病 原检 测领 域 。
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３—０ ３—２ ７ 基金项 目 ： 浙江省大学生新苗计划资助（ 编号 ： ２ ０ １ ２ Ｒ４ ０ ９ ０ １ ２ ） 。
作者简介 ： 姚含笑 （ １ ９ ９ ２一） ， 女， 浙江人 ； 本科 ， 研 究方向 ： 植 物检疫。 通讯作者 ： 王雪艳 （ １ ９ ８ ０一）， 女， 河北张 家 口人 ； 副教授 ， 主要从事 水稻 分子生物学 ； Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｗ ｘ ｙ ＠ｃ ｊ ｌ ｕ ． ｅ ｄ ｕ ． ｃ ｎ 。
ＹＡ Ｏ Ｈａ ｎ ． ｘ ｉ ａ ｏ ， Ｌ Ｕ Ｗｅ ｎ ， ＷＵ Ｊ ｉ ａ － ｊ ｉ ａ ， Ｐ ＡＮ Ｌ ｕ ． ｑ ｉ ， ＷＡ ＮＧ Ｘｕ ｅ － ｙ ａ ｎ
摘要 ： 随着 中国与世 界各 国动植 物及 其产 品 贸 易的不断 增加 ，
４ １ 种 Ｊ 。对 各 种 检 疫 性 有 害 生 物 实 现 快 速 准 确 的 检
随着 中国对外贸易的迅猛发展 ， 农业生产的扩大 ， 国民消费需求的增长 ， 进 出境动植物 、 动植物产品及其 检疫 物 的数 量 、 品种 随之增 多 。加 强 出入境 卫生 检疫 ， 对防止动物传染病 、 寄生虫病和植 物危害性病 、 虫、 杂 草以及其它有害生物等传人国境 ， 保护农业发展 ， 对外 贸易都是必要 的。根据农业部 ２ ０ ０ ７年 颁发 的第 ８ ６ ２
Ｐ Ｃ Ｒ（ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍ ｅ ｒ ａ ｓ ｅ Ｃ ｈ ａ ｉ ｎ Ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ） 技术起 源于 ２ ０ 世纪 ８ ０年代 ， 用于 Ｄ Ｎ Ａ的体外扩增。该项技术快速 、 灵敏、 准确 ， 一 次反 应 可 扩 增 ２ （ ｎ为 反 应 循 环 数 ） 个 拷 贝 的 目标 Ｄ Ｎ Ａ。 与其 它 Ｐ Ｃ Ｒ技术相 比， 常规 Ｐ Ｃ Ｒ 技术 具有 成 本低 ， 易操 作等 优点 ， 已被 广 泛应 用 于植 物
问题探讨
姚含笑 等 ： 核 酸检测 在植 物检疫性病害诊断 中的应用
核 酸检 测在 植 物 检 疫 性 病 害 诊 断 中的应 用
姚 含笑 。 陆 雯 ， 吴 佳佳 ， 潘 璐琪 。 王 雪艳
（ １ ． 中国计量学院生命科学学院， 浙江 杭州 ３ １ ０ ０ １ ８ ；２ ． 中国计量学院现代科技学院 ， 浙江 杭州 ３ １ ０ ０ １ ８ ）
号公 告 ， 中华 人 民共 和 国进境 植 物 检 疫 性 有 害 生 物 共 ４ ３ ５种 ， 其 中昆 虫 １ ４ ６种 ， 软 体动 物 ６种 ， 真菌 １ ２ ５种 ， 原 核 生物 ５ ８种 ， 线虫 ２ ０种 ， 病 毒及类 病 毒 ３ ９种 ， 杂 草
１ 常规 Ｐ Ｃ Ｒ技术
检 疫 领 域 中的 应 用 进 行 综 述 。
测， 已成为检验检疫行业重要 的研究内容。 核酸是 生 物体 内重 要 的遗 传 物 质。核 酸检 测 （ Ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｉ ｃ Ａ ｃ ｉ ｄ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ， Ｎ Ａ Ｔ ） 技术 以聚合酶链式 反应 （ Ｐ ｏ ｌ ｙ ｍｅ ｒ ａ ｓ ｅ Ｃ ｈ ａ ｉ ｎ Ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｐ Ｃ Ｒ） 为基 础 ， 通 过 对 靶
加强 出入境动植 物有害生物的检疫 ， 建立 高效、 灵敏 、 准确 的检 验技 术 ， 对保护我 国农产 品安 全有着重要 的意 义。核 酸检测技 术（ Ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｉ ｃ Ａ ｃ ｉ ｄ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ） 以Ｄ Ｎ Ａ为检测 对象 ， 能够对 生物进 行 快速精确 的鉴定。它操作 简单 、 成本低 、 效率 高 ， 在检 验检 疫领 域有 着广阔的应用前 景。本 文将 对核 酸检 测在植 物病 害检 验
Ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ｉ ｃ Ａ ｃ ｉ ｄ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ ｏ ｎ Ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ Ｐ ｌ ａ ｎ ｔ Ｑ ｕ ａ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｎ ｅ Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｓ
在真菌检测领域 ， Ｖ ａ ｎ ｄ ｅ ｎ Ｂ ｏ ｏ ｇ ｅ ｒ ｔ 等根据马铃薯 癌肿病 菌 （ Ｓ ｙ ｎ ｃ ｈ ｙ ｔ ｒ ｉ ｕ ｍ ｅ ｎ ｄ ｏ ｂ ｉ ｏ ｔ ｉ ｃ ｕ ｍ）的 Ｉ Ｔ Ｓ序列设 计引物 ， 实现 了对该病原 的特异性 扩增 ； 王国芬等 』
［ ６ ］ 马 勇． 倒 伏 对 不 同熟 期 小 麦 品种 籽 粒发 育 进 程 影 响研 究
验检疫领域 ， 由于 Ｎ Ａ Ｔ的检测灵敏度和效率均 比传统 方 法有 所 提高 ， 因此 具 有 广 阔 的应 用 前 景 。利 用 Ｎ Ａ Ｔ
对 病原 进行 检测 的关键 在 于获 得 病 原 的特 异性 序 列 。 目前 ， 主要 以病 原菌 的 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ Ｎ Ａ或 １ ８ Ｓ ｒ Ｄ Ｎ Ａ， 基 因间 隔 区域 （ Ｉ Ｔ Ｓ ） 以及 某 些 特 异性 基 因 为靶 序 列 设 计 特异 性 探针 或 引物 。本文 将对 核 酸检测 在植 物病 原检 疫领 域 的应 用进 行概 述 。
Ｄ Ｎ Ａ片段 的特 异性 扩增 达 到 检测 病 原 的 目的 。 目前 ， Ｎ Ａ Ｔ在微 生 物 检 测 方 面应 用 非 常 广 泛 。在 动 植 物 检
关键词 ： 核酸检测 ； 植 物病害 ； 诊断； 检验检疫
中 图分类号 ： Ｓ ４ Fra bibliotek － ３ ０ 文献标志码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ １— ４ ７ ０ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７ － ０ ０ ８ ３ － ０ ４