血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定
实验原理
国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。

ALT
L-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸
LDH（乳酸脱氢酶）
丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O
加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。

(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)[1]
2.标本：
2.1病人准备：12小时禁食。

2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。

3.标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。

4.标本运输：常温条件下保存运输。

5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

6.实验材料
6.1试剂申能ALT测定试剂盒（货号：141270171701试剂16×64ml 试剂26×16ml）
6.1.1试剂组成
试剂1（R1）：
Tris缓冲液pH7.5100mmol/L
L-丙氨酸500mmol/L
LDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L
试剂2（R2）：
a-酮戊二酸 15mmol/L
NADH 0.18mmol/L
磷酸吡哆醛试剂：
Good’s缓冲液pH9.60.7mmol/L
磷酸吡哆醛0.09mmol/L
6.1.2试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪
8.操作步骤
8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操
作规程.SOP文件
9.检验结果的判断与分析
10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11.计算方法：以TruCalU复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

12.参考值范围[4]
不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛
女性<31U/L10～35U/L
男性<41U/L10～50U/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

13.临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。

它们是氨基转移酶类的典型代表。

氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。

ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。

而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。

因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。

AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。

比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。

14.操作性能
14.1线性范围4～800U/L
14.2精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。

用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

不含磷酸吡哆醛
含磷酸吡哆醛
14.3方法学比较：不含磷酸吡哆醛
本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。

含磷酸吡哆醛
本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.994。

14.4灵敏度：本试剂的检测限为4U/L。

14.5病人结果可报告范围4U/L-800U/L
15.超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。

当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。

16.病危报警值的处理
17.方法局限性
17.1本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。

当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。

17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，胆红素浓度≤684μmol/L，血红蛋白浓度≤4.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。

18.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。

19.参考文献
ThomasL.Alanineaminotransferase(ALT),Aspartateaminotransferase(AS T).In:ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-Bo oksVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.
MossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology.In:BurtisCA,AshwoodER.edi tors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersC ompany;1999.P.617-721.
BergmeyerHU,HorderM,RejR.InternationalFederationofClinicalChemist ry(IFCC)ScientificCommittee,Analyticalsection:approvedrecommendation (1985)onIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenz ymes.Part3.IFCCmethodforalanineaminotransferase(L-alanine:2-oxogluta rateaminotransferase,EC2.6.1.2).JClinChemClinBiochem1986;24:481-95.
4.LorentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden 1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37℃.DGK linischeChemieMitteilungen1995;26:190-2.
20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。