一、无菌体系的建立 1.母株选择 生长健壮，无病虫害，花色艳丽，或具有特殊性状。 2.母株预处理 施肥，浇水，病虫害防治，遮荫等。 3. 采集枝条 生理年龄小，生长健壮，无病虫害。 4. 粗洗 用软毛刷或毛笔沾上洗衣粉或洗洁精进行刷洗。 5. 分切枝条 分切成单芽茎段，叶柄以上部长0.5cm左右，下部长1cm左右。 6. 精洗 放入三角瓶中，加入水和洗洁精进行洗涤,时间10min左右。 7. 冲洗 在流水中冲洗2—3h。
四、生根培养
1.培养基 进行生根培养配方筛选。选出最佳的基本培 养基配方和激素种类及浓度配比。 2.无菌接种 代培养苗繁殖到一定数量后，当有80﹪的芽 体长度达到1.5cm时，在接种室中，把培养苗在 无菌条件下分切，大于1.5cm茎段，接种在生根 培养基中，进行生根培养；小于1.5cm茎段，接 种在继代培养基中，再进行继代培养，进一步扩 大培养苗数量。 3.培养管理 (1)光照强度 (2) 光周期 (3) 温度 (4) 湿度 (5)培养室消毒
月季组织培养技术
张 继 东
甘肃林业职业技术学院
月季
被称为花中皇后，又称"月月红"，蔷薇科。 常绿，半常绿低矮灌木，四季开花﹐一般 为红色﹐或粉色、偶有白色和黄色﹐可作 为观赏植物，也可作为药用植物，亦称月 季花。 自然花期8月到次年4月，中国是月季的原 产地之一。红色切花更成为情人间必送的 礼物之一，并成为爱情诗歌的主题。
总结:
1. 月季无菌体系的建立。 2. 月季初代培养过程。 3. 月季继代培养过程。 4. 月季生根培养过程。
作业 :
综述月季无菌体系建立的过程。

月季组织培养技术流程图 无菌体系建立——→初代培养——→继代培养——→生根培养 ↓ ↓ ↓ ↓ 母株选择 培养基 培养基 培养基 ↓ ↓ ↓ ↓ 母株预处理 接种 接种 接种 ↓ ↓ ↓ ↓ 采集枝条 培养管理 培养管理 培养管理 ↓ 1.光强 1.光强 1.光强 粗洗 2.光周期 2.光周期 2.光周期 ↓ 3.温度 3.湿度 3.湿度 分切枝条 4.湿度 4.温度 4.温度 ↓ 5.室内消毒 5.室内消毒 5.室内消毒 精洗 ↓ 流水 冲洗 ↓ 表面灭菌
三、继代培养
1.培养基 进行继代培养配方筛选，选出最佳的基本培养 基和激素种类及浓度配比。 2.无菌接种 在接种室中，把初代培养已经获得成功地月季 培养苗在无菌条件下分切成单芽茎段接种在培养瓶 中。每瓶3个芽体。在瓶内分布均匀，呈正三角形 分布。 3.培养管理 (1)光照强度 (2) 光周期 (3) 温度 (4) 湿度 (5)培养室消毒
8. 表面灭菌 在无菌条件下，进行表面灭菌处理。 理想的结果： 材料 成活； 菌类 死亡 在灭菌效果上有灭菌时间长短矛盾，材 料老嫩矛盾。 是本节的难点，成功与否靠试验和经验。 灭菌剂处理后，要用无菌水涮洗三次以 上，每次不少于5min。
二、初代培养
1.培养基 进行初代培养配方筛选，选出最佳的基本培养 基和激素种类及浓度配比。 2.无菌培养瓶中，每瓶1个芽体。 3.培养管理 (1)光照强度 (2) 光周期 (3) 温度 (4) 湿度 (5)培养室消毒