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试管苗大规模培养
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植物组织培养
外植体
离体的植物器官、组织或细胞
过程
脱分化
愈伤组织 再分化
植物激素： 细胞分裂素、生长素
根、芽 植物体
植物组织培养条件：
含有全部营养成分的
培养基、一定的温度、空
气、无菌环境、适合的PH、
适时光照等。
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14.植物体细胞融合的第一步是什么？
15.用什么方法可以去除细胞壁？
细胞 单克隆抗体技术
工程 技术 核移植
胚胎移植 8
1、为什么利用植物的一个花瓣就可以培育出完整 的植株？ 2、细胞为什么具有全能性？
生物的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传 物质,都有发育成完整个体所必需的全部基因。
3、为什么在生物体内的细胞不能表现出全能性？ 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达，
酶解法——果胶酶、纤维素酶 1 6.去除细胞壁后的植物细胞又叫做什么？
原生质体
17.诱导原生质体融合的诱导剂叫什么？
聚乙二醇(PEG)
18.诱导原生质体融合的物理方法主要有哪些种？
离心、振动、电激
19.融合后的杂种细胞可以直接生长为杂种植株吗？
否，还需对杂种细胞进行组织培养
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20.植物体细胞融合的优点是什么？ 能够克服远缘杂交不亲和的障碍。
• 4）将外植体接种于培养容器的培养基上
• 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！
• 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形
成愈伤组织
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植物组织培养的培养基
• 定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的 基质
• 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 • 有机营养成分
① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 生长激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 • PH值：5.0－6.0
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从已处死的 雌鼠___卵__巢_中获取。 （2）图中的高血压相关基因作为 目的基因，质粒作为 __载__体__二者需用 同种限制酶切割后连接成重组载体，该过程 与质粒上含有 限制酶切割位点有关。 （3）子代大鼠如果 检测到体内有相关蛋白和__出__现__高__血__压，
的全能性有何变化？ 变高！ 10、植物组织培养需要哪些培养
条件？
①营养物质
水、无机盐③环境条件
无菌、适宜的温度和pH等。
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11.为什么整个过程要求消毒、灭菌及无菌操作？ 防止受到微生物污染！
12.决定细胞脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例浓度。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混 合，并加入__D__N_A_连__接___酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 _鉴__别__和__筛__选__含__有__目__的__基__因__的_导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 __蔗__糖__为__唯__一__含__碳__营__养__物__质____的培养基中培养，以完成目的 基因表达的初步检测。
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植物组织培养
必要条件： 细胞离体、一定的营养物质、
激素和其他外界条件
关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织
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植物组织培养
• 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分 组织或器官
• 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、 种子、花粉等）
• 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上
• 3）切取所需的外植体
细胞分化为不同的组织、器官。
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5、植物组织培养一般要经过哪两个的基本过程？
6、愈伤组织的细胞有何特点？全能性是高还是低？ 排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞
7、胚状体有何特点？ 胚状体是由愈伤组织细胞诱导分
化出具有胚芽、胚根、胚轴的胚状结 构，进而长成完整植株。
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8、脱分化和再分化的比较：
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9、细胞脱分化后形成的愈伤组织
即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成
功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（2010江苏）27、下表中列出了几种限制酶识别序列及其切 割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回 答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有 __0_、__2_个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多， 质粒的热稳定性越 _____。高 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用 SrnaⅠ切割，原因是__S_m__a_Ⅰ__会__破__坏__质__粒__的__抗__性__基__因__、___ _外__源__D_N_A__中__的__目__的__基__因__。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种 限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 _质__粒__和__含__目__的__基__因__的__外__源__D_N_A__片__段__自__身__环__化___。
概念
细 胞 工 程
分类
应用的原理和方法
细胞生物学和 分子生物学
研究的水平
细胞整体水平 或细胞器水平
研究的目的
按照人们的意愿来
改变细胞内的遗传
物质或获得细胞产 品
植物细胞工程 理论基础 细胞的全 能性
动物细胞工程
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植物 植物体细胞杂交
细胞
工程 植物组织培养
主
技术
要
动物细胞融合
技 术
动物 动物细胞培养
当细胞分裂素与生长素共同使用时，能强烈促进 愈伤组织的形成。当细胞分裂素与生长素浓度比 高时，有利于芽的发生；浓度比低时，有利于根 的发生。
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13.植物组织培养的概念
在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、 细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱 导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
专题2 细胞工程
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“汉水丑生的生物同行”超级 群大型公益活动：历年高考题 PPT版制作。本课件为公益作
品，版权所有，未经允许不得 擅自修改或用于任何形式的商 业用途。2012年1月15日，汉水 丑生标记。
（2011山东）35．【生物—现代生物科技专题】 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药 物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠 的流程如图所示。