（3）结果判读
注意点：
◆计数胞膜完全着色的细胞比例及着色强度
◆胞浆着色忽略不计
◆评定浸润部位的着色情况 ◆正常上皮细胞不应着色
HercepTestTM判读标准
染色形态 完全没有染色或是肿瘤细胞中 评分
0
染色图例
少于10%肿瘤细胞有细胞膜染色
大于10%的肿瘤细胞有呈现清淡地/ 稍微地并且是不完整的细胞膜染色 这些细胞只染在部分的细胞膜 大于10%的肿瘤细胞有呈现 轻度至中度的完整的细胞膜染色 大于10%的肿瘤细胞有呈现 强度的完整的细胞膜染色
抗体/试剂盒 CB11 4D5 TAB 250 A0485 HercepTestTM 类型 单抗 单抗 单抗 多抗 多抗
公司名
Novacastra (newcastle, upon tyne, UK) Genentech(San Francisco, CA) Zymed ( San Francisco, CA) DAKO( San Francisco, CA)
ER的分类及ER、PR的意义
ER
ERα（50%-80% positive）
PR (主要显示了ER的功能性途径)
ERβ（与乳癌的预后有关）
内分泌治疗原则及药物
绝经后
托瑞米芬 来曲唑、阿拉曲唑 三苯氧胺 （他莫昔 芬）
依西美坦 氟维司群
绝经前
三、乳腺癌中HER-2的检测 及其临床意义
（一）HER-2概况
谢谢观赏
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乳腺癌术后病理报告的解读
湘西自治州人民医院乳甲外科 吉首大学第一附属医院乳甲外科 王 庆
目录
1.乳癌术后病理大体标本解读 2.乳腺病理免疫组化 3.Her-2的意义及检测方法
乳腺癌术后病理报告的解读
总体要求
力求全面、规范、报告内容集体包括：肉眼检查肿块部位、大小、形 状；显微镜下组织学类型、分级、癌周围组织病变，血管、淋巴管受 侵，淋巴结是否转移、切除个数、阳性个数（淋巴结转移个数/切除淋 巴结个数），直径>1cm应注明其大小；免疫组化检查：ER、PR、cerB-2(Her-2)、Ki-67等。
(二) HER2阳性状态可以预示肿瘤对常规 治疗的反应情况
◆ 内分泌治疗
HER2阳性患者相对耐
药
◆ CMF方案 HER2阳性患者相对耐药 ◆蒽环类 对大剂量蒽环类相对敏感 ◆ 紫杉类药物 相对敏感
（三）、靶向Her-2的人源化单抗
—赫赛汀
赫赛汀 靶向HER2的人源化单抗
®
95% 人源化, 5% 鼠抗，具有高度亲和性 (Kd=0.1nM) 和 特异性，显著降低免疫原性(HAMA)
死亡时间 (月数)
死亡时间 (月数)
Ross JS, Fletcher JA. Stem Cells 1998; 16: 413–428
Seshadri R et al. J Clin Oncol 1993;11:1936–42
2005年St.Gallen指南乳腺癌危险度分级
低度危险
◆ LN（-）且 ◆ 标本中病灶大小（pT）≤2CM ◆ 分级1级 ◆ 瘤周脉管未见肿瘤侵犯 ◆ HER2基因没有过度表达或扩增 ◆ 年龄≥35岁
3+ 2+ 1+
免疫组织化学法0-3+评分系统 Immunohistochemistry (IHC)
0
2+
1+
3+
3+
CerbB2
3+
CerbB2
2+
CerbB2
2+
CerbB2
1+
CerbB2
2.显色原位杂交（CISH）
一种用碱性磷酸酶标记的探针，在甲醛固定、 石蜡包埋组织切片上进行杂交，再用鼠抗地高辛抗 体和辣根过氧化物酶抗鼠抗体进行免疫结合，DAB显 色，普通光学显微镜观察有无基因扩增的异常信号 的方法。CISH技术比FISH简单，试剂较便宜，不需 昂贵的仪器设备，且可长期保存切片。
◆ CB11 或4D5 （+++） Hercept Test（+++）;
Hercept Test（++） CB11 或4D5 （-）
◆ FISH (+), Hercept Test +++: 19/20;
FISH (-) , Hercept Test ++ : 5;
FISH (+), IHC (-) : 3例。 Gouvea AP, Milanezi F, et al. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2006 Mar; 14(1): 103-8.
◆Her-2: 又名C-erbB-2, Her-2/neu
定位于17q12.1-21
◆ Her-2属于EGFR家族成员
◆为原癌基因,编码185KD的跨膜型酪氨酸激酶生长 因子受体 ◆现有研究表明,在30%以上的人类肿瘤中存在Her2基因的扩增/过度表达(如乳腺癌、卵巢癌、子宫 内膜癌、输卵管癌、胃癌和前列腺癌等）
其中25~30%的乳腺癌为 Her-2基因的扩增/过度 表达。
国外文献报道的乳腺肿瘤 HER2阳性情况
HER2
Study Ross(2003) Owens(2004) Ross(2003) Penault-Llorca(2005) n 5003 6556 279 699 Stage Ⅰ- Ⅲ Ⅰ-Ⅳ Ⅳ Ⅳ positive, % 22 24 26 30
腋窝的淋巴引流
肿瘤细胞的分级：根据核分裂像及异型性
I级
II级
低度恶 中度恶 性：5年生 性：5年生 存率 存率 （68%） （32%） 高度恶 性：5年生 存率 （0%）
III级
免疫组化
免疫组化临床常用指标： 雌激素受体（ER） 孕激素受体（PR） 人表皮生长因子-2基因（C-erb-2/Her2） 核蛋白Ki-67：细胞核内与细胞增殖有 关的非组蛋白性核蛋白
（1）两种探针
◆应用Her-2和17号染色体双荧光标记探
针，两种信号的比值（<2或者>=2） Her-2是否扩增
◆应用单一针对Her-2的地高辛标记探针，
直接定量Her-2的扩增程度
（2）FISH主要设备： 荧光显微镜 原位杂交仪 细胞遗传分析工作站 高压消毒炉
（3）结果观察
◆ 75%以上癌细胞核中都有杂交信号
肿瘤的分化程度
高分化→中分化→低分化
肿瘤的分化程度
G1：细胞分裂 慢
高分 化
分化 差，预后 差 G2：细分裂 居中
G3：细胞分裂 快
中分 化
低分 化
肿瘤的病理类型
非浸 润性 癌 浸润 性特 殊癌 浸润 性非 特殊 癌
导管内癌、小叶原位癌、粉刺 癌等
病理分 型
小管癌、粘液癌、浸润性乳头 状癌、Paget病等
无病生存概率
60 HER2基因 ³ 3 拷贝数 40
累计生存率
0.50 基因扩增: >10 拷贝数 无基因扩增: <3拷贝数 临界值: 不包括
扩增
20 对数秩检验 p=0.001 0 0 12 24 36 48 60 72
0.25
Log rank p<0.001 0
0 24 48 72 96 120 144
DAKO ( San Francisco, CA)
HercepTest: 美国FDA批准用于临床诊断
抗体
阳性率
Hercept Test (DAKO)
AO485 (DAKO) 4D5 (Genetech) CB11 (Biogenex Novocastra)
31/86 (38.1%)
25/66 (37.8%) 15/86(17.4%) 25/86 （9.1%）
◆ 细胞核大小一致、边界完整、染色均一、
无重叠
FISH: PathVysion
无扩增
TM
扩增
比值 <2 提示Her-2无扩增
比值 2 提示Her-2有扩增
FISH: INFORM
低扩增
®
高扩增
Ki-67的意义
Ki-67(增殖细胞相关的核抗原) 功能：与细胞有丝分裂密切相关，在细 胞增殖中是不可缺少，Ki-67作为标记 细胞增殖状态的抗原,阳性说明癌细胞 增殖活跃 判读标准：以14%为界限 阳性（＞14%） 阴性（《14%）
浸润性导管癌、浸润性小叶癌
腋淋巴结转移情况
腋淋巴结的转移数目
至少检测10个淋巴结才能准确评价腋淋巴结转移的状态 ①：无淋巴结转移 ②：1～3个淋巴结转移 ③：4～9个淋巴结转移 ④：≥10个淋巴结转移
腋淋巴结的转移部位
腋上组（Level I）:胸小肌外侧组 腋中组（Level II）:胸小肌后组 腋后组（Level III）:胸小肌内侧组
（1）所需主要设备
◆电炉、带温度计的高压锅或微波炉 ◆原位PCR仪或原位杂交炉
◆ 37℃温箱 ◆亮视野显微镜
（2）检测三大关键步骤
◆标本的加热预处理
用电炉，15 分钟98℃ –100℃ 所有载玻片必需全部浸入缓冲液
◆酶消化
室温 10 分钟 或37℃ 3分钟
◆严格冲洗
0.5x SSC, 75-80℃, 5 分钟
用于治疗HER2阳性乳腺癌
生存率提高达45%
疗效改善并持续
维持生活质量
（四）. Her-2阳性状态的检测方法
常用检测方法
1.免疫组化（IHC）
检测Her-2蛋白表达
（1）抗原修复：95-99℃ EDTA（1mM pH80） 或枸橼酸钠 （0.05M pH6.0）