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人感染HN禽流感病毒病原学特点及标本采集实验室检测


6个内部片段来源于H9N2
三株H7N9病毒为同一基因类型
序列特点
耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的,即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。
HA连接肽分析 HA蛋白339位连接肽由单个(PKGRGLFG)碱性氨基酸组成,根据既往研究,具有这种序列特点的病 毒对禽类呈低致病性。
受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点(为QSG)。Shanghai/2/2013和 Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受体结合位点(为LSG)
• 2. 当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内,立即对呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引 物H5、H7亚型的检测。
• 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测阳性时,应当于24小时内将其中2管呼吸道 相关原始标本分别送省级疾控中心流感网络实验室和国家流感中心。
• 具备相应生物安全条件的网络实验室可开展病毒分离,并将分离的毒株按要求及时送国家流感中心。
• 3. 若当地流感监测网络实验室检测结果为甲型流感和乙型流感通用引物均阴性时,应当立即 将1管原始呼吸道标本送省级疾控中心。省级疾控中心收到标本后,应当立即对其中1管进行 SARS 、新型冠状病毒等相关病原体的检测,另1管送国家流感中心。
• 4. 当地流感监测网络实验室将采集的血清标本分别送省级疾控中心和国家流感中心开展病原 体的抗体检测。
➢ 人A型流感病毒:H1N1、H2N2、H3N2
➢ 人禽流感病毒: H1N1、 H5N1、 H9N2、 H9N2 、 H10N7
H7N2、 H7N7 、 H7N3 、 H7N9、
➢ 禽流感病毒: H5N1 、 H5N2 、 H5N8、 H5N9、 H7N3 、 H7N4 、 H7N7 、 H7N9
➢ 猪流感病毒: H1N1、H1N2 、H3N2..
➢亚型:H7N1, H7N2, H7N3, H7N7, H7N8 ➢野禽居多 ➢LPAI
核酸检测
病毒分离
从3个病例中分离到3株病毒 • A/Shanghai/1/2013(H7N9) • A/Shanghai/2/2013(H7N9) • A/Anhui/1/2013(H7N9)
序列测定
PB2 PB1 PA HA NP NA MP NS
➢ 标本分装:为避免标本反复冻融,保证标本检测质量。 采集的呼吸道标本每份分为3 管,每管不少于1ml 血清标本每份分为2 管,每管不少于0.5ml。 并填写不明原因肺炎病例/聚集性病例标本送检表
(二)密切接触者标本采集
➢ 采集人:疾病预防控制机构负责标本采集和实验室检测工作。 ➢ 标本类型:应当采集病例的所有密切接触者的双份血清标本(开始实施医学观察时和间隔2-
二、实验室检测程序
➢ 人感染H7N9禽流感疑似病例先由各省(区、市)的国家流感监测网络实验室和具备PCR实验室检测 条件的医疗机构进行标本的检测。 不具备检测条件的地区,在确保生物安全的情况下,按照规定将标本送邻近具备相应条件和资格认证 的国家流感监测网络实验室和具备PCR实验室检测条件的医疗机构进行检测。
一、诊断程序
➢ 各省首例人感染H7N9禽流感病例由发生地省级卫生行政部门组织省级临床专家组结合病例 的流行病学史、临床表现、省级疾病预防控制中心检测结果及中国疾病预防控制中心实验室 复核检测结果等,按照诊疗方案进行诊断,由省级卫生行政部门报告国家卫生和计划生育委 员会。
➢ 各省后续病例的诊断仍按上述程序进行,但实验室诊断依据可不需要中国疾病预防控制中心 实验室的复核检测结果。
病例1 病例2 病例3
HPAI H7N3 LPAI H7N9
HPAI H7N3 LPAI H7N9
HPAI H7N7 、 H7N3、 H7N1
LPAI H7Nx、H7N2、 H7N3、H7N1、H7N9
LPAI H7N9
LPAI H7N8、 H7N9(Korea)
HPAI H7N3( Pakistan)
人感染H7N9禽流感诊疗方案(2013年第2版) 病原学检测的解析
病原学及相关检测
抗病毒治疗之前必须采集呼吸道标本送检(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上 皮细胞)。
有病原学检测条件的医疗机构应尽快检测,无病原学检测条件的医疗机构应留取标本送指定机构 检测。
➢ (1)甲型流感病毒抗原筛查。呼吸道标本甲型流感病毒抗原快速检测阳性。但仅可作为初筛实验。 ➢ (2)核酸检测。对患者呼吸道标本采用real time PCR(或RT-PCR)检测H7N9禽流感病毒核酸。 ➢ (3)病毒分离。从患者呼吸道标本中分离H7N9禽流感病毒。 ➢ (4)动态检测双份血清H7N9禽流感病毒特异性抗体水平呈4倍或以上升高。
人感染H7N9禽流感病毒 病原学特点及标本采集、实验室检测
江西省疾病预防控制中心 疾病检测所
2013年4月12日
目录
人感染H7N9禽流感病毒病原学特点 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 人感染H7N9禽流感病例诊断程序 人感染H7N9禽流感诊疗方案(2013年第2版)
病原学检测的解析
1996 2002
2003
2004
2006 2007
1977 19791980
1/England H7N7
7/ Italy 1/ USA H7N3 H7N2
1/ Canada H7N3
4/ Wales H7N2
1/ USA H7N2
1/ Norfolk H7N3
H7感染人(>100人) 美国、英国、意大利、荷兰、加拿大
A/H5N1 A/H7N2(NY/107)
A/H7N3
A/H5N2
病原来源
时间/国家
病例数/临床表现

1980/美国
3/结膜炎

1996/英国
1/结膜炎

1997/香港
18/ILI,肺炎

1998/中国广东
5/ ILI,肺炎

1999/香港
2/ILI

血20清02学/北证美据(:Virginia)1/ILI,血清学诊断
HPAI H7N7、 H7N3 、 H7N4
禽中暴发的H7 2006年前暴发的均为HPAI H7 欧洲:意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、 捷克、西班牙、瑞典
近年来人感染禽流感病毒病例
病毒亚型 A/H7N7 A/H7N7 A/H5N1 A/H9N2 A/H9N2 A/H7N2
A/H9N2 A/H5N1 A/H7N7
The virus
M 2 protein
The Flu-Site
Neuram inidase
M 1 Protein Viral RNA Haem agglutinin
01/99
About the influenza illness 1
P harm aceutical
流感病毒表面蛋白 神经氨酸酶
血凝素 RNA M2 蛋白 (only on type A))
甲型 H1N1
第四次世界大流行2010年2月28日 ,至少 16455人
流感病毒
EM Image: from Linda Stannard Dept of Medical Microbiology University of Cape Town
Sketch map: from Paul Digard Dept Pathology University of Cambridge
人感染H4, H5, H6, H7,H9,H10, H11 AIVs.

2003/香港
1/ILI

2003/香港
2/ ILI,肺炎

2003/荷兰
89/结膜炎、ILI、肺炎; 1名死亡病


2003至今, 15个国家 602/ ILI, 肺炎
来源不清
2003/北美(New
1/肺炎
York),

2004/加拿大
人感染H7N9禽流感病毒病原学特点
1918 1957 1968 2009
流感大流行和流感病毒的变异
流感病毒株 H1N1 39 Years
流感大流行造成的死亡人数
第一次世界大流行 2000-4000万 (第一次世界大战战亡人数<1000万)
H2N2 11 Years
H3N2
41 Years
第二次世界大流行 200万 第三次世界大流行 70-100万
➢ 各省(区、市)首例人感染H7N9禽流感疑似病例的原始标本应在确保生物安全的情况下,送中国 疾病预防控制中心进行复检确认。
➢ 后续发生的病例,各地应当将其原始标本和病毒分离物,在确保生物安全的情况下,按照规定及 时送中国疾病预防控制中心。
➢ 各省(区、市)卫生行政部门应当将具备PCR实验室检测条件的医疗机构纳入人感染H7N9禽流感 检测机构,开展标本检测工作,并作为诊断的实验室依据。
分类和命名 • 根据分类学分类流感病毒属正粘病毒科流感病毒属。 • 根据宿主分类为人流感病毒,禽流感病(AIV),猪流感等 • 根据流感病毒核蛋白(NP)和基质蛋白(MS)抗原性的不同,将其分为A、B、C三个血清型
➢ 根据流感病毒血凝素HA和神经氨酸酶NA抗原性的差异,又可将其分为不同的亚型。目前,A型 流感病毒有16种特异的HA和9种特异的NA。
4周后);当密切接触者出现急性呼吸道症状时还要采集咽拭子,送当地国家级流感网络实 验室进行检测。
(二)标本转送和检测
• 1.H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽 流感病毒进行管理。 病例的临床标本采集后,县级疾病预防控制机构和病例收治的医疗机构要密切配合,按照 生物安全的相关规定进行包装,在24 小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测。
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