二、厌氧菌感染
（一）厌氧菌在正常人体的分布
厌氧菌与需氧菌一起组成了人体的 正常菌群。人体许多部位厌氧菌在种类 和数量上远多于需氧菌，如在结肠中 99%的细菌都是厌氧菌。 临床厌氧菌感染中，由正常菌群的 无芽胞厌氧菌的感染最为多见。
常见厌氧菌在正常人体的分布
主要菌属
芽胞厌氧菌 梭菌属 无芽胞厌氧菌 革兰阳性杆菌 丙酸杆菌属 双歧杆菌属 乳杆菌属 优杆菌属 放线菌属 革兰阴性杆菌 类杆菌属 普雷沃菌属 紫单胞菌属 梭杆菌属 革兰阳性球菌 消化球菌属 消化链球菌属 革兰阴性球菌 韦荣菌属 0 ＋ ＋ ＋ ＋－ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋－ ＋－ ＋＋ ＋＋ 0 0 0 0 ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋－ ＋ ＋ ＋ ＋＋ 0 0 ＋＋ 0 ＋ 0 0 ＋－ ＋－ ＋＝ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋－ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋ ＋－ 0 ＋－ 0 0 ＋－ ＋－ ＋＋ ＋－ 0 0 0 ＋＋ ＋－ ＋－
5. 厌氧袋运送法
6. 棉拭运送法 （略） 应在20~30min内处理完毕，最迟 不超过2h，防止标本中兼性厌氧菌过 度生长，抑制厌氧菌的生长。如不能 及时接种，应将标本保存于室温（因 冷藏对厌氧菌有害气味 直接涂片 染色镜检
分离培养
（接种非选择性及选择性培养基）
（二）厌氧菌感染的原因 1. 局部组织的氧化还原电势降低 如血 管损伤、烧伤、动脉硬化、肿瘤压迫、组织 坏死等，可造成局部组织的缺血、缺氧，使 Eｈ降低；此外，大面积外伤伴有需氧菌感 染消耗了氧，为厌氧菌感染提供了条件。 2 . 机体免疫功能下降 如接受免疫抑制 剂、放疗或化疗的患者；糖尿病、慢性肝、 肾疾病病人及老人、婴幼儿、早产儿等，因 免疫力下降易併发厌氧菌感染。
厌氧菌的初步鉴定
菌 名
脆弱类杆菌
具核酸杆菌 坏死梭杆菌 韦荣球菌 消化链球菌 乳酸杆菌 痤疮丙酸杆菌
革兰染色
G－
G－ G－ G－ G＋ G＋ G＋
形态及其他特征
两端钝圆着色深，中间色浅不均匀，有空泡，长短不一，标本有琥珀味 球杆菌，可见多形性，长短不一，紫外线照射发红色荧光，标本有恶臭 菌体细长，两头尖，紫色颗粒沿菌体长轴成双排列，标本有丁酸味 菌体细长，高度多形性，长短不一，菌体中部膨胀呈圆球形 极小的革兰阴性球菌 球形或卵圆形，呈链状的小球菌，易染成阴性 细长无芽胞，有时多形性，标本有乳酸气味 排列呈X、Y、V或栅状，标本有丙酸气味
厌氧性细菌及检验
第一节
概
述
厌氧性细菌(anaerobic bacteria)指一群必须在无氧条 件下才能生长繁殖的细菌。
一、厌氧菌的分类
分为两类：一类为有芽胞厌氧菌，只有一个属， 即梭菌属，共有130个种。以芽胞形式存于体外。 另一类为无芽胞厌氧菌， 包括40多个属，300 多个 菌种和亚种；多为体内正常菌 群，存在于皮肤、口 腔、上呼吸道、肠道和 泌 尿生殖道。易引起这些部 位的内源性感染，而不易诊断。
增菌培养
（接种液体培养基）
厌 氧培 养 2~7d 确定厌氧菌
每个平板挑5个以上菌落 每个菌落接种两个平板 经48ｈ培养
需氧培养
生 长 兼性厌氧菌 无生长 专性厌氧菌
厌氧培养
生 长
菌种保存 形态与染色
菌落
分类鉴定 生化反应
药物敏感试验 药敏性鉴定 气液相色谱
三、检验方法
（一）肉眼观察 应观察标本的性状， 如是否为脓性、带血，有无黑色坏死组织 或黑色分泌物，有无硫磺样颗粒或恶臭气 味等。这些有助于厌氧菌的鉴定和培养基 的选择。 （二）直接镜检 在接种前除血液外， 各种临床标本均需直接涂片染色、镜检， 以了解标本中细菌的数量、形态及染色性， 便于选择合适的培养基和培养方法，还可 验证培养结果的成功与失败。
皮肤
上呼吸道
口腔
肠道
尿道
阴道
3. 机体局部屏障破坏，使厌氧菌进入 周围组织和血液引起感染。
（三）厌氧菌感染的临床及细菌学指征 1 .局部有气体产生 为重要指征之一
2 .发生在粘膜附近的感染
3 .深部外伤
4 .有特殊的分泌物 如有恶臭，暗 红血色或在紫外光下发出红色荧光。如分 泌物或脓汁中有硫磺颗粒即为放线菌感染。
采集方法：采取深部的组织标本： 需经碘酒消毒皮肤后，用注射器插入病 变部位深部，抽取数毫升后，弃去一滴 于酒精棉球上。
不同部位标本采集法
标本来源 封闭性脓肿 妇女生殖道
下呼吸道分泌物
收集方法 针管抽取 后窟窿穿刺抽取
肺穿刺术
胸腔穿刺术
用静脉注射的塑料导管穿 入感染部位抽取
胸 腔
窦道 子宫腔 深部创伤
组 织 尿 道
无菌外科切开 膀胱穿刺
（二）标本的运送与处理
注意尽快送检，避免干燥，避免接触空气。
适宜液体标本。标本抽取 后排尽空气，并将针头插入无菌橡皮塞中即可送检。
1. 针筒运送法
2. 无氧小瓶运送法 常用于少量脓液标本的
运送。用无菌青霉素小瓶，瓶内装入0.5ｍｌ的心脑 浸液(含有0.0003%的刃天青---氧化还原指示剂）,加 橡皮塞后,铝盖密封，真空泵抽出瓶中空气，充入N2， 连续充抽3次，最后充以 CO2，高压灭菌备用。
5 . 某些抗生素治疗无效的感染 6 . 细菌形态培养有特征性变化 如革 兰染色着色不均、形态奇特、呈明显多形 性；或镜检查见细菌而需氧培养为阴性者。
第二节 厌氧菌的微生物学检验
一、标本的采集与运送 （一）标本采集 标本种类：血液、关节液、心包液、腹腔液、 膀胱穿刺液等体液；深部脓肿渗出液、肺部渗出 液、其他组织穿刺液。厌氧菌培养最好的标本是 组织标本，厌氧菌在其中更易生长。 采集注意事项：避免正常菌群污染，尽量避 免接触空气。有些标本如鼻咽拭子、痰液、流出 的脓液、阴道分泌物、粪便等因含大量的正常菌 群，故不宜作厌氧菌培养。
如有氧渗入小瓶，培养基则显粉红色， 应弃去。运送时挑选无色小瓶，将标本用无 菌注射器注入瓶中即可。 3. 标本充盈法送检 适宜于大量液体标 本运送。将液体标本装满标本瓶，加盖密封， 可驱除瓶中空气。
4. 组织块运送法 将组织块放在密封的 厌氧罐中运送。罐内放入经酸化硫酸铜浸泡 过的钢丝绒，其表面即有金属铜，具强还原 性，能迅速吸氧，造成厌氧罐中无氧状态。