药敏试验步骤
用无菌棉拭子蘸取金黄色 葡萄球菌16～18h培养物，均 匀涂布于普通琼脂平板表面。 用无菌镊子分别取含有抗 生素的滤纸片均匀贴于已涂 布细菌的平板表面。 置37℃培养18～24h，观 察并测量滤纸片周围抑菌圈 及大小。
干热灭菌法
1.焚烧：是一种彻底的灭菌 方法，但仅适用于废弃物 品或尸体等。
微生物学试验 实验三 消毒灭菌和药敏试验
实验内容和要求
1.掌握药敏试验的原理、步骤、结果及 意义
2.掌握常用的消毒与灭菌技术 3.熟悉紫外线杀菌试验的原理 4.了解细菌L型的诱导和菌落类型
药敏试验原理
体外测定抗生素药物抑菌或 杀菌的能力。可帮助临床对感染 性疾病选择最佳用药，还可进行 流行病学调查，了解某些致病菌 耐药性变异情术有哪些？分 别有什么用途？灭菌的标准是什 么？
2.紫外线杀菌作用的原理如何？有 什么特点？
3.什么是细菌L型？细菌L型的形态 染色有什么特点？分离培养细菌 L型的培养基有什么特点？
本次实验课结束
明天看试验结果后请组长收齐作 业交上来，值日同学留下 再见！
滤过除菌
化学消毒法
用化学药品进行消毒的方法，由于 化学药品对细菌及人体都有毒性，故只 能用于体表、医疗器械及周围环境等的 消毒。 杀菌机制： （1）使菌体蛋白质变性或凝固； （2）干扰细菌的酶系统和代谢； （3）影响细菌胞浆膜的通透性。
消毒剂类别 重金属盐
氧化剂
卤素类 醇类 酚类
表面活性剂 酸碱类 染料
2.烧灼：直接用火焰灭菌， 适用于微生物学实验室的 接种环、试管口等的灭菌。
3.干烤
湿热灭菌法
1.煮沸法 2.巴氏消毒法 3.高压蒸汽灭菌
法
紫外线消毒法
波长240～280nm时具有 杀菌作用，紫外线杀菌机理 主要是作用于细菌DNA，干扰 细菌DNA的复制与转录，导致 细菌的死亡或变异。
紫外线穿透力差，故只 适用于空气及不耐热物品的 表面消毒。
同上、也常用于手及皮肤消毒
手术器械消毒 排泄物、地面消毒 表浅创伤消毒
细菌L型－细胞壁缺陷细菌
形成条件： 细胞壁中肽聚糖结构受理化或生物因素的直 接破坏或合成抑制而形成。
生物学特性：形态多形性 ；染色革兰阴性；培养高渗培 养基；菌落油煎蛋样
与医学关系仍：有一定致病性
临床分离葡萄 球菌L型
葡萄球菌L型 回复后
名称 红汞 硫柳汞 高锰酸钾 过氧化氢 过氧乙酸 碘液 乙醇 石炭酸
来苏
新洁尔灭 生石灰 龙胆紫
浓度(%) 2
0.01 0.1 3 0.2～0.5 2.5 70～75 3～5
3～5
0.1 1:4～1:8
2～4
用途 皮肤、粘膜、小创面消毒 生物制品防腐 皮肤、尿道、水果、蔬菜消毒 皮肤、粘膜、创伤消毒 塑料、玻璃、人造纤维消毒 皮肤消毒 皮肤、体温计消毒 地面、器皿表面和排泄物消毒