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牛羊胚胎移植研究进展

资料来源:Zhihua Jiang and Troy L. Ott,《Reproductive Genomics in Domestic AnimalsK
成年个体的卵母细胞及邻近卵丘细胞相比,具更少 的RNA转录组〔9-血,且编码的基因数与mRNA产量明 显较少[11H2]o虽然两者的卵母细胞成熟率与受精率 没有太大的差异,但未性成熟个体的卵母细胞的卵 裂延迟且卵裂率与囊胚率都较低山)。据报道,延迟 卵裂的胚胎具更少的H3A〔⑷、H2A和组蛋白甲基转移 酶G9a〔⑸的表达量,这些都与胚胎质量有着直接的 关联,在运用供体卵母细胞时需注意。在体内胚方 面,19%〜38%具有3次以上冲胚经历的供体其所产 的正常形态胚胎受胎率极低或从不受胎,西贝血把 这种在牛胚胎移植中,供体牛生产的形态正常的胚 胎却从不受胎的现象称为供体牛效应。除此之外, 经产供体排出的卵子质量要好于育成供体山」。这些 研究表明卵母细胞质量直接影响着胚胎的后续发育, 不管是体内胚还是体外胚,都必须做好供体选择这 一环节。
手术法移植能获得很高的移植效果顷,而有些研究 却表明该方法效果并不佳旧。类似的问题也在其他 家畜胚胎移植研究中出现⑺8〕。这些差异都是生产中 重要的技术指标,直接影响着移植体系的建立与繁 育工作的实施。因而一个全面的技术体系分析与对 比,有利于相关人员的参考与研究方案的制定。
1供受体的选择
1. 1供体的选择供体的选择决定着胚胎的数量与 质量,囊胚期前的胚胎发育主要靠母系遗传物质来 维持,只有当受精卵运用自己的基因组而不再是母 系遗传物质时才能够进入囊胚发育期阶段(如图1)。 在对供体的选择时,首先要考虑其能否提供优质的 卵母细胞,这样才能获得优质的早期胚胎,提高母 系遗传物质与受体之间建立信号通路的成功率,进 而提高后期的着床率。未性成熟个体的卵母细胞与
2. 1羊的同期发情在试验中人们运用不同的方法 对其进行研究(如表1),表现出同一品种的不同处理 效果差异显著[26*27],如杨军祥等画用CIDR法和PGF2 法对波尔山羊进行处理,其同期发情率分别为 95.83%和55. 26%;不同品种的同一处理效果差异显 著,如丁威等必[用波杂一代羊、徐淮白山羊和长江 三角洲白山羊作为受体来研究受体发情同期化对妊 娠率的影响,表现出显著的差异;不同种类的激素 处理效果差异显著匕9);同时同期发情的效果还与营 养、繁殖季节、年龄等因素有关腕打在家畜的同期
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P —
(开始)
P
处理结果
(停止) (与自然发悄比较)
#
..... .......................

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(处理期间卵泡发育被抑制)
2 ••••• ••••
(卵泡被抑第而萎缩)
3 ••• •
..
(黄体发育被抑制)
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*****
延迟发情 提前发情 提前发情
00000
前列腺素同期发情处理原理
2019年第5期
黄承俊:牛羊胚胎移植研究进展
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牛羊胚胎移植研究进展
黄承俊,张文军,李宁
(辽宁省农业发展服务中心,辽宁沈阳110032)
摘 要:作为重要的畜牧育种手段之一,胚胎移植已成为中大型养殖场不可或缺的基本技术。了解其包括同情
发情、超数排卵、合子的获得与移植在内的不同技术环节,有助于胚胎移植技术体系的建立与优化,同时为相关人员
表1羊的同期发情技术 Table 1 Estrus synchronization and donors* superovulated of Sheep
供体的超数排卵
供受体的同期发情
文献作者
CIDR+FSH+LH+PG
王建国等⑶】
CIDR+FSH+PG CIDR+FSH+PG
CIDR+PMSG+PG;PG CIDR+FSH:CIDR+FSH+PG:PG+CIDR+FSH:PG
功館性黄休期:一肠生贾贰期•••

e*5#«w:ooo 傍发ooo
孕激素同期发情处理原理
自然熒体期:一 新生黄体期:・・・・ 人工黄体期:一
对照动物的卵泡期:—
激亲处理后卵泡期
图2同期发情原理
Fig.2 Synchronous estrus theory
2019年第5期
modern journal of animal husbandry and veterinary medicine
收稿日期:2019-03-05 作者简介:黄承俊(1988-),男,硕士研究生,助理畜牧师,研究方向为反刍动物胚胎工程。
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现代畜牧兽医
Two-cell
Four-cell
Eight-cell
CD O CID
Morula
2019年第5期
Blastocyst
图1胚胎2细胞至附值前阶段发育示意图(用于表示母体RNA的降解和胚胎基因组的激活) Fig.1 Schematic representation of preimplantation embryo development from the 2-cell stage
杨军祥等 马保华等[32]
FSH+PG+LH
达来等3
CIDR+PG+FSH FSH+PG
CIDR+PG
武和平等刖 任文军135】
CIDR+PMSG CIDR+FSH;CIDR+FSH +LH;CIDR+PMSG;
CIDR+PMSG+LH CIDR+FSH+PG
FSH+PGF2a
CIDR+PMSG PG;CIDR+PMSG;CIDR+ FSH
随着畜牧科技的快速发展,体外胚、分割胚、 性控胚、嵌合胚、转基因胚以及克隆胚的移植等先 后被运用于生产,为人们在反刍家畜保种育种与扩 繁上的研究提供了广阔的空间。然而随着研究的深 入,一些问题也开始摆在了人们的面前。在牛上, 有研究发现辅助生殖个体初生重比人工授精个体低 24%左右⑴,这与一些学者的研究结果恰相反⑵。有 研究发现超排能明显促进牛的双胎率⑶,而多数研 究表明超排对双胎的作用并不大⑷。有研究发现非
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2同期发情技术
同期发情技术作为胚胎移植的关键技术而倍受 关注。自1969年L. E. A. Rowson等成功地将PGF2a 应用于供受体牛的同期发情,这一技术开始广泛地 被人们研究,并成功地运用于生产实践中。这一技 术包括供受体的同期发情和供体的超数排卵,不同 的家畜其同期发情的方法与效果存在很大的差别, 但其技术的基础都一样,都是建立在生殖内分泌上。 基本原理是如图2。
3胚胎来源
3. 1体内胚主要针对人工授精后体内胚胎的收 集。胚胎的采集要考虑配种的时间、排卵的时间、 胚胎发育的过程及其运行的速度等因素,这样才能 得到较高的采集率,获得更多的理想合子(如表2)。 其方法主要有手术法和非手术法两种,手术法又有输 卵管法、子宫角法和内窥镜法。超排发情后6〜8 d
采出的奶牛胚胎较同一时间的绵羊胚胎发育缓慢, 采胚时应根据畜种的不同、胚胎位置的不同以及釆 胚方法的不同来确定版〕,这样才能提高采胚率。 3.1.1羊的体内胚苏和等阴和赵霞悶运用此法对 不同处理条件下的绵羊进行采胚,其成功率在15%〜 40%;李杰等网借助开腔器和人用子宫钳用带导管 的探针对绵羊进行非手术法采胚,其子宫颈通过率、 采胚率和受胎率分别为89%、16. 5%和2. 86%,且头 均采胚数2. 96枚。可以看出羊的非手术法采胚技术 困难很大,还不成熟,还有待人们的进一步研究及 完善。丁红*51用手术法、小挑法和腹腔镜法采集的 胚胎分别进行移植,其妊娠率分别为47.6%、6& 4% 和71.4%,差异显著(P<0.05)。由于在羊上使用腹 腔镜法能得到很好的移植效果及受胎率,且术后创 伤小,因此此方法可以作为未来的一个发展方向, 但目前仍以手术法采胚与取卵为主。 3.1.2牛的体内胚桑润滋等悶用子宫角冲胚法对 204只波尔山羊冲卵,结果采胚成功率为92. 16% (188/204),头均获胚胎16. 68 ±7. 89枚;张果平 等沏在对杜泊羊超数排卵的研究中发现,从输卵管 平均回收胚胎数要显著多于从子宫角平均回收的胚 胎数(10. 57 vs 8. 41)(P<0.05)。1972 年 Sugie 设 计成功牛非手术采集胚胎的方法,经过不断改进日趋 完善,但其只适用于牛马等大家畜,一般在配种后6 ~8 d进行〔57-5% 王军等画运用二通路法对340 mg (n=9)、 300 mg(n=9)和260 的 mg(n=7) Folltropin-v 超排下的利木赞供体母牛进行胚胎的采集研究,结 果获得的可用胚胎总数分别为7. 22 ±2. 63枚、
提供一定的技术参考。
关键词:胚胎移植;反刍家畜;研究进展
中图分类号:S814.8
文献标识码:A
文章编号:1672-9692(2019)05-0051-08
Studies of Embryo Tran sfer Tech no logy in Livestock
Huang Chengjun, Zhang Wenjun, Li Ning
PG FSH +PGF2a+LH
王素梅等[36】 刘建斌等⑵: 雷有鹏等3 马占峰等剛
CIDR+PMSG/FSH
CIDR+V(ADE)+PMSG、V(ADE)
FSH +PGF2a+LH
张举兴等⑶】 李春彦等”0】
赵霞等
FSH+LH
PG
吕礼良等⑷】
CIDR+PMSG+FSH+LH
CIDR+PMபைடு நூலகம்G+FSH
目前,主要依黄体的品质对牛羊受体进行等级分 类,随着黄体品质等级的下降其受胎率呈明显的下降 趋势血-沏。同时卵巢有无弹性也影响着受体的受胎 率⑼〕,试验显示,卵巢有无弹性其受胎率分别为 61. 3%和44. 1%。受体黄体数及小卵泡的有无对胚胎 移植妊娠率没有显著影响滋),但受品种的影响显
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