1、 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱 氧核苷酸对，其中腺嘌岭脱氧核苷酸是 460个）放入 DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧 啶脱氧核苷酸的个数是（ ）个 A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 7560
2、在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中， 不属于分子检测的是( )。 A．通过观察害虫吃棉叶是否死亡 B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带 C ．检测目的基因转录形成的 mRNA 与 DNA 探针能否形成杂 交带 D．检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂 交带
生物选修三专题复习
【一、 基因工程】
一、DNA重组所需的三种工具： 1、限制性内切酶——“手术刀” 作用：切割磷酸二酯键 ①EcoRⅠ→产生粘性末端 ②SmaⅠ→产生平末端 2、DNA连接酶——“分子缝合针” 作用：链接磷酸二酯键 ①E˙coliDNA连接酶→连接粘性末端 ②T4DNA连接酶→连接平末端或粘性末端 3、载体——“分子运输车” 条件：①有一个或者多个限制酶切割位点 ②能自我复制 ③有特殊的标记基因 （常用质粒作为载体）
固体 培养成植 蔗糖 株 植物激素 液体 葡萄糖 动物血清 培养成 细胞株 细胞系
动 物
获得细胞 产品、细 胞
3、 多 莉 羊 的 培 育 过 程
2、基因表达载体的构建 ——
①过程：:
核心
质粒
DNA分子 同一种 限制酶处理
一个切口 两个黏性末端 DNA连接酶
两个切口 获得目的基因
重组DNA分子（重组质粒）
②组成：必须有启动子、目的基因、终止子以及标记基 因等。
3、将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 导入植物细胞 方法 基因枪法（单子叶） 花粉管通道法
三、基因工程的应用
（1）植物方面 1、抗虫转基因植物 2、抗病转基因植物 3、抗逆转基因植物 4、改良植物品质 （2）动物方面 1、提高动物生长速度 2、改善畜产品的品质 3、用转基因动物生产药物 4、用转基因动物作器官移植的供体 （3）基因治疗：将外源基因通过基因转移技术将其插 入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物 能治疗某种疾病。（只是改变体细胞的基因，生殖细 胞未改变，后代可能还会患病。）
愈伤组织特点：细胞排列疏松、高度液泡化、细胞壁 薄、呈无定形状态
（二）植物体细胞杂交
意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种
应用： （1）微型繁殖 （2）作物脱毒 （3）人工种子
胚 状 体→胚 薄膜→种皮 培养基→胚乳
（4）单倍体育种 （5）细胞产物的工厂化生产
二、动物细胞工程
动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官
胰蛋白酶 （分解弹性纤维） 细胞悬浮液 原代培养 10代细胞
原代 细胞 细胞株
50代细胞 细胞系
无限传代
传代培养
1、动物细胞培养 的条件 (1)无菌无毒的环境 (2)营养 (3)温度和pH (4)气体环境
2、植物组织培养和动物细胞培养的比较
项 目 植 物 原理 细 胞 全 能 性 细 胞 增 殖 培养基 结果 培养目的 快速繁殖 培养无病毒 植株
Hale Waihona Puke 3、哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因
4、(2008,全国高考)已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3 个酶切位点。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶 切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有 多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切 位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性 DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种数是 （ ）
3、植物组织培养
（1）培养基： ① 水 ② 无机盐 ③有机小分子：糖、氨基酸等 ④激素：生长素，细胞分裂素 ⑤琼脂：起支持作用 还需提供适宜的条件（如无菌环境和适宜温度）
（2）过程：
离体细胞、组织、器官
脱分化（无光）
注意：取材 须取形成层， 生长素和细 胞分裂素的 比例。
愈伤组织
再分化（有光）
胚状体或丛芽 试管苗
A．3 C. 9
B．4 D．12
a
b
c
d
【二、蛋白质工程】
1、蛋白质工程的实质：定向改造或生产人类所 需的蛋白质。
2、结果：可以生产自然界没有的蛋白质
3、操作对象：基因结构
4、过程：先反中心法则，后顺中心法则。 预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推 测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸 序列（基因）
【三、细胞工程】
一、植物细胞工程 （一）植物的组织培养 1、细胞全能性：已经分化的细胞仍具有发育成完 整个体的潜能。 原因：生物的每一个细胞都含有该物种所特有的 全套遗传物质。 2、全能性大小：受精卵＞生殖细胞＞体细胞 植物细胞 > 动物细胞 分化程度低 > 分化程度高 细胞分裂能力强 > 细胞分裂能力弱 幼嫩的细胞 > 衰老的细胞
细胞内温和条件 合成DNA分子
DNA在高温下变性解旋 细胞外(主要在PCR扩增仪 中) 耐热的DNA聚合酶
控制温度，需90 ℃～95 ℃高温 合成DNA片段或基因
场所 酶
温度 结果
(1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板 (2)原料：均为四种脱氧核苷酸 联系 (3)酶：均需DNA聚合酶 (4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连 接脱氧核苷酸
1、目的基因的获取（1）从基因获取基因组： 含有一种生物的库)
（2）利用PCR技术扩增目的基因 （3）人工合成
PCR技术与DNA复制的比较
比较项目 DNA复制 PCR技术
解旋 方式
区 别
解旋酶催化 细胞内(主要在细胞核内) 解旋酶、DNA聚合酶
导入动物细胞 ——显微注射法
导入微生物细胞 —— 感受态细胞吸收 DNA分子（ Ca2+法）
4、目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 ①检测转基因生物染色体的DNA 上是否插入了目的基因 方法—— DNA分子杂交 检测— ②检测目的基因是否转录出了mRNA 方法—— 分子杂交 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法—— 抗原-抗体杂交 鉴定— 个体生物学水平的鉴定，如抗虫鉴定、 抗病鉴定、活性鉴定等