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实验六 小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察


单核细胞(上)和巨噬细胞(下)
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬细胞吞噬细菌(电镜)
肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌(电镜)
三、实验仪器、材料和试剂
1. 仪器、用具:显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解 剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片。 2. 材料:小鼠(体重20g左右),鸡血。 3. 试剂: 4%台盼蓝染液:台盼蓝染粉 0.4克,加0.85%生 理盐水100ml。 6%淀粉肉汤(含0.3%台盼蓝):牛肉膏 0.3克; 蛋白胨 1.0克;氯化钠0.5克;蒸馏水 100ml。加热后, 可加入6.0克可溶性淀粉,促使溶解,再煮沸灭菌, 置40C冰箱保存,用时水浴熔化,加入适量4%台盼 蓝染液混匀,使呈蓝色。
观察时,将视野光线调暗。在高倍镜下,先分辨清 鸡红细胞和巨噬细胞。鸡红细胞为淡黄色、椭圆形、 有核的细胞。而数量较多、体积较大圆形或不规则 的细胞,其表面有许多似毛刺装的小突起(伪足), 胞质中有数量不等的蓝色颗粒(为吞入的含台盼蓝 淀粉肉汤形成的吞噬泡)即为巨噬细胞。变换视野 仔细观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程。可见有的 鸡红细胞(一至多个)紧贴附于巨噬细胞的表面; 有的巨噬细胞已将1至数个红细胞部分吞入;有的 巨噬细胞已吞入一个或几个红细胞在胞质中刚刚形 成椭圆形的吞噬泡;有的巨噬细胞内的吞噬泡体积 缩小,并呈现圆形,这是与初级溶酶体发生融合, 泡内物正在被消化分解。
四、方法与步骤
1. 实验前2d, 每天给小白鼠腹 腔注射6%淀粉 肉汤液(含台盼 蓝)1ml。 2.实验前,再向 腹腔注射1ml 1%鸡红细胞悬 液,并轻揉腹部, 使鸡红细胞悬液 分散。
3. 20-30min后,用脊椎脱臼法处死小鼠(右手抓住 鼠尾,用力向后拉,左手拇指与食指同时按著鼠头 后的颈部,使脊椎与脑髓间断开致死)。 4. 迅速剖开腹腔,用未装针头的注射器或吸管吸取 腹腔液。 5. 取一张干净载 玻片,滴一滴腹 腔液,盖上盖玻 片,放置2分钟~3 分钟后在显微镜下 镜检。
五、实验结果
六.注意事项
1、给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤时要注意 进针适度,注射量要合适。 2、给小白鼠腹腔注射时,抓小鼠不要Байду номын сангаас 紧,以免小鼠死亡。 3、使用的载玻片要很干净。
七、实验讨论
1.简述细胞吞噬作用的原理。 2.实验结果的分析。
实验六 巨噬细胞吞噬现象的观察
一、 实验目的
1.通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的试 验,了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功 能。 2.了解巨噬细胞在机体非特异免疫中的重 要作用。
二、实验原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细 胞,具有吞噬作用的功能。它们广泛分布在组织和 血液中,在机体的非特异免疫功能中起着重要作用。 当病原微生物或其他异物侵入机体时,能招引巨噬 细胞,而巨噬细胞又有趋化性,它通过产生活跃的 变形运动,主动向病原体和异物移行聚集,首先把 异物吸附在细胞表面,随之,吸附区域的细胞膜向 内凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质,形成吞 噬泡,继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合, 形成吞噬溶酶体,把病原体杀死,异物消化分解。 巨噬细胞吞噬异物的能力在一定程度上反映了机体 免疫水平的高低。
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