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巨噬细胞吞噬


单核巨噬细胞
『实验内容和方法』 (一)标本制备 1、在实验前一天,每只小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤(含4%
的台盼蓝)lml。 2、实验时每组取一只经上述处理的小鼠,腹腔注射1%的
鸡红细胞悬液lml。然后轻揉小鼠腹部,使鸡红细胞分 散。(腹腔注射时不要刺伤内脏) 3、20分钟后向腹腔注射0.5 ml生理盐水,轻揉小鼠腹部, 使其腹腔液稀释。3分钟后用用颈椎脱臼法处死小鼠。 4、将小鼠置于解剖盘中或卫生纸上,剪开腹腔,把内脏 推向一侧,用吸管或不装针头的注射器吸取腹腔液。 5、每人取一干净载玻片,滴一滴腹腔液,盖上盖玻片, 标本便制备好了。 6、实验绘图。
『验原理』
高等动物体内存在着具有防疫功能的吞噬细胞 系统,它由粒细胞和单核细胞等白细胞构成,是 机体免疫系统的重要组成部分。巨噬细胞是体内 的一种重要的免疫细胞,具有非特异性吞噬功能, 当机体受到细菌等病原体及其它异物侵入时,巨 噬细胞将向病原体或异物游走,当接触异物时, 伸出伪足将其包围并进行内吞作用,将病原体或 异物吞入细胞,形成吞噬泡,进而初级溶酶体与 吞噬泡发生融合,将异物消化分解掉。本实验将 观察到小鼠巨噬细胞对进入其体内的鸡血红细胞 进行吞噬的情况。
『思考题』
计算巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。
吞噬率%= (吞噬鸡血红细胞的巨噬细胞÷100个巨噬细胞) ×100% 吞噬指数=100个巨噬细胞中吞噬鸡血红细胞的总数÷100个吞 噬鸡血红细胞的巨噬细胞
(二)观察
巨噬细胞体积较大,呈圆形或不规则形,表面 具有多个突起(伪足),胞质中含有数量不等、大 小不一的蓝色颗粒,它们是细胞吞噬含台盼蓝的 淀粉肉汤后形成的吞噬体;
鸡红细胞呈椭圆形,淡黄色,具椭圆形的细胞 核。
在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不 同阶段。有的鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面;有 的红细胞已部分被吞入;有的巨噬细胞已吞入1个 或多个红细胞,形成了吞噬泡。还可见有的吞噬 泡体积已缩小并呈圆形,这说明该吞噬泡已与溶 酶体发生融合,泡内的物质正在消化分解。
捉拿方法:
将小白鼠放在鼠笼盖铁网上,用右手持 其尾巴向后拉,小鼠则会尽力向前蹬。 用左手的拇指和食指抓住其头顶部皮肤, 然后用左手小指与手掌之间夹住其尾巴。
腹腔注射
给药方法:
小白鼠的给药途径有经口给药、腹腔内注射、尾静 脉注射、皮下注射、皮内注射和肌肉注射等。我们 常用的是腹腔注射。具体方法是:左手捉住小鼠(如 前所述),在其腹正中线稍外侧(避开膀胱和血管)用 酒精消毒后,首先将注射针头向头部方向刺入皮下, 进针1~2mm后,再以45°角刺穿腹部肌肉而进入腹 腔(刺穿腹肌时有一落空感)。针头刺入腹腔后切勿 左右摆动,以免损伤肠管或肝脏。注意每次注入的 液体量应为0.1~0.2ml/10克体重。
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