（ 东北 大 学 理 学 院 生物 技 术 研究 所 ， 宁 沈 阳 １ ０ ０ ） 辽 １ ０ ４
摘要 ： 以瑞 香 狼 毒 顶 芽 、 叶片 和 茎 段 为 外植 体 ， 察不 同植 物 生 长 凋节 剂对 愈伤 组 织 诱 导 率 及 生 长 状 态 的影 响 。 由 考 疏 松 型 的 愈 伤组 织 建 立 稳 定 的瑞 香狼 毒细 胞 悬 浮 培 养 体 系 ， 用 正交 试验 法初 步 研 究 碳 源种 类 和 植 物 生 长 调 节 剂 采
的重要 途径 。利 用植 物细胞悬 浮培养 生产 黄酮类化 合物 的研究报 道 已有 不少 。其 中 ， 袁宗 泉等口 报道 了细胞生 长期 、 丙氨酸 和放线 菌 一Ｄ对银 杏 （ ｉｋ ｏ ｉ ｂ ） 苯 Ｇ ｎ ｇ ｂｌ ａ 黄酮产 量的影 响 ； 德修等 口 ｊ ｏ 赵 报道 了不 同理 化因子对 水母
进行 了阐述 ； 罗建平 等 报道 了茉莉 酸 甲酯 、 杨酸 和一 氧 化氮 诱 导及 稀 土元 素对 怀 槐 （ ａ ｋａａ ｌｒｎ ｉ） 。 水 Ｍａ ｃｉ ｌｕｅ ｓ ￣ ｓ
悬 浮培养 细胞异黄 酮合成 的影 响及细胞 结构变 化 ； 崔兴 华等口 。报道 了黑暗培 养条 件下 甘薯 （ｐ ｍｏａｂ ｔｔｓ 悬 Ｉ ｏ ｅ ａａａ ） 浮细 胞黄酮类 物质 的积 累情 况 。尽 管上述 这些 报道为 其他植 物 细胞 培养 及 黄酮积 累 的研 究提 供参 考 ， 是每 种 但 植物 基 因型 及生长条 件等存 在差 异 ， 因而没有标 准 的培 养 条件来 适 合昕有 植 物 的细胞 培 养及 产 物积 累 。 由于 目
对 细 胞 生 长 和黄 酮 积 累 的 影 响 。结 果 表 明 ， 附加 了 ２ ４Ｄ １ ０ｍｇ ｌ ＮＡ ． ／ 在 ，一 ． ／ ＋ Ａ ０ １ｍｇ Ｌ的 ＭＳ培 养 基 上诱 导茎 段
可 获 得适 于悬 浮 培 养 的 疏 松 型愈 伤 组 织 ， 导率 达 到 ９ 。正交 试 验 中各 因素 对 细 胞 生 长 和 黄酮 含 量 的影 响 效 应 诱 Ｏ
酸等 。其 中酚类成 分 中的黄酮类化 合物 一因有抗肿 瘤 、 ＨＩ 、 菌』 、 抗 Ｖ【 抑 １ 杀虫 。 等 药用 价值 而被 广泛 研
究。
由于瑞香 狼毒这 些药用 成分 主要通 过定期 到生长地 取材再 分离 纯化来 获取 ， 免会受 到植 物收获 期 、 难 地理 环 境、 土壤 结构 、 季节气 候 、 植物 病虫 害等 因素影响 ， 因而 ， 在产业 化过 程 的研 究 中还可 以考 虑用 细 胞悬 浮 培养 方式 来获取 。这一 途径具 有生产周 期相对 较短 ， 不受地 区和季 节限制 ， 避免病 虫危 害 ， 得产物 品质稳 定 ， 于大规模 所 利 培养 ， 可人为 调控细胞 生长 及其药用 成分 的代谢 途 径获 得 “ 产细 胞 株” 且 高 等优 点一一 已成 为开 发药 用植 物 资源 ，
雪莲 （ ａ ｓｕ ｅ ｄ ｓ ） Ｓ ｕｓｒａ ｍｅ ｕａ 培养 细胞 中黄酮形成 的影 响 以及 高产黄酮 雪莲 细胞 系的筛选 等 。Ｓ ｔ ｍｉ ｈ和 Ｒ ｉｕ ｅ 对植 ｄ
物 细 胞 悬 浮 培 养 与 黄 酮 类 化 合 物 的 积 累 关 系及 李 燕 等 对 植 物 组 织 和 细 胞 培 养 中 黄 酮 类 物 质 积 累 的 影 响 因 素
均 为 ２ ４ Ｄ 碳 源＞ Ｎ ， ＞ ＡＡ＞ ６Ｂ 较 高 浓 度 的 ２ ４Ｄ、 ＡＡ 和 ６Ｂ 均 有 利 于细 胞 生 长 和 黄 酮 积 累 ； 糖 最 有 利 于 － Ａ； ， Ｎ Ａ 蔗 细胞 生 长 和黄 酮 积 累 ， 次 是 葡 萄 糖 和 果糖 ； 于 细胞 生 长和 黄 酮 积 累 的培 养 摹 为 ： ＋２ ４ Ｉ ． ／ ＮＡ 其 适 Ｍｓ ，一 ）２ ０ ｍｇ Ｉ ＋ Ａ １ ０ ｍｇ Ｉ Ａ ０ ５ ｍ ／ ． ／ ＋６ Ｂ ． ｇ Ｉ ＋蔗 糖 ３ ／ 。细 胞 生 长 与 黄酮 积 累呈 极 显著 正 相 关 （ ． ６ ） Ｐ ０ ０ ， 属 于 ０ｇ Ｉ Ｒ 一０ ９ ７ ， ％ ． １ 这 生长 偶 联 型 的 次 生 代谢 模 型 。
关键 词 ： 香 狼 毒 ； 瑞 细胞 悬 浮 培 养 ； 酮 ； 黄 碳源 ； 物生 长 调 节 剂 植
中 图分 类 号 ： ４ ． ６ ． ； ４ Ｑ９ ９ ７ １ １ Ｑ９ ２ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ４ ５ ５ （ ０ ０ ０ １ ２Ｏ １ ０ ７ ９ ２ １ ） ６０ ３ 一 ８
瑞香 狼毒 （ ｔ ｌｒ ｋ ｍａｊ ｓ ｅ 为瑞香 科狼毒 属多 年生草本 植物 ， Ｓ ｅ ｅａｃ ａ ｅａ ｍ ） ｌ 又名 断肠草 ， 分布 于东北 、 华北 、 西南 、 西 北 等地 的干 草原 、 沙质草原 和典 型草原 上 ， 是我 国重要 纪 ６ ０年代 起 ， 国学者 已从 瑞 香 我 狼毒 中分离 并鉴定 出 ３ ０多种化合 物 ， 主要包括 甾醇 、 酚类成 分 、 氨基 酸 、 萜 类 、 甙 、 三 蒽 狼毒 甙及 有 毒 高分 子有 机
前 尚未见到 有建立瑞 香狼 毒细胞悬 浮培 养体系 以及用来 积 累黄 酮 的研究 报道 ， 以本 研究 通 过不 同植 物 生长 调 所
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草 业 学 报
ＡＣ１Ａ 、 ＰＲＡ ＴＡ ＣＵ ＩＴＵ ＲＡ Ｅ ＮＩ ＳＩ ＣＡ
第 ｌ卷 ９
第 ６期
２ ０年 １ Ｏ１ ２月
Ｖ ０ ． ９， １ １ Ｎｏ． ６
瑞 香狼 毒细胞 悬浮 培 养及 黄酮 积 累的研 究
王 文 星 ， 琪 ， 莹 ， 猛 ， 成有 安 汪 王 曹