T = I/Io A = lg(Io/I) = εCl 式中，T 为透过率，Io 为入射光强度，I 为透射光强度，A 为吸光度 (消光 值)，ε为吸收系数，l 为溶液的光径长度，C 为溶液的浓度。从以上公式可以看 出，当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时，透光率是根据溶液的浓度而变化 的。 721 型分光光度计的构造 721 型分光光度计允许的测定波长范围一般在 360～800nm，其构造比较 简单，测定的灵敏度和精密度较高。因此，应用比较广泛。
从光源灯发出的连续辐射光线，射到聚光透镜上，会聚后，再经过平面镜 转角 90°，反射至入射狭缝。由此入射到单色器内，狭缝正好位于球面准直物镜 的焦面上，当入射光线经过准直物镜反射后，就以一束平行光射向棱镜。光线 进入棱镜后，进行色散。色散后回来的光线，再经过准直镜反射，就会聚在出 光狭缝上，再通过聚光镜后进入比色皿，光线一部分被吸收，透过的光进入光 电管，产生相应的光电流，经放大后在微安表上读出。
课 2.
分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 ...................................... 5
课 3.
与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项...........................................2
课 4.
分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法.............................. 7
2)透射比（吸光度）准确度 很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测 试数据的准确性. 3)杂散光 杂散光是由于光学元件制造误差以及光学和机械零件表面的漫反射形成 的。杂散光是分析样品的非吸收光，随着样品浓度的增加，杂散光的影响也随 之增大，将给分析结果带来一定的误差。在紫外的短波区域光源强度和检测器 的灵敏度均明显减弱，杂散光的影响更不能忽视。因此，杂散光的大小也是仪 器性能的一项重要指标。 2. 与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项
课 1.
分光光度计原理.......................................................................................................................................................................................... 5
目的
1. 了解紫外可见分光光度计的理论和操作 2. 了解一个典型的分光光度计的结构和常见故障排除 3. 掌握成功维修常见故障的技术
技能要求
1. 熟悉紫外-可见分光光度计的基本结构及各主要部件的作用； 2．掌握紫外-可见分光光度计一般操作程序和具体操作要求； 3．掌握紫外-可见分光光度计的安装要求和维护保养知识；
目的 ..................... ............. ............. ............. .......................................................... 2
预习参考资料.......... ............. ..................................................................................... 2
课 2.
练习 1-1 ......................... ........................ ............................................................. 8
介绍
在完成这一个单元的学习之后，学员将能理解紫外可见分光光度计的结构 及常见故障排除。同时具备必要的维护和更换相应部件的技能
讨论的问题
1. 分光光度计各部分的作用是什么? 2. 在波长准确度、透射比（吸光度）准确度、杂散光如何检查?
练习 1-1
1.721 分光光度计各部件的作用是什么？ 2.721 分光光度计日常维护有哪些注意事项？ 3.721 分光光度计常见故障有哪些？怎么进行排除？
考核标准： 1.721分光光度计各部件的图片 2.光门不能完全关闭，处理图片
4)显示不稳定。可能原因： a）预热时间不够。解决方法：延长预热时间至30分钟左右（部分仪器由于 老化等原因，长时间处于工作状态时，也会工作不稳）。 b）光电管内的干燥剂失效，使微电流放大器受潮。解决方法：烘烤电路， 并更换或烘烤干燥剂。 c）环境振动过大、光源附近空气流速大、外界强光照射等。解决方法：改 善工作环境。 d）电位器、光电管或电子电路等其它原因。解决方法：更换、修理。
的范围内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。 3. 分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法
1）仪器不能调零。可能原因： a）光门不能完全关闭。解决方法：修复光门部件，使其完全关闭。 b）透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮。 c）仪器严重受潮。解决方法：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使 其干燥，并更换干燥剂。 d）电路故障。解决方法：检修电路。 2）仪器不能调“100%”。可能原因： a）光能量不够。解决方法：增加灵敏度倍率档位，或更换光源灯（尽管灯 还亮）。 b）比色皿架未落位。解决方法：调整比色皿架使其落位。 c）光电转换部分老化。解决方法：更换部件。 d）电路故障。解决方法：调修电路。 3)测量过程中,“100%”点经常变动。可能原因： a）比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解决方法： 用擦镜纸擦干净比色皿表面，然后将其安放在比色槽的左边，上面用定位夹定 位。 b）电路故障（电压、光电接收、放大电路）。解决方法：送修。
讲师的任务:
1. 描述721分光光度计结构 2. 描述721分光光度计常见故障
预习参考资料
课 1. 理论和操作
分光光度计的基本工作原理是基于物质对光 (对光的波长)的吸收具有选择性，不同的物质都有各 自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一 溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在 一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的 程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。
右更换一次，霉雨季节一周一次，具体看房间的湿度和硅胶的情况而定。 ④在托运或移动仪器时，应注意小心轻放，以防光学系统的位移。
1. 分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 1)波长准确度 分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中
的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差，单色光的实际波长与仪 器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定 的宽度，对波长准确度要求允许宽些。但是，当吸收峰宽度较小，而且吸收峰 两侧边缘比较陡直，此时波长准确度的影响就必须引起注意。
实训实验任务名：
课程 分析仪器结构及维护
情境 三 紫外-可见分光光度计
课时：
4
地点：
实 C403
目录
介绍 ................ ............. ............................ ........ ..................................................... 2
（在使用仪器前，必须仔细阅读其使用说明书） 1）若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0” 和“100%”点。然后再测量。 2）指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这 种情况，需进行机械调零。 3）比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将 水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。 4）操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。 5）721 型等分光光度计，由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特 点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否 则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器 时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖 或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。 6）放大器灵敏度换挡后，必须重新调零。 7）比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试结果失去意 义。在进行每次测试前均应进行比较。具体方法如下；分别向被测的两只杯子 里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处，石英比色杯；220nm、700nm 装 蒸馏水，玻璃比色杯：700nm 处装蒸馏水，将某一个池的透射比值调至 100%， 测量其他各池的透射比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%
721 型分光光度计使用和维护中应注意事项： ①为保证仪器使用正常，连续使用仪器的时间不应超过 2 小时，最好是间 歇 0.5 小时后，再继续使用。 ②比色皿每次使用完毕后，要用去离子水洗净并倒置擦干或晾干后，存放 在比色皿盒内。在日常使用中应注意保护比色皿的透光面，使其不受损坏或产 生划痕，以免影响透光率。 ③仪器不能受潮。在日常使用中，应经常注意单色器上的防潮硅胶(在仪器 的底部)是否变色，如硅胶的颜色已变红，应立即取出烘干或更换。一般 2 周左