低温诱导染色体加倍讲义
一)根尖培养
• 实验课前的3—5d,把洋葱放在 盛满水的广口瓶上,让它的底部接触 瓶内的水面。
二)低温诱导
当根长到lcm时,放入冰 箱内4℃低温下培养,处理36h。
三)固定根尖
剪取以上处理的根尖,每个 根尖为0.5—1cm,分别放人卡诺氏 固定液中固定30——60min,然后用 体积分数95%酒精洗两次
四)制作装片
取固定好的根尖,进行解离、漂洗、 染色和制片4个步骤,具体操作方法与 实验“观察植物细胞的有丝分裂”相同
五)观察
先用低倍镜寻找染色体形态较好的 分裂相,再换上高倍镜并调节细准焦螺 旋和反光镜,使物像清晰,仔细观察, 辨认哪些细胞发生染色体数目变化
应用: 多倍体育种
①原理: 染色体变异
实例: 三倍体无子西瓜的培育
无子西瓜的培育
秋水仙素处理
母本 四倍体
三倍体 植株
授粉 (受精)
父本
第
一
二倍体
年
(有子西瓜)
花粉刺激
(生长素)ຫໍສະໝຸດ 普通植株第 二年
无子西瓜
为什么三倍体植株所结的果实为无子西瓜呢?
三倍体植株(3N)在减数分裂过程中,同源 染色体联会发生紊乱,难以形成正常的生
殖细胞(卵细胞),所以不会产生种子。
洋葱:实验课前的3—5d,把 洋葱放在盛满水的广口瓶上,让它 的底部接触瓶内的水面。
选材时注意选择进行分裂的分生组织细 胞,不分裂的细胞染色体不复制,不会 出现染色体加倍的情况
• 卡诺氏固定液:固定细胞形态,使细胞 固定在某一分裂相
• 盐酸酒精解离液:使细胞彼此分散开 • 改良的苯酚品红染液:对细胞核染色
那香蕉呢?
香蕉的形成过程
香蕉的祖先为野生芭蕉,个小而多种子, 无法食用。香蕉的培育过程如下:
野生芭蕉 加倍 有籽香蕉
2n
4n
野生芭蕉 2n
无籽香蕉 3n
②方法: 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗
——是最常用且最有效的方法,但不是唯一方法。 ③作用机制: 秋水仙素能抑制纺锤体的形成,使染色体数目加倍
思考:
a、秋水仙素主要作用于细胞分裂的哪个时期? ——前期(因为纺锤体在前期形成) b、为什么要强调处理萌发的种子或幼苗?
—— 萌发的种子或幼苗的新陈代谢旺盛,则细胞分裂旺盛。
探究低温诱导染色体加倍
低温和秋水仙素一样,处 理植物分生组织细胞,能够 抑制纺锤体的形成,导致分 裂后期染色体不能移向两极, 细胞增大而不分裂,着丝点 分裂后的染色体仍在一个细 胞中,故细胞中的染色体数 目加倍。如果用低温处理根 尖,则在根尖分生区内可以 检测到大量染色体加倍的细 胞,如:处理植物幼苗的芽, 则可以得到染色体加倍的植 株。