 实验仪器与材料 1.1 主要仪器与试剂 1.1.1 仪器 紫外分光光度计; 容量瓶；乳钵 1 .1.2 试剂 ①氨缓冲液（pH=9.6~9.7）：2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中，混 合后再加入 5ml 浓氨水，最后用蒸馏水稀释至 100ml。②粉末状活性 炭（除去待测样品中的色素）。③蛋白质沉淀剂Ⅰ，蛋白质沉淀剂 Ⅱ（除去蛋白质及混浊物）。④溶液Ⅰ：15 克铁氰化钾（K3Fe(CN)6 ） 溶于 50ml 蒸馏水中，定容于 100ml。⑤溶液Ⅱ：30g 硫酸锌（ZnSO4） 溶于 60ml 蒸馏水中，定容于 100ml。⑥硝酸盐标准液：称 0.722g 在 110℃条件下烘干的 KNO3 用蒸馏水溶解后定容至 1000ml。此溶液为 100ug/ml 标准贮液，放入冰箱内保存。 1.1.3 样品材料 京白菜（Brassica campestris L. ssp. chinensis (L.) Makino. var. communis Tsen et Lee）、小瓜（Cucurbita moschata）、胡萝卜 （Daucus carota）、莲花白（Brassica oleracea L. var.capitata）、 土豆（Solanum tuberosum L）、黄瓜（Cucumis sativus Linn.） (以上各蔬菜均在昆明蒜村农贸市场购买，产地昆明茨坝，高海 拔的冬天摘取)。
0.7391 26.39
0.2349
0.7892
0.1985
0.6680
莲花白
0.1572
0.1428 0.5303
0.4823 68.43
0.0728
0.2487
胡萝卜
0.0890 0.3097 0.2274
0.3026 0.2087 1.0389
0.7644
0.7020 140.39
表二：
400 350 300 250 硝酸盐含量 200 150 100
3.1.1 结论 利用本法测定蔬菜中硝酸盐含量,方法回收率在 95.1 % ~ 100 . 9 %之间,相对标准偏差在 1 . 55 % ~4 . 14 %之间,准确度和精密度 较高, 且操作简便, 尤其适用于检测大批量样。
参考文献 [ 1] 李静娜,王红珠,梁高道. 28 种蔬菜中亚硝酸盐含量随贮 存时间的变化[ J]. 中国公共卫生, 2002, 18( 4): 474 [2] 中华人民共和国国家标准 GB/T15401- 94. 水果、蔬菜及 其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定[ S]. 北京:中国标准出版社, 2002. [ 3] 国家环保局和《水和废水监测分析方法》编委会. 水和 废水监测分析方法[M]. 北京: 中国环境科学出版社, 2002: 266268. [ 4] 叶尚红,等《植物生理生化实验教程》第二版，云南科 技出版社出版，2007,90-92.