中国、美国和欧盟药典纯化水、注射用水部分指标
1、纯化水
中国药典
微生物＜100cfu/ml ……
美国药典
内毒素不控制 总有机碳： （TOC）＜0.5mg/l 微生物＜100cfu/ml 电导率＜1.3μs/cm
欧洲药典
内毒素＜0.25EU/ml 总有机碳: 同美国
微生物: 同美国 电导率 ＜1.3μs/cm

管道





阀门
1. 禁止使用球阀
2. 阀门关闭时细菌会生长 3. 水通过阀门时会被污染
管路
CFR212（1976）6D 规则：
未使用部分的长度不得超过未使用管道直径的6倍 。
FDA： “高纯水系统检查指南”
仅仅适用于75 ℃ - 80 ℃的热水 循环系统工。
水储存分配温度


< 15℃ 或 > 55 ℃ 4 - 10 ℃, >65 ℃ > 80 ℃ 可视作自净系统
制药用水设备验证的要点: （FDA高纯水系统检查指南）
制药用水设备验证的关键有以下3点 (1）能获得目的水质（与药品质量相符） 证明ＳＯＰ合理性的数据充分。 (2)该ＳＯＰ具有科学依据，并显示有恒常性。 (3)年间季节的变动对最终水质或操作规程无影响。
2、FDA工艺用水验证阶段
验证阶段 周期 4周 4周 一年 取样/检测 2次/使用点 同上
电导率＜0.5μs/cm
电导率＜1.1μs/cm
Alert limit警戒限度
Design condition 设计条件 Normal operating range 正常运行范围
Action limit行动限度
Allowable operating range 允许运行范围
电导率＜1.3μs/cm
运行确认的测试项目
-
制备系统 组件测试 报警功能，过程测试 操作面板 删除和装载软件 校验
-
运行确认的测试项目
-
分配系统 组件测试 报警功能，过程测试 操作面板 删除和装载软件 校验
-
水系统的性能验证



第一阶段(几天) 密集取样/测试,系统所有方面,短期 第二阶段(几周) 较密集取样/测试,轮换取样,建立日常监测计划 第三阶段(几月) 继续日常检测,通常至少12个月 变更控制 第三阶段水一般能用于生产 定期回顾水监测结果/趋势

需要将水系统看作是一整体

进水,预处理,纯化,贮存,分配,使用等

验证程序分成几个阶段

应包括季节变动(最少12个月)

建立行动或警戒限度,消毒频率,日常取样点 建立日常监控规程,随后进行维护,变更控制
水系统验证应具备的文件
用户要求说明（URS） 设计确认 （DQ） 安装确认 （IQ） 运行确认 （OQ） 性能确认 （PQ）
企业必须制订检测标准
谢谢
水系统微生物控制要点





材质 流速 温度 死角 卫生管道和连接 表面光滑度 消毒/灭菌措施
提示：
在系统设计时，尽可能应用这些原则 现有设备缺少一个或几个要素时，仍有 可能较好地控制系统的微生物 日常运行也是关键因素

水系统验证

原则上与其它设备/系统的验证相同 (URS,IQ,OQ,etc)

安装确认的测试项目
-
制备系统 组件检查
-
信号回路测试 压力测试 转向测试
管道标示 文件检查，校验，材质证明…
安装确认的测试项目

分配系统
- 组件检查
-
-
-
坡度测试，压力测试，盲管测试，呼吸滤器的效 率测试 焊接（焊接的参数，X线探伤记录）,管道保温和 标识, 清洁和钝化记录 输入/输出测试
WHO对注射用水的要求
注射用水
1.
WHO对注射用水的要求除了多一项无热原外， 与纯化水一样
一般用蒸馏方法制备 储存时间应少于24小时
2. 3.
4.
必须制订具体的微生物限度
WHO对热原和内毒素的处理
热原和内毒素
1.
2.ห้องสมุดไป่ตู้3.
任何注射进入哺乳动物体内会造成发烧的物质统称为 “热原” 内毒素是热原物质，来自革兰氏阴性细菌的细胞壁片 段 检测内毒素采用的是脂多糖测试法


兔热原检测法 鲎试验检测法
4. 超滤、蒸馏和反渗透可以去除热原
警戒水平和纠偏限度的制订

警戒限度根据验证和日常运行数据进行统计学处 理设置 纠偏限度一般遵循USP的建议 - 饮用水： 500CFU/mL - 纯化水： 100CFU/mL - 注射用水：10CFU/100mL

生产用水关键参数的设置

预防
设计建造
日常运行
生物污染物和热量


80℃时，只有孢子和一些极端嗜热菌才能存活 大多数嗜热菌在73 ℃时就停止生长 大多数病原菌在50-60 ℃以上就停止生长 微生物的营养体在60 ℃以上就停止生长
贮罐

基本设计原则
能完全排空，高且窄 通气口可灭菌 所有表面都能由流水冲洗
生物膜的形成
1、水系统中的浮游生物

自由游动 通常可以被检测到
2、水系统深部的微生物

附着在管壁或罐壁上 不易被检测到
生物膜的成因

一旦生物膜形成, 细菌就有了一个物理保 护层。

它足以抵抗1000-1500 次的化学清洗。
FDA：“高纯水系统检查指南”

水系统中的微生物一般浮游在水中或附着在 管壁或罐壁上。附着在管壁或罐壁上时称其 为生物膜，它能持续脱落微生物。 因此，系统污染呈不均匀性，样品也就有可 能不能代表污染的类型或数量。 一个样品中细菌数为10 CFU/mL ，而另一个 样品为100甚至 1000CFU/mL，这样的结果 是没有实际意义的。
制药工艺用水的定义

水是药物生产中用量最大、使用最广 的一种辅料，用于生产过程及药物制 剂的制备。（中国药典2010版）
基本组成 制药用水设备例
纯化水 生产装置
原水
活性炭塔 ＲＯ膜装置 去离子装置
(纯化水储罐)
注射用水生产装置
纯蒸汽发生装置
（ＵＦ膜装置）
纯化水 供应装置
蒸馏器
注射用水供应装置
纯蒸汽发生装置
储罐 水泵 热交换器 管道 阀门 接口

制药用水的质量构成

化学：
纯化阶段决定

微生物：
更注重从设计到运行和监测的整个过程
水系统微生物污染的来源
原料水 外源性污染 内源性污染

外源性污染
外源性污染主要指来自于水系统外部的原 因对系统造成的污染，例如：

系统未与外界空气隔绝
制药用水系统 微生物检测和验证
本次培训的目的

制药用工艺用水
定义? 用途? GMP的要求?

水系统基本构造 水系统微生物污染的来源及控制 水系统验证
制药用水的定义

Water is the most widely used substances, raw material, or ingredient in the production, processing, and formulation of compendial articles. (USP General Information section 1231)
纯化水: 一次/周. 注射用水: 一次/天 一次/周
目的 完成后形成SOP 按照SOP执行时,水系统可以制备出 符合规定的水质. 入水质量发生变化时,对系统和出水 水质无影响
1 2 3
检测
1.
2.
3.
方法确认 化学检测 微生物检测

检测方法 培养基类型


培养时间和温度 控制菌和标志性的微生物
管道的连接泄漏 储罐上的呼吸口未使用过滤器 过滤器泄漏


倒流污染，如出水口污染后发生倒流 维护和维修后，如更换活性炭和树脂的颗粒残 留
内源性污染
内源性污染是指水系统的各设备单元本身 造成的微生物污染。


设备对微生物的吸附并形成生物膜，如活性炭， 离子交换树脂，过滤器膜等 配水管道的内表面、阀门等附着微生物
已有水系统的验证



回顾性验证 回顾性验证不允许有严重的缺陷或失控 回顾的主要内容：
整个系统的设计和构造
运行规程（运行、清洁、消毒、维护）
偏差处理
取样计划
培训 文件的完整性
水系统的微生物水质标准





药典并未给出确定的微生物限度 必须建立警戒水平和纠偏限度 警戒水平和纠偏限度不同于工艺参数和产品规格 标准，只用于系统的监控 警戒水平和纠偏限度应建立在工艺和产品规格标 准的范围之内 超出警戒水平和纠偏限度并不一定意味已危及产 品质量
内毒素＜0.25EU/ml 总有机碳： 微生物＜10cfu/100ml （TOC）＜0.5mg/l 微生物＜10cfu/100ml 电导率＜1.1μs/cm
FDA对注射用水系统的几个原则:
1）注射用水系统微生物数不得超过警示限量10cfu/100mL
2）建议注射用水取样量为100-300 mL，不得小于100 mL 3）必须关注水的预处理，定期监测原水质量


细菌性热原污染


热原是指可能致热的微生物的代谢产物 外源性和内源性污染都可能导致热原污染 革兰氏阴性杆菌存在于细胞壁外壁层上的内毒 素－磷脂多糖与蛋白质的复合物－是热原反应 的主要因素