弧菌科常规检验
弧菌科常规检验
弧菌科种类
弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光菌属等
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弧菌科共同特征
革兰阴性菌 需氧兼性厌氧 营养要求不高 氧化酶＋ 发酵葡萄糖产酸不产气
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弧菌科三个菌属的鉴别
试验 甘露醇 弧菌属 +/单胞菌 属 + 邻单胞菌 属 -
鸟氨酸
精氨酸 O/129敏感 TCBS生长 嗜盐性
小川型（AB） 稻叶型（AC）
彦岛型（ABC）
+ +
+
+ +
+
+
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抵抗力与变异
ElTor型抵抗力较古典型强， 在水中存活时间长 对酸性物质敏感 对庆大霉素耐受 多次传代可失去典型形态而成为杆状
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临床意义
致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮 细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。 所致疾病： 经肠道传染，引起烈性肠道传染病－－ 霍乱，为甲类传染病。 典型病人粪便呈“米泔水”样 病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。
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气单胞菌属
形态染色： 革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端 鞭毛，无芽孢 生长条件： 兼性厌氧；营养要求不高 生长温度较宽，0℃～45℃ 嗜冷菌37℃以下生长 嗜温菌10～42℃生长
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气单胞菌属
生长现象 TCBS上不生长 血平板：灰白、光滑、凸起菌落 肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落 生化反应 氧化酶＋、触酶＋ 发酵葡萄糖产酸产气 6.5％NaCl不生长 O129不敏感 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
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生化反应
试验名称
氧化酶 硝酸盐还原 赖氨酸
结果
+ + +
试验名称
吲哚 葡萄糖 蔗糖
结果
+ + +
鸟氨酸
精氨酸双水解
+ d +
甘露醇 0％、1％NaCl
7％、10％ NaCl
+ +
-
V-P 明胶液化
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霍乱弧菌生物型
O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生 物型 两种生物型具有相同的抗原结构 两种生物型多数生物学性状相似
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作用机制示意图
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微生物检验－－标本采集
发病早期采集标本 以“米泔水”样便为主，及时送检 卡－布培养基保存 严密包装，专人送检
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快速诊断
标本 增菌培养 碱性蛋白胨水
直接涂片 动力、制动试验
分离培养（TCBS、碱性平板） 血清学鉴定 初步报告 生化鉴定分型
+/+/S + +/-
+/R -
+
+ S 课件制作 陆曙梅
霍乱弧菌
是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体 包括古典生物型和ElTor生物型 O139是新的流行菌株
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形态染色
革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽孢，无荚膜 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列
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鉴定依据
革兰阴性杆菌，丛鞭毛 肠道选择平板上无色透明菌落 氧化酶＋、葡萄糖发酵＋ O/129：R TCBS：－ 6.5％NaCl：－
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邻单胞菌属－－主要性状
只有一个菌种：类志贺邻单胞菌 革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无 荚膜 兼性厌氧，营养要求不高 在SS平板形成不发酵乳糖菌落 氧化酶＋，葡萄糖发酵＋ O/129：S TCBS：不生长 6.5％NaCl：不生长 赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均＋ 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
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气单胞菌属－－临床意义
致病物质：溶血毒素、细胞毒素 所致疾病： 肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌 肠外感染：败血症、伤口感染等 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药
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检验程序
涂片 染色镜检 标本 血标本
分离培养 （血平板、Mac）
增菌
氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验
检验程序
确诊报告
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检验方法－－显微镜检查
涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注 意形态、排列 动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意 运动方式 制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动 力消失
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分离培养
标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时， 转种TCBS或庆大霉素琼脂， TCBS：出现黄色菌落 庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落
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霍乱弧菌两种生物型的鉴别
鉴别试验 V-P 羊红细胞溶解 50U多粘菌素 鸡红细胞凝集
Ⅳ组噬菌体裂解
Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 S -
ElTor生物型 + + R +
+
-
+
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霍乱弧菌分群、型
O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础 根据O抗原不同分为139个血清群 O1群包括古典生物型和ElTor生物型 其他群称为非O1群（非凝集弧菌） O1群血清型（见下表） 血清型 A抗原 B抗原 C抗原
可疑菌落 初步生化反应
全面生化反应
肠毒素测定
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鉴定试验
与肠道杆菌、非发酵菌鉴别 与邻单胞菌属和弧菌属鉴别 气单胞菌属种间鉴别
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肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
鉴定试验
氧化酶
肠杆菌科
－
非发酵菌
＋
弧菌科
＋
葡萄糖氧化/ 发酵（O/F） 鞭毛
F
周鞭毛
O／－
F
单、丛、周 单、丛
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鉴定
生化反应：粘丝试验、霍乱红反应 确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片 凝集，以确定是否为O1群 确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以 确定血清型别 确定生物型： 第Ⅳ组噬菌体裂解试验 多粘菌素B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验
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副溶血性弧菌－－生物学性状
霍乱弧菌
革 兰 染 色
鞭 毛 染 色
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培养特性
兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸，常用pH8.4～9.2碱性培养 基 在液体培养基中形成菌膜 菌落圆形、较大、扁平
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霍乱弧菌常用培养基
碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平 板（TCBS） 庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）
革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢， 无荚膜 营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5％ NaCl，无盐培养基不生长 TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解 人或兔红细胞，不溶解马红细胞
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副溶血性弧菌－－临床意义
致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和 耐热相关溶血素） 所致疾病： 食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引 起食物中毒
